血清胱抑素C、同型半胱氨酸联合检测对诊断高血压早期肾病的意义＊

蒋 琰，刘如石，李 原，邱义兰，邱 果，李 桑，谌 芳，吴 意

（1.湖南师范大学第一附属医院检验科，长沙410002；2.湖南师范大学医学院医学分子与免疫诊断实验室，长沙410006；3.湖南师范大学生命科学院，长沙410000）

高血压肾病是高血压并发症最严重的疾病之一，若不及时发现与治疗，其很快发展为终末期肾病（ESRD）直至死亡［1］。故高血压肾病的早期发现，对高血压患者的治疗与预后都有极大的影响。临床上肾脏功能评估的最好指标是肾小球滤过率（GFR）［2］，目前GFR 的估算主要还是依靠血清肌酐（Cr），但Cr受肌肉、年龄、种族的影响较大［3-5］。血清胱抑素C（CysC）是新近发展起来的慢性肾脏疾病（CKD）早期诊断的血清学指标，相关文献报道，其作为一种新型肾小球滤过功能指标，与Cr相比，具有更好的线性关系［6-7］。在我国，75%的高血压患者都伴有血清同型半胱氨酸（Hcy）的升高。现对393例高血压患者进行CysC、Cr、Hcy的检测，探讨其在高血压早期肾病检测中的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 （1）健康对照组：选取同期健康体检者213例，男112例，女101 例，年龄40～92 岁，平均（68.2±11.0）岁。（2）实验组：2013年1月至2014年6月该院高血压患者393例，男200例，女193例，33～91岁，平均（65.71±11.56）岁。根据KDIGO 指南［8］中CKD 的定义将其分为A 组：单纯性高血压，89例；B 组：GFR≥60mL·min-1·1.73m-2，194例，即高血压肾病Ⅰ～Ⅱ期；C 组：GFR＜60 mL·min-1·1.73m-2，110例，即高血压肾病Ⅲ～Ⅴ期。各组年龄与性别差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 仪器与试剂 AU5800全自动生化分析仪（贝克曼公司，日本）、TG-5A 离心机（湖南湘仪离心机仪器有限公司，中国）、DW-86L288超低温保存冰箱（海尔集团有限公司，中国）。CysC试剂由上海复星长征公司提供（批号：01405001）；Hcy试剂由浙江夸克公司提供（批号：140409）；Cr试剂由上海科华公司提供（批号：20131112）。血清Hcy、CysC、Cr质控品均由Bio-Rad公司提供（批号：14441，14442）。

1.3 诊断标准 排除其他疾病引起的慢性肾脏病。根据KDIGO 指南［8］：肾脏损伤或GFR≤60 mL·min-1·1.73 m-2，持续3个月。（1）肾脏损伤（肾脏结构或功能异常）大于或等于3个月，可以有或无GFR 下降，表现为病理学检查异常。肾损伤指标阳性（血、尿成分）异常或影像学检查异常。（2）GFR≤mL·min-1·1.73m-2，≥3个月，有或无肾脏损伤依据。CKD 分期：（1）G1：GFR≥90 mL·min-1·1.73 m-2，有肾脏损伤。（2）G2：89≥GFR≥60mL·min-1·1.73m-2，有肾脏损伤。（3）G3：59≥GFR≥30mL·min-1·1.73m-2。（4）G4：29≥GFR≥15 mL·min-1·1.73 m-2。（5）G5：GFR＜15mL·min-1·1.73m-2或透析。eGFR 计算公式［9］：男性GFR＝175×Cr-1.234×Age-0.179；女性GFR＝175×Cr-1.234×Age-0.179×0.79。

1.4 方法 采集患者住院第2天清晨空腹静脉血5mL 于促凝管中，30min内分离血清，离心3 500r／min×8min，收集上清液于-70 ℃冻存，批量完成测试。CysC 采用免疫比浊法，Hcy测定采用速率法，Cr测定采用循环酶法，参数设置均严格遵照试剂盒说明书规定进行。所有的测定均在室内质控检测在控后进行。

1.5 统计学处理 采用SPSS13.0 统计软件进行统计学分析，计量资料用±s表示，组间比较采用t检验；计数资料使用百分率表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组CysC、Hcy、Cr水平比较 A 组CysC 和Cr含量与健康对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），其他组别与健康对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；Hcy在所有组别与健康对照组比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 4组研究对象血清CysC、Hcy、Cr检测 结果比较（±s）

表1 4组研究对象血清CysC、Hcy、Cr检测 结果比较（±s）

组别 CysC（mg／L） Hcy（μmol／L） Cr（μmol／L）0.89±0.20 11.90±3.46 53.45±7.65 B组 1.36±0.44 16.85±5.29 78.93±25.45 C组 3.83±1.91 23.21±13.03 501.16±369.97健康对照组A 组0.87±0.16 9.17±2.59 52.28±4.67

2.2 各组血清CysC、Hcy、Cr对高血压肾病的判断准确性比较 血清CysC、Hcy、Cr对高血压早期肾病的判断都具有较高的准确性，但Hcy、Cr对早期高血压肾病的判断准确性高于CysC；而C组3个指标之间判断准确性无太大差异。见图1～6。

图1 B组血清Cr ROC曲线

图2 B组血清Hcy ROC曲线

图3 B组血清CysC ROC曲线

图4 C组血清Cr ROC曲线

图5 C组血清Hcy ROC曲线

图6 C组血清CysC ROC曲线

表2 3项指标单项检测与联合检测的阳性率结果比较

2.3 各项指标单项和联合检测高血压肾病的灵敏度、阳性率比较 B 组CysC、Hcy 的阳性率差异无统计学意义（P＞0.05），且明显高于Cr，差异有统计学意义（P＝0.00）；而血清CysC和Hcy两项联合检测的阳性率，其灵敏度明显高于单项检出率（P＝0.00）；血清Cr＋Hcy、Cr＋CysC 的检出率，差异无统计学意义（P＞0.05），与血清CysC、Hcy单项检出率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），与血清Cr检出率比较，差异有统计学意义（P＝0.00）；血清Hcy＋CysC 联合检出率与血清Cr＋Hcy＋CysC 联合检出率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），而与血清Cr＋Hcy、Cr＋CysC、CysC、Hcy、Cr的检出率相比，差异有统计学意义（P＝0.00）。C 组CysC、Hcy、Cr的检出率，差异无统计学意义（P＞0.05）；血清Cr＋Hcy＋CysC、Cr＋Hcy、Cr＋CysC、Hcy＋CysC 联合检出率两两之间进行比较，差异无统计学意义（P＞0.05），与单项血清CysC 检出率相比，差异无统计学意义（P＞0.05）；血清Cr＋CysC 与单项血清CysC、Hcy、Cr检出率相比，差异无统计学意义（P＞0.05）；血清Cr＋Hcy＋CysC、Hcy＋CysC、Cr＋Hcy与单项血清Hcy、Cr检出率相比，差异有统计学意义（P＝0.024）。见表2。

3 讨 论

本研究检测393 例不同肾脏损伤的高血压患者，CysC、Hcy和Cr在血清中的含量并进行统计学分析，结果显示A 组的CysC和Cr血清含量与健康对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），而B、C组的CysC 和Cr与健康对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.01），这表明在高血压患者中，血清CysC和Cr含量的变化与肾脏受损时GFR 减低相关联［10-11］。各组血清Hcy检测结果表明，A 组患者血清Hcy高于健康对照组，这与相关报道相似，并且血清Hcy含量随着高血压肾病的加重而增加。这可能是由于肾脏是血清Hcy代谢与排泄的主要器官，当Hcy升高可增加NADPH 氧化酶活性，促进内皮型一氧化氮（NO）合酶的解偶联作用，并抑制细胞内抗氧化酶（如谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶）的作用。累积的活性氧簇（ROS）反应与NO 生成过氧亚硝酸盐自由基，从而降低NO 生物利用度和活动，并导致血管内皮功能障碍，ROS的上调导致炎症介质的激活，进一步加重肾脏损伤；而肾脏损伤加重时，Hcy代谢障碍，血清Hcy含量不断累积，形成高Hcy血症［12］。

本研究运用ROC曲线评价血清CysC、Hcy和Cr对高血压肾病诊断的准确性，图1显示，3个指标对早期高血压肾病（B组）的诊断都有很高的准确性，具有较高的灵敏度和特异度。B组患者血清CysC、Cr的AUC 分别为0.897、0.983，但Mohammad 等［13］报道的血清CysC、Cr的AUC则分别为0.607、0.711。导致研究结果不一致的原因：（1）人种差异：本研究对象为黄种人，而其受试对象则为白种人。（2）地域差异。（3）样本例数差异：本组对393例高血压肾病患者进行了分析，而其则为80例。（4）病因差异：本研究选取的均为高血压患者引起的慢性肾功能不全，Mohammad则是研究血清Cr正常的危重患者的肾功能。（5）测定方法差异：免疫比浊法和ELISA法测定CysC，可能存在灵敏度和特异性的差异。

Suzuki等［14］抽取325例2型糖尿病患者和健康体检者的血液进行相关检测，并根据清蛋白肌酐比值和KDIGO 对2型糖尿病患者的肾脏功能进行了分级，与1级糖尿病肾病患者相比，2级患者的CysC 增高显著而Cr和β2 微球蛋白升高不明显。其研究结果表明，在2级和3级糖尿病肾病患者中，CysC与Cr和血清β2 微球蛋白比较，具有较高的灵敏度和特异性，尤其是2级糖尿病肾病和2期慢性肾衰竭。João等［15］对297例原发性高血压患者的CysC、肾脏功能和心血管危险因素进行了研究，发现有22.00% GFR 正常的高血压患者CysC 都处于高水平状态，且CysC与高血压患者的收缩压和24h尿微量清蛋白（MA）的具有相关性，明显高于Cr，其研究结果表明CysC可作为一种筛选标志物用于检测肾脏功能轻微受损的高血压患者，也可用于检测和防止肾功能正常的高血压患者的心血管事件风险。本组3个指标显示，B组CysC 和Hcy的阳性率分别为69.59%、64.43%，明显高于Cr（4.12%），且CysC＋Hcy的联合检出率也明显高于CysC＋Cr、Hcy＋Cr与CysC＋Hcy＋Cr 3项联合检出率，差异无统计学意义（P＞0.05）。故CysC和Hcy的联合检测对于高血压肾病的早期诊断具有一定的临床意义。

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