儿科临床分离肠球菌的耐药性监测及大环内酯类耐药机制研究

杨丰

(新蔡县人民医院 检验科 河南 新蔡 463500)

肠球菌为条件致病菌，可引起泌尿系感染、心内膜炎、腹腔感染、伤口感染等严重感染［1］。随着抗菌药物及免疫抑制剂应用的日益广泛，肠球菌感染率、耐药性不断增强，已成为医院感染的主要致病菌［2］。为监测儿科临床分离肠球菌的耐药性，并初步探讨肠球菌对大环内酯类耐药机制，现收集新蔡县人民医院儿科2011 年12 月至2012 年12 月收治的120 例肠球菌感染患儿的临床资料，结合文献报道如下。

1 资料与方法

1．1 一般资料 收集2011 年12 月至2012 年12 月儿科收治的120 例肠球菌感染患儿的临床资料，从120 例送检标本中分离出粪、屎肠球菌，经VITEK 全自动生物分析系统、ATB 自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定后确诊为肠球菌。送检标本包括尿液(51 例，42.5%)、粪便(32 例，26.7%)、血液(20 例，16.7%)、脓液(11 例，9.2%)、痰(6 例，5.0%)。

1．2 检验方法 抗菌药敏感性试验采用Kirby －Baner(KB)法［3］。对120 株肠球菌进行氨苄青霉素、红霉素、环丙沙星药物敏感试验。MH 培养基及药敏纸片购自博文生物医药公司，质控菌株ATCC2012929 由北京天坛药品生物制品鉴定所提供。根据KB 法药敏试验结果，将对红霉素有耐药性的菌株定义为观察组，非耐药性菌株为对照组，对两组菌株采用PCR 方法检测ermB 基因，引物为5’－ GAAAAGGTACTCAACAAAATA －3’。PCR 产物大小为639 bp。50 μg 反应体系中，DNA 模板液5 μl，KCl 浓度50 mmol/L、(NH4)2SO440 mmol/L、Tris － HCl 50 mmol/L、MgCl222.5 mmol/L。94 ℃预变性5 min 后，94 ℃变性30 s，50 ℃退火30 s，72 ℃延伸1.5 min，35 个循环后72 ℃再延伸3 min。扩增产物琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色成像。

1．3 统计学方法 采用SPSS 17.0 统计学软件进行数据处理分析，定性资料的组间比较采用χ2检验，P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 耐药性统计 患儿肠球菌对氨苄青霉素、红霉素、环丙沙星的耐药性分别为21.7%(26/120)、65.8%(79/120)、33.3%(40/120)，经两两比较差异均具有统计学意义(P ＜0.05)。

2．2 ermB 基因检测结果 对红霉素耐药的79 株肠球菌(观察组)中ermB 基因阳性株57 株，阳性率72.2%，非红霉素耐药菌41 株(对照组)中ermB 基因阳性1 株，阳性率2.4%，组间比较差异具有统计学意义(P ＜0.05)。

3 讨论

调查显示，由肠球菌引起的院内感染已位居第2 位，占所有院内感染病因的12%［4］。由于肠球菌本身具备固有耐药和获得性耐药特征，使其对多种抗菌药物具有耐药性，给临床治疗肠菌感染带来了一定的困难，因此，长期进行肠球菌耐药性监测，分析耐药变化特点十分必要。

本次统计发现，肠球菌对红霉素的耐药性最高，远高于氨苄青霉素、环丙沙星，与国内相关报道接近。查阅相关文献示，不同地区肠球菌的耐药性也有差异［5］。经过PCR 检测ermB基因示，对红霉素耐药的79 例菌株中有57 株ermB 基因阳性，而非耐药的41 株菌株中有1 株ermB 基因阳性，组间比较差异具有统计学意义(P ＜0.05)。ermB 基因是球菌耐药性的常见耐药基因，其编码的23 Sr RNA 甲基化酶致靶位改变从而发挥出耐药性［6］。由结果分析，耐药性与非耐药性肠球菌的ermB基因阳性率差异具有统计学意义，肠球菌对大环内酯类耐药性可能与ermB 有关。

综上所述，儿科病房患者肠球菌对红霉素的耐药性明显高于氨苄青霉素及环丙沙星，耐药菌株中ermB 基因的阳性率较高，可能是导致肠球菌对红霉素耐药的机制之一。

［1］汪玲．儿科临床分离肠球菌的耐药性监测及大环内酯类耐药机制研究［J］．中华检验医学杂志，2008，12(9):984 －988．

［2］吴庆．肠球菌临床感染特点及耐药机制研究［J］． 河南医学研究，2010，14(17):133 －137．

［3］刘祥琴．2011 年四川省人民医院分离致病菌的分布特点和耐药分析［J］．实用医院临床杂志，2012，15(6):3345 －3346．

［4］乔俊英．2008 年我院儿科病房病原菌检测及耐药性分析［J］． 中国妇幼保健，2011，12(22):545 －548．

［5］余素飞．肺炎链球菌对大环内酯类的耐药机制研究［J］．中华医院感染学杂志，2012，19(6):1222 －1223．

［6］姚杰．临床分离肠球菌的耐药性分析及相关耐药机制的研究［J］．安徽医科大学，2011，14(5):112 －113．