急性脑梗死患者外周血清巨噬细胞移动抑制因子、基质金属蛋白酶-9和超敏C-反应蛋白水平与病情严重程度的关系

于治华，王君，樊建华，高红华，高连波

急性脑梗死患者外周血清巨噬细胞移动抑制因子、基质金属蛋白酶-9和超敏C-反应蛋白水平与病情严重程度的关系

于治华，王君，樊建华，高红华，高连波

[摘要]目的探讨急性脑梗死患者血清巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平与病情严重程度的相关性。方法急性脑梗死患者101例根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为轻型脑梗死组(A组，NIHSS评分<4分，n=38)、中型脑梗死组(B组，NIHSS评分4～15分，n=36)和重型脑梗死组(C组，NIHSS评分>15分，n=27)；同期住院44例有动脉粥样硬化危险因素非急性脑梗死患者为对照组(D组)。酶联免疫吸附法测定血清中MIF、MMP-9水平，免疫散射比浊法检测hs-CRP水平。结果各组间MIF、MMP-9及hs-CRP水平从高到低依次为C组、B组、A组、D组(P< 0.05)。MIF与MMP-9 (r=0.301, P<0.01)和hs-CRP(r=0.309, P<0.001)呈正相关。结论急性脑梗死患者血清MIF、MMP-9、hs-CRP水平升高，可能预测动脉粥样硬化斑块稳定性。

[关键词]急性脑梗死；动脉粥样硬化；巨噬细胞移动抑制因子；基质金属蛋白酶-9；超敏C-反应蛋白；美国国立卫生研究院卒中量表

[本文著录格式]于治华，王君，樊建华，等.急性脑梗死患者外周血清巨噬细胞移动抑制因子、基质金属蛋白酶-9和超敏C-反应蛋白水平与病情严重程度的关系[J].中国康复理论与实践, 2015, 21(11): 1256-1259.

CITED AS: Yu ZH, Wang J, Fan JH, et al. Relationship of serum macrophage migration inhibitory factor, matrix metalloproteinase-9 and hypersensitive C-reactive protein with severity of acute cerebral infarction [J]. Zhongguo Kangfu Lilun Yu Shijian, 2015, 21(11): 1256-1259.

脑梗死的病理基础是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)，参与动脉粥样硬化的炎症因子仍是目前研究的热点。巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor, MIF)是一种多效能的细胞因子，主要集炎症因子、酶和激素作用于一身，参与动脉粥样硬化的病理生理反应[1-2]，在脑梗死的发生发展中起重要作用。基质金属蛋白酶-9 (matrix metalloproteinase-9, MMP-9)属于明胶酶B，能特异性地与细胞外基质结合，水解动脉硬化斑块的纤维帽结构，破坏斑块的稳定性[3]。研究表明，MIF、MMP-9及超敏C-反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein, hs-CRP)与急性脑梗死(acute cerebral infarction)的病情严重程度密切相关[4-5]。本研究通过比较不同病情程度的急性脑梗死患者外周血清MIF、MMP-9及hs-CRP水平，探讨三者在判断病情程度中的作用。

1　资料与方法

1.1一般资料

选择2014年1～10月于中国医科大学附属第四医院神经内科收治的急性脑梗死患者101例为病例组。均符合第四届全国脑血管病学术会议制定的诊断标准，全部经头颅MRI或CT证实的急性脑梗死。发病72h内。

入院时，由经统一培训的两名住院医师采用美国国立卫生研究院脑卒中量表(National Institute of Health Stroke Scale, NIHSS)评定神经功能情况。出院时，由相同住院医师再次评定。

根据患者NIHSS评分分成3组。轻度脑梗死组(A 组)：NIHSS评分<4分；38例，其中男性20例，女性18例；年龄(61.3±9.87)岁。中度脑梗死组(B组)：NIHSS评分4～15分；36例，其中男性19例，女性17例；年龄(60.65±9.12)岁。重度脑梗死组(C组)：NIHSS评分>15分；27例，其中男性13例，女性14例；年龄(60.73±10.02)岁。

同期住院同年龄组患者，根据病史、查体及头颅MRI证实的无脑梗死，经颈动脉彩超检查提示均有颈动脉硬化斑块，设为对照组(D组)。对照组共44例，其中男性22例，女性22例；平均年龄(60.36±10.21)岁。

各组间年龄、性别无显著性差异(P>0.05)

排除标准：①出血性脑梗死；②重度糖尿病或冠心病，伴有感染、炎症反应性疾病、严重肝肾功能异常、多器官功能衰竭，接受甾体激素类药物、免疫抑制剂或其他抗炎药物治疗；③入院前口服他汀类、叶酸及维生素类药物；④血液系统疾病、房颤导致的脑梗死；⑤近6个月重大手术、外伤史，肿瘤和自身免疫性疾病。

所有患者均签署知情同意书。

1.2方法

受试者于入院后次日清晨(发病72 h内)空腹自肘静脉抽取静脉血约3 ml，置于含促凝剂的真空采血管内，轻轻摇匀，3000 r/min离心10 min。分离血清，置于2 ml EP管中；编号标记，保存于-80℃冰箱备用。

采用ELISA法检测MIF (试剂盒购于RAYBIO公司)、MMP-9 (试剂盒购于上海酶联生物科技有限公司)。操作按试剂盒说明进行。

hs-CRP、总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglyceride, TG)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein, HDL)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein, LDL)采用西门子Dimension EXL with LM全自动生化分析仪检测。

1.3统计学分析

采用SPSS16.0软件进行统计学分析。计量资料以(xˉ±s)表示，多组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)，两两比较采用LSD-t检验；病例组MIF、MMP-9和hs-CRP相关性分析间相关性采用Pearson相关分析。显著性水平α=0.05。

2　结果

各组间收缩压、舒张压和LDL存在显著性差异(P<0.05)。见表1。

各组间MIF、MMP-9和hs-CRP存在显著性差异(P<0.05)，差异主要存在于C组与D组间。见表2。

病例组MIF和MMP-9(r=0.301, P=0.004)、MIF和hs-CRP(r=0.309, P<0.001)的表达呈正相关，MMP-9和hs-CRP(r=0.088, P=0.292)无明显相关性。

表1　各组临床资料比较

表2　各组血清MIF、MMP-9及hs-CRP比较

3　讨论

动脉粥样硬化时，受累动脉从血管内膜开始，出现脂质和复合糖类积聚，纤维组织增生，形成动脉粥样硬化斑块；当斑块不稳定破裂，或覆盖其上的内皮脱落，内皮下组织和脂质核心暴露，诱发原位血栓形成，引起血流动力学障碍，发生急性脑梗死。其中动脉硬化纤维帽撕裂是引起急性脑梗死的关键环节。研究发现，MIF[4]、MMP-9[5]和hs-CRP[6]与斑块的不稳定性密切相关。

MIF是一种高度恒定及多效能的细胞因子[7]。Schober等研究证明，MIF参与动脉粥样硬化的整个发展过程[8-9]。MIF的主要作用是抑制巨噬细胞的自由移动，促进巨噬细胞在炎症局部浸润、聚集、增生、激活[10]，进而破坏斑块的稳定性，引起斑块出血破裂[11]。本研究显示，随着急性脑梗死病情加重，患者外周血清MIF水平逐渐升高。与此前的研究结果一致[4,12]。

炎症反应参与脑梗死的病理生理过程。急性期hs-CRP水平反映炎症反应程度[13]，已有学者发现其与脑梗死急性期斑块的炎症反应程度密切相关[14]。hs-CRP有可能成为颅内外血管事件的重要检测指标[15]。本研究显示，急性重症脑梗死患者外周血清hs-CRP水平升高，提示斑块不稳定。本研究还发现MIF水平与hs-CRP呈正相关，与此前的研究相同[6, 12]。

MMP-9的主要作用是降解细胞外基质[16-17]，导致平滑肌细胞向内膜下迁移，引起斑块不稳定，破裂出血[18]；同时MMP-9也破坏血脑屏障[19]，可导致炎症因子扩散到脑实质内，加重炎症反应，引起更大范围的脑损伤。

血管内MMP-9存在于巨噬细胞丰富的斑块肩部区域，与斑块的稳定性密切相关[20]。正常情况下MMP-9表达量较低[21]；急性脑梗死发生后，MMP-9表达量升高；抑制MMP-9表达可减轻神经损伤[22]。本研究显示，急性重症脑梗死患者MMP-9表达水平明显升高，与Lenti的研究一致[23]。但本研究未发现轻、中度脑梗死组较对照组有显著性差异，应扩大样本量，继续研究。

MIF和MMP-9均参与巨噬细胞的炎症反应[24]，破坏胶原纤维。本研究发现，血清MIF和MMP-9的表达正相关。有学者发现，在动脉硬化形成中，MIF诱导MMP-9产生增多[25]。但MIF和MMP-9相互作用机制尚不清楚，两者是否有协同促进作用，有待进一步研究。

由于本实验入选患者受限，样本量少，未测定患者发病72 h后表达水平的变化，结果还不能完全反映人群的特征。需进一步进行大样本和多中心观察。

综上所述，急性脑梗死患者外周血清MIF和MMP-9水平升高，与神经功能缺损程度相关。临床上联合检测MIF和MMP-9水平，可能预测急性脑梗死的病情程度；早期抑制两者表达，有望改善患者预后。

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·专题·

Relationship of Serum Macrophage Migration Inhibitory Factor, Matrix Metalloproteinase-9 and Hypersensitive C-ReactiveProteinwith Severityof AcuteCerebral Infarction

YU Zhi-hua, WANGJun, FANJian-hua, GAOHong-hua, GAOLian-bo
Department of Neurology, the Fourth Hospital Affiliated to China Medical University, Shenyang, Liaoning 110032, China

Abstract:Objective To investigate the relationship of serum levels of macrophage migration inhibitory factor (MIF), matrix metalloproteinase-9 (MMP-9), hypersensitive C-reactive protein (hs-CRP) with the severity of acute cerebral infarction (ACI). Methods101 patientswith ACI wereenvolved and divided into 3 groupsaccording to thescoresof National Instituteof Health Stroke Scale(NIHSS): mild group (group A, n=38, NIHSS score<4), moderate group (group B, n=36, NIHSS score 4-15) and severe group (group C, n=27, NIHSS score>15). Meanwhile, 44 non-ACI inpatientswith atherosclerosiswereincluded ascontrol group (group D). Their serum MIF and MMP-9 weredetected with ELISA, and hs-CRPwith immunoturbidimety. ResultsThelevelsof serum MIF, MMP-9 and hs-CRPranged from more to lessasgroups C, B, A and D (P<0.05). Therewaspositivecorrelation of MIF with MMP-9 (r=0.301, P<0.01) and hs-CRP(r=0.309, P< 0.001). Conclusion Serum MIF, MMP-9 and hs-CRPlevelsincreased with theseverity in ACI patients, which may beprediction of atheroscleroticplaqueinstability.

Key words:acutecerebral infarction; atherosclerosis; macrophagemigration inhibitory factor; matrix metalloproteinase-9; hypersensitiveC-reactiveprotein; National Instituteof Health StrokeScale

(收稿日期：2015-06-29修回日期：2015-09-01)

作者简介：作者单位：中国医科大学附属第四医院神经内科，辽宁沈阳市110032。于治华(1985-)，女，汉族，山东荣城市人，硕士，医师，主要研究方向：缺血性脑血管病。通讯作者：高连波(1965-)，男，汉族，辽宁沈阳市人，硕士，教授，主要研究方向：缺血性卒中的基础与临床研究。E-mail: gaolbdoc@163.com。

基金项目：国家自然科学基金面上项目(No.81471198)。

DOI:10.3969/j.issn.1006-9771.2015.11.004

[中图分类号]R743.32

[文献标识码]A

[文章编号]1006-9771(2015)11-1256-04