慢性阻塞性肺疾病患者T淋巴细胞及细胞因子的表达与分析

余志辉 林涛

慢性阻塞性肺疾病患者T淋巴细胞及细胞因子的表达与分析

余志辉 林涛

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者T淋巴细胞及细胞因子水平的变化, 进一步确认其临床意义。方法170例COPD患者作为研究对象, 按照病情分为急性期组(97例)和缓解期组(73例)。同时选取同期在本院进行健康体检的100例健康人群作为健康对照组。检测并对比三组T淋巴细胞亚群和白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等细胞因子水平。结果COPD急性期组患者的CD3细胞、辅助性T细胞(Th细胞)和自然杀伤细胞(NK细胞)水平均低于缓解期组, 而健康对照组均显著高于急性期组和缓解期组患者, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。同时急性期组患者的IL-6、IL-8和TNF-α的水平均高于缓解期组, 而健康对照组均显著低于急性期组和缓解期组患者, 三组差异均具有统计学意义(P＜0.05)。结论细胞免疫功能和细胞因子可能在COPD的发病及病情进展中发挥重要作用。

慢性阻塞性肺疾病；T淋巴细胞；细胞因子

慢性阻塞性肺疾病(COPD)作为一种常见呼吸系统疾病,以持续存在的气流受限为主要特征, 并且伴有气道和肺对有害颗粒或气体所致慢性炎性反应的增加。该病一旦患病无法治愈, 只能够延缓病情的进展, 严重影响其生活质量, 给患者及家庭带来巨大的经济负担。目前, 对于该病的发病机制尚不完全清楚。相关研究显示, T淋巴细胞亚群及相关细胞因子可能在COPD炎症反应中发挥重要作用[1]。为进一步探讨它们在COPD发病中的作用, 本研究对COPD患者T淋巴细胞亚群和IL-6、IL-8、TNF-α等细胞因子水平进行了测定,旨在进一步确认其在COPD病程中的临床意义。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2011年1月～2013年1月住院治疗的170例COPD患者作为研究对象。患者年龄50～74岁,平均年龄(62.8±7.8)岁, 其中男94例, 女76例, 病程2～22年, 平均病程(10.5±3.9)年。所有患者均符合《慢性阻塞性肺疾病诊治指南》制定的COPD诊断标准。排除其他肺部疾病、肿瘤、糖尿病等慢性消耗性疾病患者, 并且所有患者近1个月内均未使用过免疫抑制剂、激素等影响免疫状态的药物。按照患者病情的不同分为急性期组(97例)和缓解期组(73例)。同时选取同期在本院进行健康体检的健康人群100例作为健康对照组。COPD与健康人群在年龄、性别等一般资料方面比较差异无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 测定方法 抽取研究对象空腹静脉血2 ml, 抗凝。取抗凝血100 μl, 用simule Test试剂直接标记全血细胞,4℃避光培养20 min后加入2 ml红细胞裂解液, 混匀后室温培养10 min,然后采用PBS液洗涤2遍, 最后加入200 ml PBS液混匀, 立刻检测[2]。血清中IL-6、IL-8、TNF-α的检测采用酶联免疫吸附实验(ELISA), 标本的处理、检测步骤和含量计算均按试剂盒操作说明进行。

1.3 统计学方法 数据的统计分析应用SPSS16.0统计学软件处理。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t检验,多组间比较采用方差分析；计数资料采用χ2检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者T细胞亚群的比较 COPD急性期组患者的CD3细胞、Th细胞、抑制性T细胞(Ts细胞)和NK细胞水平均低于缓解期组, 而健康对照组均高于急性期组和缓解期组患者, 三组CD3细胞、Th细胞和NK细胞水平比较, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

2.2 两组细胞因子的比较 COPD急性期组患者的IL-6、IL-8和TNF-α的水平均高于缓解期组患者, 而健康对照组均显著低于急性期组和缓解期组患者, 三组比较, 差异均具有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表1 三组患者T细胞亚群的比较(±s)

表1 三组患者T细胞亚群的比较(±s)

组别 例数 CD3细胞 Th细胞 Ts细胞 NK细胞急性期组 97 50.68±2.51 27.88±1.90 17.12±2.49 15.68±2.77缓解期组 73 55.46±4.15 35.30±2.98 20.58±2.62 20.02±2.13健康对照组 100 61.52±3.39 43.52±3.88 23.51±3.02 25.24±2.61 F -8.71 -18.62 -1.26 -11.55 P <0.001 <0.001 0.167 <0.001

表2 三组相关细胞因子的比较(±s, ng/ml)

表2 三组相关细胞因子的比较(±s, ng/ml)

组别 例数 IL-6 IL-8 TNF-α急性期组 97 76.42±22.08 143.82±20.74 191.84±24.49缓解期组 73 59.11±18.33 119.18±19.29 135.39±16.03健康对照组 100 43.65±16.17 58.69±9.36 97.26±20.51 F8.12 7.03 7.45 P <0.001 <0.001 <0.001

3 讨论

COPD作为一种全身性疾病, 具有患病率高、病死率高等特点, 其继心血管、脑血管及癌症之后, 位居全球死亡原因第四位。目前为止其发病机制尚未完全清楚。该病以气流受限为主要特征, 呼吸道气道炎症是该病发作的根本原因。气道炎症主要与小气道、肺泡对有害物质产生的气道炎症反应有关。首先致病原刺激炎性细胞释放炎性因子, 炎性因子对炎症细胞进行调节, 炎症细胞反过来对机体发挥作用[3]。适量的炎性因子对机体具有保护作用, 如果含量过高, 就会对身体产生损害, 使肺部组织损伤, 从而加重病情。

相关研究发现, T淋巴细胞亚群表达异常可能在COPD发病中起着重要作用。COPD患者外周血中辅助性T细胞减少, 抑制性T细胞增加, 且与肺泡损害程度及气流阻塞的严重程度呈正比[4]。此外, IL-6、IL-8和TNF-α等细胞因子参与了COPD气道炎性反应。其机制可能为：当呼吸道受到外部感染时, 能够激活肺泡巨噬细胞释放趋化因子, 吸引循环中的炎性反应细胞, 释放炎性细胞因子扩大炎性反应,从而最终导致血中相关细胞因子的升高[5]。相关研究显示, COPD患者血液中多种炎症因子含量均高于正常健康人, 并且与病情具有相关性[6]。

本研究显示, COPD患者CD3细胞、Th细胞和NK细胞水平均低于健康对照组, 而IL-6、IL-8和TNF-α的水平均高于健康对照组。而不同时期的比较结果显示, COPD急性期组患者的CD3细胞、Th细胞和NK细胞水平均低于健康对照组和缓解期组, 此外, 急性期组患者的IL-6、IL-8和 TNF-α的水平均高于缓解期组, 三组比较差异均具有统计学意义(P＜0.05)。研究结果与相关研究相符[7,8]。

总之, 随着COPD严重程度的增高, 其T淋巴细胞亚群呈降低趋势, 而细胞因子呈现出上升趋势。提示T淋巴细胞亚群和细胞因子在COPD炎症反应中发挥重要作用, 可以将其作为该病严重程度的监测指标。

[1]刘景艳, 修清玉.细胞因子在慢性阻塞性肺疾病发病中的作用.国外医学呼吸系统分册,2005,26(5):420-422.

[2]李艳丽.慢性阻塞性肺疾病患者血尿酸和血清细胞因子水平测定的临床意义.中国医师进修杂志,2012,35(19):25-27.

[3]中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组.慢性阻塞性肺疾病诊治指南(2007年修订版).中华内科杂志,2007,46(3):254-261.

[4]胡蓉. COPD患者治疗前后血清hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-8检测的临床意义.放射免疫杂志,2007,20(6):503-505.

[5]赵雪峰, 王红阳, 杨万杰. COPD患者血细胞因子水平与肺功能的相关性分析.安徽医学,2010,31(6):559-562.

[6]胡云衢, 任海波, 宋宣, 等.慢性阻塞性肺病患者T淋巴细胞及细胞因子水平的变化.武警医学,2013,24(6):485-487.

[7]曾建红, 黄健莹, 曾军, 等. COPD患者治疗前后血液细胞因子变化的检测与意义. 临床肺科杂志,2013,18(8):1403-1404.

[8]朱斌, 郝建, 王伟.慢性阻塞性肺疾病患者血清细胞因子的变化及其临床意义.临床肺科杂志,2008,13(12):1570-1571.

Expression and analysis of T lymphocyte and cytokines in chronic obstructive pulmonary disease patients

YU Zhi-hui, LIN Tao. Department of Inspection, Foshan City the Fifth People’s Hospital,528211, China

ObjectiveTo investigate the level changes of T lymphocyte and cytokines in chronic obstructive pulmonary disease (COPD) patients, in order to further confirm its clinical significance.MethodsThere were170 COPD patients as the study subjects, and they were divided into acute stage group (97 cases) and remission stage group (73 cases) by their disease state. Another100 healthy people were selected as health control group. Detection and comparisons were made on T lymphocyte subsets, and levels of interleukin-6 (IL-6), interleukin-8 (IL-8), tumor necrosis factor-α (TNF-α) in the three groups.ResultsThe acute stage group had lower levels of CD3 cell, helper T cell (Th cell), and natural killer cell (NK cell) than the remission stage group, while these were higher in the health control group than in acute stage group and remission stage group. The difference had statistical significance (P<0.05). Levels of IL-1β, IL-6, IL-8, and TNF-α in the acute stage group were higher than the remission stage group, while these in the control group were higher than the other two groups. The difference had statistical significance (P<0.05).ConclusionCellular immune function and cytokines may play important roles in morbidity and progress of COPD.

Chronic obstructive pulmonary disease; T lymphocyte; Cytokines

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.08.009

2014-12-12]

528211 佛山市第五人民医院检验科