多项生化项目参考区间验证分析

杨俊英

（山西省临汾市人民医院，山西临汾 041000）

多项生化项目参考区间验证分析

杨俊英

（山西省临汾市人民医院，山西临汾 041000）

目的对DXC800全自动生化分析仪丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、γ谷氨酰基转肽酶（GGT）、碱性磷酸酶（ALP）、总蛋白（TP）、清蛋白（GLB）、清蛋白/球蛋白比值（A/G）参考区间进行验证分析。方法根据《WS/T402－2012临床实验室检验项目参考区间的制定》的要求，每个被验证项目纳入至少20例健康参考个体，在DXC800全自动生化分析仪性能可靠、室内质控在控的前提下，按实验室标准化操作程序进行检测，采用DIXON方法剔除离群值。结果健康参考个体所有被验证项目测定结果100%落在《WS/T402－2012临床实验室检验项目参考区间的制定》规定的参考区间之内。结论《WS/T402－2012临床实验室检验项目参考区间的制定》所规定的8个生化常规项目参考区间适用于本实验室。

参考区间； 验证分析； 生化项目

参考区间又称参考范围，是实验室最常用的解释检验报告的“决策支持工具”［1］。适宜的参考区间对疾病的预防、诊断、疗效及预后判断都有重要的意义［2］。然而，建立参考区间的工作量和成本巨大，目前普遍认为，临床实验室引用参考区间比自己建立参考区间更为现实、合理［3－4］。本研究依据《WS/T402－2012临床实验室检验项目参考区间的制定》有关规定，对本实验室全自动生化分析仪丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、γ谷氨酰基转肽酶（GGT）、碱性磷酸酶（ALP）、总蛋白（TP）、清蛋白（GLB）、清蛋白/球蛋白比值（A/G）参考区间进行验证［5］。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择男、女性健康参考个体不少于20例。健康参考个体筛选标准:自觉健康；无消化系统疾病、急慢性感染、肾脏疾病、代谢和营养疾病、风湿性疾病、甲状腺疾病、肥胖、高血压、烧伤和肌肉损伤；近期未曾献血、输血、大量失血、手术或服务用药；无消瘦、饥饿、营养不良等；近期无剧烈运动或重体力劳动、呕吐；女性无月经量过多、未处于妊娠或哺乳期；无长期低钾盐饮食；无慢性理化损伤或长期接触化学物质［3］。

1.2 仪器与试剂 贝克曼公司DXC800全自动生化分析仪及配套试剂、校准品，英国朗道公司质控品:低值LOT768UN，高值LOT560UE。

1.3 方法

1.3.1 检测系统准备 DXC800全自动生化分析仪进行日常维护保养，并做精密度、准确度等性能评价。每天进行室内质控，按计划参加卫生部和山西省临检中心室间质评。

1.3.2 标本采集与检测 按要求采集合格的血液标本，具体要求如下。（1）参考个体准备:采血前3天保持正常生活习惯，不做剧烈运动和重体力劳动；采血前1天晚餐后至第2天上午采血前禁食，禁食时间8～14 h；（2）采血:参考个体取坐位，自肘前静脉采血；血液采用真空采血管，采集后2 h内分离血清，检查并剔除溶血、黄疸、乳糜标本，血清分离后2 h内进行检测［6］。按实验室仪器标准化操作程序进行标本检测，并记录检测结果。

1.3.3 离群值剔除 离群值剔除采用DIXON方法［7］。首先将检测结果按照由大到小的顺序排序并计算极差（R），然后分别计算最大值和最小值与其相邻数值之差（D max，D min），若D max/R≥1/3或D min/R≥1/3，则将最大值或最小值视为离群值予以剔除；将余下数据重复前述步骤进行离群值检验，直至剔除所有离群值。

1.3.4 参考区间评估 20个检验结果与《WS/T404临床常用生化检验项目参考区间》进行比较，若超出参考区间的数据不超过2个，则通过验证；若超过2个，则另选20例合格参考个体重新按照上述判断标准进行验证。验证结果若符合要求，可直接使用被验证的参考区间，否则查找原因。

2 结 果

2.1 离群值检测 将测定数据进行离群值检测，结果所有检测项目D max/R≥1/3、D min/R≥1/3，说明收集的数据符合要求，见表1。

2.2 参考区间验证 健康参考个体检测ALT、AST、GGT、ALP时按性别分组，且女性健康参考个体检测ALP时按年龄段分组，经验证发现8个被验证项目健康参考个体所测结果100%落在《WS/T404临床常用生化检验项目参考区间》规定的参考区间之内，见表2。

3 讨 论

参考区间是解释检验结果、分析检验信息的基本尺标，是临床判断受试者健康与否的依据，实验室必须保证给临床提供的参考区间正确实用，否则会导致漏诊、误诊［8］。但建立实验室参考区间的方法要求高、程序复杂，工作量和成本巨大，所以可通过转移、引用的方法建立参考区间［3］。本实验室现在使用的参考区间是《全国临床检验操作规程（第3版）》规定的权威数据［9］，应山西省临检中心要求，通过《WS/T402－2012临床实验室检验项目参考区间的制定》规定的方法对山西临汾地区成年人ALT、AST、GGT、ALP、TP、ALB、GLB、A/G参考区间进行验证；若通过验证，本实验室将于2013年8月1日开始改用《WS/T404临床常用生化检验项目参考区间》规定的参考区间。

本研究对生化常规检验项目ALT、AST、GGT、ALP、TP、ALB、GLB、A/G的参考区间进行了验证分析。在仪器性能可靠、室内质控在控的前提下，选择至少20名健康参考个体进行分析，验证结果显示健康参考个体所有被验证项目测定结果100%落在《WS/T404临床常用生化检验项目参考区间》规定的参考区间之内，所以该标准规定的8个生化常规项目参考区间适用于本实验室。

［1］Jones G，Barker A.Reference intervals［J］.Clin Biochem Rev，2008，29（1）:93－97.

［2］陈桂山，杨有业，梁锦胜，等.临床医学实验室生物参考区间的建立［J］.检验医学，2008，23（4）:421－424.

［3］Clinical Laboratory Standard Institute.C28－A3 Defining，establishing and verifying reference intervals in the clinical laboratory；proposed guidance－third edition［S］.Wayne，PA，USA:CLSI，2008.

［4］Ichihara K，Boyd JC.An appraisal of statistical procedures used in derivation of reference intervals［J］.Clin Chem Lab Med，2010，48 （11）:1537－1551.

［5］山西省临检中心.2013年山西省临床检验室间质量评价总结［M］.太原:山西省临检中心，2013:7－23.

［6］Donald S.分析前因素对临床检验结果的影响［M］.3版.李艳，译.北京:人民军医出版社，2009.

［7］National Committee for Clinical Laboratory.C2A－A2 How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory；approved guideline－2nd edition［S］.Wayne，PA，USA:NCCLS，2000.

［8］冯任丰.临床检验质量管理技术基础［M］.上海:上海科技文献出版社，2004.

［9］叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.3版.南京:东南大学出版社，2006.

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.10.051

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1673－4130（2015）10－1345－02

2015－01－13）