病理技术HE染色用于病理诊断中的价值分析

病理技术HE染色用于病理诊断中的价值分析

马峰，刘仲祥*

(吉林大学中日联谊医院,吉林 长春130033)

病理诊断属于现代医学中最具权威性的一种诊断方法，其病理诊断准确性除了受病理检查医师技术水平的影响，还受组织病理片的处理质量及染色效果的影响。并且在现代病理检查工作中，因标本固定时间不规范、组织脱水不完全或者是在某些因素影响下导致试剂浓度改变等因素的影响，对制片质量造成了巨大影响，因此加大了临床诊断难度[1]。为了研究病理技术HE染色在病理诊断中的应用价值，选取我院400例石蜡切片及组织进行染色，并对100例染色标本的细胞学制片进行详细观察，现将其相关报告总结如下。

1资料与方法

1.1临床资料

选取2014年1月-2014年12月我院各科室送检的400例石蜡切片作为研究对象，主要为胃肠、胆、脂肪以及骨石蜡切片，严格按照相关规范进行操作HE染色，并观察其中100例染色标本的细胞学制片。其中在本次观察的100例细胞学制片中，骨组织10例，脂肪组织17例，胃镜活检36例，子宫内膜30例，胃肠、子宫、肝胆7例。

1.2方法

1.2.1HE染色方法本次所有器官或大块组织标本均来源于手术室；细胞学及穿刺小标本来源于内窥镜和超声、CT引导下穿刺。为了保证组织病理的制片质量，在取材过程中要求快速、准确。在选材、片中需按照不同组织而选择适当的固定、脱水时间以及相应的制片染色方法。如：在小标本中，其固定时间及脱水时间需适当缩短；脂肪组织固定时间及脱水时间应适当延长；硬组织需要选用新切片刀进行制片；破碎组织、软组织以及活检组织需选择已经使用过的旧切片刀进行制片。HE染色操作方法如下：①经3次二甲苯去蜡5-10 min；②脱蜡水洗3 min，无水乙醇、95%乙醇、80%乙醇以及70乙醇各1 min；③使用苏木紫液染色3-5 min，染色时间可根据具体情况适当增减；④使用浓度为1%的酸性乙醇或浓度为1%的盐酸分化进行水洗。⑤流水浸洗时间需大于15 min，直至细胞核变为蓝色即可。若核染色深度不理想，可进行再分化，或者重染；⑥使用伊红液染色0.5-1 min，随后进行85%乙醇、95%乙醇、无水乙醇各2次，每次1-2 min；⑦二甲苯透明3次，每次3-5 min；⑧使用中性树胶进行盖片封片，并贴上相应的标签。

1.2．2病理技术改进方法在病理检查中将大小不同的标本分开进行固定、脱水、染色等处理，根据不同组织特性完成制片，使细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质以及钙盐颗粒染为深蓝色，黏液染为灰蓝色。细胞间质被伊红染为粉红色、桃红色等深浅不同的红色，胞浆内嗜酸性颗粒细胞被染为鲜红色。一般胶原纤维表现为淡粉红色，弹力纤维表现为亮粉红色；红血球表现为橘红色，蛋白性液体表现为粉红色。由于组织着色程度和组织、细胞种类有密切关系，并且也能够根据生活周期、病理变化而出现改善。如大多数细胞在新生时期，其胞浆对伊红着色较淡，但当其处于衰老期，或出现退行性变化时，伊红着色可逐渐加深。

2结果

通过对不同组织进行科学的制片及HE染色，不同组织制片、HE染色一般均可达到相关标准，本次观察的100例染色标本的细胞学制片中，病理技术改进前后其染色结果均有明显改善，见表1。

表1　病理技术改进前后染色结果变化情况[n(%)]

3讨论

在病理检查过程中，组织染色质量直接影响了临床诊断结果，并且还可间接影响到临床治疗方案的制定，影响临床治疗安全性。在HE染色操作过程中，染色质量主要是由细胞核的染色质量决定的，这是一项化学、物理共同作用下进行的工作。主要是因组织内部存在大量的微小细孔，在染料充分渗透后，和组织结合牢固，染料被组织吸收后开始逐渐出现溶解、扩散[2]。另外，组织细胞内含有不同比例的酸性或者碱性物质，其中含有酸性物质的组织，能够和染液中的阳离子结合，并生成固定分子；而含有碱性物质的组织，能够和染液中的阴离子结合，共同发挥其牢固性作用[3]。

但细胞和组织的HE染色质量易受取材操作、固定时间、操作时间、切片质量等因素的影响，因此在组织染色中需根据不同的标本类型，选择相应的取材范围、取材方式及取材工具，以免对组织形成挤压，改变组织结构[4]。在组织使用钳取难度较大时，可改用针吸方式取材，针吸取材方式一般应用在实质性脏器直径超过2 cm患者中。例如，对于肺癌表面覆盖有较厚一层凝固性坏死或脂性分泌物时，为了保证标本阳性检出率，需选择针吸的方式进行，对其进行深部取样；对于体液量较多患者需对其离心后取其沉渣。骨组织需要进行脱钙操作，否则制片难度较大，且易对其细胞结构造成破坏，其HE染色质量不佳。并且在制片中需要适当延长脂肪组织脱水固定时间，严格控制好骨组织脱钙时间，以免影响HE染色效果，影响病理诊断结果[5]。

所有需要送检的组织均需先进行固定(除特殊要求组织外)，其固定的目的主要就是为了有效保证组织和活体成分、形态相似，并且可避免在制片过程中组织发生自溶。因为组织原有构造被破坏或消失后，可严重影响制片质量，影响临床诊断结果[6]。并且组织在固定后需在规定时间内送检，避免因固定时间过长而造成组织变硬、变脆，影响切片效果，进而影响诊断结果。除此之外，HE染色操作中需注意所选用试剂浓度的变化情况，恰当控制温度、湿度，保证所有操作的科学性，为临床诊断提供重要资料[7]。

综上所述，病理检查作为临床诊断中权威性最高的诊断方法，而病理技术中HE染色技术在病理检查中具有重要作用，需不断提高HE染色技术，根据不同组织完成相应的固定操作、脱水操作以及切片操作等，以此来全面提高切片质量，提高病理诊断准确性，为临床诊断及治疗提供有价值的参考资料，保证临床治疗效果，值得临床加大对其进行进一步研究。

参考文献：

[1]王巧.HE 染色方法在临床病理诊断中的应用[J].临床合理用药，2014,7(11)：118.

[2]张敏.HE染色在临床病理诊断中的应用[J].齐齐哈尔医学院学报，2011,32(4)：552.

[3]段英飞,赵凌云,翁改志.临床病理技术室常规出片前质量控制及管理[J].临床与实验病理学杂志，2014,30(1)：93.

[4]张丽荣,杨华,崔亚南,等.恶性淋巴肿瘤粗针穿刺活检的病理技术应用[J].临床与实验病理学杂志，2012,28(8)：942.

[5]冉志远,宁浩勇,康筱玲,等.全自动染色胶片封片机在常规病理染色中的应用体会[J].诊断病理学杂志，2014,21(2)：121.

[6]武巧伶,魏春娥,苗金红.浅谈HE染色方法在临床病理诊断中的作用[J].中外医学研究，2013,11(29)：147.

[7]田伟,田延龙,殷喜梅,等.支气管冲洗液细胞块免疫组化染色在肺癌病理诊断中的价值[J].现代肿瘤医学，2014,22(10)：2354.

(收稿日期：2015-03-19)

文章编号：1007-4287(2015)12-2103-02

*通讯作者