痰咳舒糖浆质量标准研究

何雄生 罗瑜 张远华 肖俊强

痰咳舒糖浆质量标准研究

何雄生 罗瑜 张远华 肖俊强

目的制订痰咳舒糖浆的质量标准。方法采用薄层色谱法鉴别川贝母；采用紫外可见分光光度法(UV-VIS)测定贝母素乙的含量。结果薄层斑点清晰, 阴性样品无干扰, 贝母素乙在0.05～0.35 mg呈良好的线性关系, 平均回收率为93.41%。RSD=2.23%。结论该方法准确、重复性好,可有效控制本制剂的质量。

痰咳舒糖浆；川贝母；贝母素乙；薄层色谱法；紫外可见分光光度法；质量标准

痰咳舒糖浆是本院名老中医邹志为的经验处方。处方中含有桔梗、枇杷叶、川贝母、姜半夏、杏仁水、甘草等, 主治风热咳嗽、痰多、咽喉肿痛、感冒及支气管炎见上述证者。在临床应用已有20年的历史, 疗效显著并且销量较大。为有效控制该制剂的质量, 保证临床疗效的稳定性, 作者对方中的川贝母进行薄层色谱(TLC)鉴别, 采用UV-VIS对制剂中的贝母素乙进行含量测定。

1 仪器与试剂

紫外可见分光光度计UV752, 贝母素乙对照品(供含量测定用, 购自中国药品生物制品检定所), 痰咳舒糖浆(100 ml/瓶,批号130510、130610、130710、130810、130910, 韶关市中医院提供), 阴性样品(韶关市中医院制备), 所用试剂均为分析纯, 水为去离子水。

2 川贝母的薄层定性鉴别

2.1 供试品溶液的制备 取本品100 ml, 加浓氨试液适量,使pH至11以上, 加氯仿提取2次,40 ml/次, 合并氯仿液,水浴蒸干, 残渣加乙醇0.5 ml使溶解, 即得。

2.2 阴性样品溶液的制备 按痰咳舒糖浆处方, 去掉川贝母, 按原工艺制备出缺川贝母的制剂, 同法制成阴性对照溶液。

2.3 对照药材溶液的制备 取川贝母对照药材2.5 g, 加浓氨试液使湿润, 密封, 放置1 h, 加氯仿30 ml回流40 min, 滤过,滤液蒸干, 残渣加乙醇0.5 ml使溶解, 即得。

2.4 贝母素乙对照品溶液的制备 取贝母素乙适量加乙醇制成1 mg/ml的对照品溶液。

2.5 TLC鉴别 按照TLC(《中国药典》[1]2010年版一部附录ⅥB)试验, 分别吸取供试液、阴性对照溶液30 μl、对照药材溶液15 μl、对照品溶液4 μl点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-甲醇-氨水-水(18∶2∶1∶0.1)为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 喷以稀碘化铋钾试液与亚硝酸钠乙醇试液,供试品在与对照品和对照药材相应的位置上, 显相同颜色的斑点[2]。结果见图1。

图1 川贝母薄层色谱图(Fritillariae Cirrhosae Bulbus were identified by TLC.)

3 贝母素乙的含量测定

3.1 标准溶液的制备 准确称取贝母素乙对照品10.00 mg,以三氯甲烷为溶剂定容至100 ml, 浓度为0.10 mg/ml, 摇匀,备用。

3.2 线性关系的考察 精密吸取对照品溶液(0.10 mg/ml) 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 ml, 分别置25 ml量瓶中,各精密加入0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液(取0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液100 ml, 用0.2 mol/L NaOH溶液约50 ml调节pH值为5.0, 即得)5 ml, 再精密加0.03%溴百里香酚蓝试液(取溴百里香酚蓝0.03 g, 用1 mol/L NaOH溶液0.5 ml使溶解, 加水稀释至100 ml, 即得)2 ml, 加三氯甲烷至刻度,剧烈振摇, 转移至分液漏斗中, 放置45 min, 取三氯甲烷液,用干燥滤纸滤过, 取续滤液, 以相应试剂为空白, 照紫外可见分光光度法, 在412 nm的波长处, 用1 cm比色皿测定吸光度[3-7]。以吸光度为纵坐标, 贝母素乙质量为横坐标, 绘制标准曲线, 得回归方程：Y=2.091X+0.1870(r2=0.9964), 贝母素乙在0.05～0.35 mg内具有良好的线性关系。

3.3 精密度试验 精密吸取浓度为0.1 mg/ml的贝母素乙对照品溶液0.20、0.30、0.50 ml, 依法处理, 重复测定6次, 以吸光度计算RSD值。实验结果表明, 本仪器的精密度良好,各浓度对照品的RSD值均＜3.00%。

3.4 重复性试验 取同一批号的样品(批号130710)6份,按上述设定的方法进行平行试验, 并依法进行测定贝母乙素的含量, RSD值为0.65%[8]。结果表明, 本方法的重复性良好。

3.5 稳定性试验 对同一供试品溶液, 在0、10、20、30、40、50、60 min进行测定, 记录贝母乙素的含量。RSD=2.65%, 表明供试品溶液在1 h内保持稳定。

3.6 加样回收实验 分别精密称取已知含量的样品(批号130910)约100 ml即0.00763 g, 共6份, 分别准确加入贝母乙素对照品溶液7.50 ml, 摇匀, 依法处理, 测定吸光值, 以相应试剂为空白, 按对照品的回归方程进行计算, 回收率平均值为93.41%, RSD为2.23%[9-11]。见表1。

3.7 样品测定 精密量取糖浆100 ml(n=6), 置具塞锥形瓶中, 加浓氨试液50 ml, 振摇, 静置1 h, 加三氯甲烷-甲醇(4∶1)混合溶液50 ml, 置分液漏斗中, 振摇, 静置2 h, 取三氯甲烷层, 用干燥滤纸滤过, 滤液蒸干, 残渣加三氯甲烷使溶解[12]。精密量取2 ml样品液, 置50 ml量瓶中, 照标准曲线项下的方法, 自“各精密加入0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液(取0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液100 ml, 用0.2 mol/L NaOH溶液约50 ml调节pH值为5.0, 即得)5 ml”起, 依法测定吸光度,从标准曲线上读出样品溶液中贝母素乙的重量(mg), 即得[13]。见表2。每100 ml痰咳舒糖浆含贝母乙素0.014 mg。

表1 加样回收率结果(n)

表2 痰咳舒糖浆样品中贝母乙素的含量测定结果(n)

4 讨论

4.1 通过查找资料与反复试验, 发现有关川贝母的TLC方法资料不多, 有些方法用于复方中药制剂时, 各成分的分离效果不佳, 或有干扰, 或拖尾严重[14,15]。而本文所建立的川贝母的TLC方法分离效果好, 阴性对照无干扰, 不失为一个很好的方法。

4.2 制剂处方中川贝母属于贵重药材, 故对其生物碱代表成分贝母素乙进行含量测定[16]。采用紫外可见分光光度法,由本研究结果可见, 该测定方法快速、重复性和稳定性好,精密度、回收率均较高, 与TLC结合能很好地控制痰咳舒糖浆的内在质量。

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Research of quality standard for Tankeshu syrup

HE Xiong-sheng, LUO Yu, ZHANG Yuan-hua, et al. Shaoguan City Hospital of Traditional Chinese Medicine, Shaoguan512026, China

ObjectiveTo establish the quality standard for Tankeshu syrup.MethodsThin-layer chromatography (UV-VIS) was applied for identification of dulbus fritillariae cirrhosae, and ultraviolet visible spectrophotometry for content of peiminine.ResultsThin-layer had clear spots, without interference by negative samples. Peiminine showed fine linear relation in range of 0.05～0.35 mg, with the average recovery rate as93.41% and RSD=2.23%.ConclusionThis method has accuracy and good repeatability, and it can control the quality of Tankeshu syrup.

Tankeshu syrup; Bulbus fritillariae cirrhosae; Peiminine; Thin-layer chromatography; Ultraviolet visible spectrophotometry; Quality standard

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.16.192

2015-02-09]

512026 韶关市中医院