药对陈皮—干姜与其单味药挥发性成分的比较分析①

李淑贤，牟璐璐，吴洪斌，陆洪军

(1.佳木斯大学药学院，黑龙江 佳木斯 154007；2.佳木斯大学第一附属医院，黑龙江 佳木斯 154003)



药对陈皮—干姜与其单味药挥发性成分的比较分析①

李淑贤1，牟璐璐1，吴洪斌1，陆洪军2

(1.佳木斯大学药学院，黑龙江 佳木斯 154007；2.佳木斯大学第一附属医院，黑龙江 佳木斯 154003)

目的：比较分析药对陈皮-干姜与其单味药的挥发性成分。方法：采用水蒸气蒸馏法分别提取陈皮，干姜药材及药对挥发性成分，应用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对各样品中的挥发性成分进行比较分析，并采用峰面积归一化法计算百分含量。结果：从陈皮挥发性成分中检出的4-异丙基甲苯、D-柠檬烯、壬醛、大根香叶烯等成分和干姜挥发性成分中检出的甲基庚烯酮、α-法尼烯、5-甲基-2-(1-甲基乙烯基)-4-己烯-1-醇乙醇酯、α-长叶蒎烯等成分在药对挥发油中均未检出；而药对陈皮-干姜中新增成分冰片、2-甲基丙酸-3，7-二甲基-2，6-辛二醇酯、β-桉叶醇、肉桂苯氨基甲酸酯等。结论：药对陈皮-干姜配伍后挥发性化学成分与单味药相比有明显差异。

药对；陈皮；干姜；挥发性成分；气相色谱-质谱联用

药对又称对药，是中药配伍的基本单元，是中药组方配伍的核心，是连接单味药和方剂药的桥梁，加强药对的配伍规律研究是解决中药复方配伍理论这一核心问题的基础和重要切入点[1，2]。药对与其单味药挥发性成分的比较研究，是药对研究中的一项重要内容[3]。陈皮为芸香科植物橘及其栽培变种的干燥成熟果皮，其性温，味苦辛，归肺，脾经[4]。陈皮的有效成分主要为黄酮类化合物，具有较强的抗氧化活性[5]。干姜为姜科植物姜的干燥根茎，性温、辛，多用于温中散寒、温肺化饮。其挥发油中含有姜烯、水芹烯等多种成分[6，7]。干姜具有抗血小板聚集、降血脂、抗动脉粥样硬化等作用[8，9]。药对陈皮-干姜的单味药挥发性成分的研究较广泛，但药对的挥发性成分的研究未见报道。本研究采用GC-MS技术对药对及单味药的挥发性成分进行分离检测，同时对比其挥发性成分的变化，为中药配伍理论提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

7890A-5975型气相色谱-质谱联用仪(美国安捷伦科技有限公司)；标准玻璃挥发油提取器(上海满贤经贸有限公司)；RE52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)。十万分之一电子天平(德国赛多利斯公司)；中草药粉碎机(天津泰斯特仪器有限公司)；陈皮和干姜药材(购自佳木斯市金天大药房)，经佳木斯大学药学院杜娟副教授鉴定，分别为芸香科植物橘CitrusreticulataBlanco及其栽培变种的干燥成熟果皮及姜科多年生草本植物姜ZingiberofficinaleRosc. 的干燥根茎。正己烷(天津市恒兴化学试剂制造有限公司)等其他所用试剂均为分析纯；蒸馏水为实验室自制。

1.2 挥发油提取与供试液制备

陈皮和干姜分别粉碎，过二号筛成粗粉。取单味药粉末各25g混合，作为药对提取。分别取单味药粉末50g，用作单味药提取。按《中国药典》(2010版)一部附录“挥发油提取法”甲法进行，用正己烷洗涤挥发油提取器，并加入挥发油中，经无水硫酸钠干燥，减压浓缩除去溶剂，将所得样品进行避光冷藏。GC-MS测定前，药对挥发油、单味药挥发油分别用正己烷稀释成10倍体积。

1.3GC-MS测定

色谱条件：HP-5MS色谱柱(30m×0.25mm×0.25μm)，接口温度280℃，进样口温度280℃；载气为氦气(99.999%)，分流比为50:1，进样量1uL。质谱条件：电子轰击离子源(EI)，离子源温度240℃，接口温度280℃；电子能量为70Ev，四级杆温度为150℃，质量扫描范围为30～450Amu。升温程序：以50℃柱温为起始温度，以4℃/min速率升至140℃，恒温15min，再以4℃/min速率升至260℃。

2 结果

将挥发油供试液进行GC-MS检测，得到的总离子流图，见图1-图3。质谱图经NIST08谱库进行检索，并参考质谱的裂解规律解析确定化合物，并采用峰面积归一化法测定各成分的相对百分含量。采用水蒸气蒸馏法提取的陈皮挥发油中共鉴定了28种成分，占全油的89.2%。其中，D-柠檬烯、壬醛、1-甲基-2,4-二(丙-1-烯-2-基)-1-乙烯基环己烷、大根香叶烯等成分含量较高，分别占44.7%、5.37%、4.35%和3.36%；干姜挥发油中共鉴定出45种成分，占全油的84.4%，其中乙酸橙花酯、3-(1,5-二甲基-4-己烯基)-6-亚甲基环己烯、姜黄素和3-蒈烯等成分含量较高，分别占22%、12.8%、6.43%和5.80%；药对中挥发油共鉴定出44种成分，占全油的87.27%，其中新增成分反式-2-(2-戊烯基)呋喃和β-柏木烯含量较高，分别占34.8%和18.1%。

图1 药对挥发性成分总离子流图

图2 陈皮挥发性成分总离子流图

图3 干姜挥发性成分总离子流图

3 讨论

本实验对于药对陈皮-干姜与其单味药挥发油成分进行比较分析，结果表明药对挥发油中，来自与干姜的化学成分数量略多于来自陈皮的数量，单味药材陈皮和干姜中部分挥发油成分在药对中未能检出，其原因可能与其在药对挥发油中所占比例过低或与其他成分反应有关。药对中新增成分可能是由于陈皮与干姜在合煎的过程中发生了氧化反应、还原反应、水解反应和增溶助溶等物理和化学变化产生的[10]。药对中一些挥发油含量明显低于单味药

的，一些挥发油的含量明显高于单味药的，陈皮、干姜药对配伍对挥发油的成分和含量都有一定的影响，药对中其种类与含量变化并不等于两种单味药的简单相加[11]。通过气质联用检测出挥发油在配伍中发生了一定的变化，该变化是否是药对配伍后增加疗效的物质基础仍需进一步探讨。GC-MS技术的应用，对于得到单味药与药对挥发油成分的变化提供了有效的手段，有利于进一步研究单味药配伍后成分变化的机制，进一步促进中药药理的研究。

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Comparative Analysis of Volatile Constituents in Herbal Pair Tangerine Peel-Rhizoma Zingiberis and Its Single Herb by GC-MS·

LIShu-xian1,MOULu-lu1,WUHong-bin1,LUHong-jun2

(1.The Medical School of Jiamusi University,Jiamusi 154007,China;2.The First Affiliated Hospital of Jiamusi University,Jiamusi 154003,China)

Objective: To analyze the volatile constituents in herbal pair Tangerine Peel-Rhizoma Zingiberis and its single herb. Methods: The essential oil of Tangerine Peel, Rhizoma Zingiberis and their herbal pair were extracted by steam distillation. The volatile constituents were comparative analyzed by gas chromatography-mass spectro- metry(GC-MS). Peak area normalization method was used to calculate. Results: The volatile components like 1-methyl-4-(1-methylethyl)-Benzene, D-Limonene, Nonanal,Germ-acrene from Tangerine Peel and Methylheptenone, α-farnesene,5-methyl-2-(1-methyl vinyl)-4-hexene-1-alcohol acetate, α-Longipinene from Rhizoma Zingiberis were not detected in herbal pair.The new volatile components in herbal pair included Borneol,2-methyl-3 propionate,7-dimethyl-2,6-diol esters, β-Eudesmol, Cinnamyl carbanilate and so on. Conclusions: There are big differences in the composition of volatile between herbal pair and the single herb.

herbal pair;tangerine peel; Rhizoma Zingiberis; volatile components; Gas chromatography - mass spectrometry(GC-MS)

佳木斯大学科学技术重点项目，编号：Sz2011-012。

李淑贤(1970～)女，黑龙江宝清人，博士，高级实验师，硕士研究生导师。

陆洪军(1970～)男，黑龙江桦南人，硕士，副主任医师。E-mail：langtt02@163.com。

R

A

1008-0104(2015)03-0033-02

2015-01-21)