基质金属蛋白酶2、环氧化酶2表达在下咽癌转移中的作用

王佳蓉，吴瑞珊，曾冰微

（1.福建医科大学第二临床医学院耳鼻咽喉科，福建 泉州362000；2.福建医科大学第二临床医学院病理科，福建 泉州362000）

下咽癌是头颈部常见的恶性肿瘤，且多表现为鳞状细胞癌，病因尚未完全阐明。该疾病往往分化低，早期难于发现，且早期即可转移，恶性程度较高，临床治疗困难，患者预后较差。部分研究显示，肿瘤细胞的侵袭与转移，起于对细胞外基质的降解，基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinases 2，MMP-2）是参与该过程的主要酶［1-2］。环氧化酶2（cyclooxygenase 2，Cox-2）则在结直肠癌、宫颈癌等恶性肿瘤中具有高表达［3-4］。如果能证实两类酶也与下咽癌的转移有一定的联系，必然有助于疾病的治疗。本研究对伴淋巴结转移下咽癌、未伴淋巴结转移下咽癌和声带息肉3组患者的MMP-2和Cox-2表达进行了对比分析，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012年9月—2013年9月我院收治的下咽癌有淋巴结转移的患者21例为观察组，男性13例，女性8例，年龄44～77岁，平均（55.7±3.2）岁，已排除术前有放疗史、长期服用糖皮质激素等可能干扰研究的患者标本，国际抗癌联盟（union for international cancer control，UICC）分期Ⅰ期3例，Ⅱ期3例，Ⅲ期6例，Ⅳ期9例。选择同期声带息肉患者20例为对照A组，男性12例，女性8例，年龄44～69岁，平均（54.6±2.5）岁。选择同期下咽癌但无淋巴结转移的患者20例为对照B组，男性13例，女性7例，年龄45～71岁，平均（55.1±1.9）岁。3组性别、年龄差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 检测方法 主要试剂包括兔抗人抗体Cox-2、鼠抗人抗体MMP-2等，试剂盒购自北京华夏远洋科技有限公司。检测方法一般流程如下：首先，对载玻片进行肥皂水浸泡、酸性液浸泡等常规处理，备用；随后，取出标本，置于切片机上，设定厚度为3 μm进行连续切片，挑选合适样本各2片，预处理，备用；接下来行EnVision免疫组织化学检测，经过脱蜡、水化、抗原修复、酶活性阻断、一抗及二抗孵育、显色及染色、脱水等处理过程后，以中心树胶封片；最后由2名经验丰富的病理科医师分别独立阅片、评分。

1.3 评分标准 对每个组织标本随机选择5个高倍视野，做半定量积分。针对于细胞组织着色面积，以面积超过2／3为3分，以面积在1／3～2／3之间为2分，以面积不超过1／3为1分，以无着色为0分；针对于着色深浅，以棕褐色为3分，以棕黄色为2分，以黄色为1分，以无色为0分。阳性标准为上述2项之和达3分，强阳性标准为2项之和达4分或以上，总阳性率为2项之和。

1.4 统计学方法 应用SPSS 19.0统计软件进行数据处理。计量资料以±s表示，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用q检验；计数资料以百分率表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 3组标本MMP-2表达比较 观察组MMP-2表达阳性率与对照A组和对照B组差异无统计学意义（P＞0.05），但强阳性和总阳性率明显高于对照A组（P＜0.05），观察组与对照B组及对照A、B组之间差异均无统计学意义（P＞0.05）。观察组染色均分高于对照A、B组，对照A、B组之间差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 3组标本MMP-2表达比较

2.2 3组标本Cox-2表达比较 观察组Cox-2表达阳性率与对照A组和对照B组差异无统计学意义（P＞0.05），但强阳性和总阳性率明显高于对照A组（P＜0.05），观察组与对照B组及对照A、B组之间差异均无统计学意义（P＞0.05）。观察组染色均分高于对照A、B组，对照A、B组之间差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 3组标本Cox-2表达比较

3 讨 论

下咽癌发病率高，难以控制，侵袭和转移均较为迅速，如何加强早期诊断成为开展治疗和提升患者预后的关键，相关科研人员对此展开了深入的研究与探讨，但取得的效果并不显著［5］。

研究显示，MMP-2和Cox-2在部分恶性肿瘤中存在着高表达现象［6-8］。提示在下咽癌转移患者体内可能存在着同样的高表达现象。本研究结果显示，下咽癌伴淋巴结转移患者MMP-2和Cox-2表达阳性率分别为66.7%和61.9%，明显高于声带息肉患者的15.0%和10.0%。支持上述观点。

Cox-2的致肿瘤机制可能为促进细胞增殖，提升促血管因子的表达，进而促进肿瘤新生血管形成，抑制肿瘤细胞凋亡，增加肿瘤细胞的侵袭性，使多环芳香烃类化合物转换为亲电氧化物、抑制免疫反应等［9］。本研究进一步提示Cox-2的过度表达在下咽癌的转移中起着重要的作用。MMP-2在下咽癌转移中的主要作用是能够提升肿瘤细胞降解细胞外基质及基膜的能力，同时还能抑制反转录富含半胱氨酸蛋白基因的表达，该基因对肿瘤的抑制作用，已得到了临床研究的直接证实［10］。

本研究最主要的成果在于，能够直接证实可以通过检测MMP-2及Cox-2来预测下咽癌的进程。对于癌症患者而言，其疾病出现之后，MMP-2及Cox-2含量将显著上升，从而发挥各自病理学的作用，推动癌症进程的发展；待出现淋巴转移之后，其含量又将呈现一个显著性增长，这可能是因为淋巴转移之后两蛋白的作用靶点增加，刺激了其分泌量的增加。

总之，本研究结果证实下咽癌淋巴结转移患者体内存在着MMP-2及Cox-2高表达的现象，如果能在早期对两蛋白进行检测，就能够有效指导癌症的治疗。

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