具有突变和血缘关系的亲子鉴定案例分析

喻 芳 任静妮 龚肖清 张倍铭 朱 江 黄湘婷 王 馨 梁睿熙 辛丽梅

贵州省人口和计划生育科学研究技术指导所（贵阳，550004）

亲子鉴定主要是通过对遗传基因的检测，根据孟德尔遗传规律判定被检者之间是否存在生物学亲生关系。短串联重复序列（STR）的应用极大地提高了亲子鉴定能力［1］，已成为亲子鉴定的主要手段［2］，但与传统的遗传标记（如红细胞血型、酶型和血清蛋白型等）相比，STR基因座突变率较高［2－3］，遗传突变使亲子之间的遗传关系不符合遗传规律；当争议父（母）与真父（母）有血缘关系时，争议父（母）与孩子之间（如祖孙、叔侄、姨甥等）就会有同源基因，而且血缘越近，有同源基因的STR基因座就会越多。这种情况下就会给亲子鉴定尤其是单亲案件的分析鉴定带来困难。现就本单位受理的两例典型案例作一浅析。

1 资料背景

1.1 资料

2例亲子鉴定案例均系纪检部门委托，案例1要求鉴定争议父1和争议父2与孩子的亲生血缘关系，争议父1和争议父2是亲兄弟；案例2要求鉴定父母与孩子亲生血缘关系，有领养其亲戚小孩的背景。

1.2 方 法

应用无锡中德美联公司 AGCU EX－22、21＋1加上性别基因共40个STR基因座，用Genomappe软件将等位基因标准Ladder中的片段与样本进行比较，确定样本的基因分型。

1.3 判断标准

根据《亲权鉴定技术规范》（SF／Z JD0105001－2010），3个以上基因座不符合遗传规律可排除亲权关系，若基因座符合遗传规律，计算亲权指数PI，累计亲权指数CPI≥10000支持亲权关系存在；“二联体亲权指数计算标准”、“二联体中存在不符合遗传规律的遗传标记时亲权指数计算标准”参照《亲权鉴定技术规范》和单亲案鉴定的判断标准［4］。

2 结果

2.1 案 例1

STR基因座分型见表1。从表1检测结果分析，AGCU EX22STR复合扩增体系结果显示争议父1排除2个位点，不能下排除结论；争议父2在vWA基因座不符合遗传规律，通常会考虑发生突变，按突变基因座计算 PI值，CPI 3.2146E＋04＞10000，可下认定亲权关系。但因考虑到争议父1、父2是亲兄弟关系，仅做AGCU EX22STR复合扩增体系下结论有风险，我们加做AGCU 21＋1体系，40个STR基因座分型结果显示争议父1排除3个位点以上，可排除争议父1；争议父2仅一个位点不符合，按突变基因座计算PI值，累计亲权指数 ＞10000，不排除亲生关系，支持亲权关系存在。

2.2 案 例2

STR基因座分型见表2。从表2检测结果分析，争议父很明显排除亲缘关系，争议母在AGCU EX22体系中只排除2个位点，不能下排除结论。虑到争议母和孩子亲生母亲有可能具有血缘关系，我们加做AGCU21＋1后排除位点达3个以上，可下排除结论。

表1 争议父1、父2和孩子40个STR基因座分型结果

表2 争议父、母和孩子40个STR基因座分型结果

3 讨论

在单亲亲子鉴定时，由于父子（或母子）组合缺少母亲（或父亲）的遗传信息，势必在排除信息亲权指数 （似然率）和RCP值等方面都要低于父、母、子组合的亲子鉴定，影响到亲子鉴定的准确性。而且，在实践中经常会遇到是争议父（或母）和孩子亲生父（或母）具有较近的血缘关系，若不注意咨询委托方或当事人，很可能将面临的是具有血缘关系且是单亲的亲子鉴定，如果再遇上有突变位点，将面临较大风险。

STR基因座具有高度多态性，有很高的非父排除率，同时STR的突变率也很高，使本来是亲生的父子之间也会出现不符合遗传规律的现象（即出现矛盾基因座），使得解释实验结果变得困难。在实施亲子鉴定时发现矛盾基因座现象时，需要设法确定是突变造成的，还是被检查者之间本来就不存在亲生关系（特别是具有血缘关系单亲案件），也是用STR进行亲子关系鉴定可能潜在错误的原因之一。如果所检验的男子（或者女子）与孩子的真父（母）可能有亲缘关系时，会减少矛盾基因座的数量。有血缘关系时，争议父（母）与孩子之间（如祖孙、叔侄、姨甥等）就会有同源基因，而且血缘越近有同源基因的STR基因座就会越多。本文案例1争议父1和争议父2在AGCU EX22STR复合扩增体系有20个同源基因，因此，鉴定时要充分考虑到血缘关系的影响再下结论。

STR产生突变的机制是复制时的模板滑动。突变时产生1个重复单位的变化占突变总数的90%以上［6］。如果在矛盾基因座上争议父所能提供的等位基因和孩子的生父基因之间相差超过1个重复单位，更倾向于排除他们之间有亲生关系。父系突变高于母系突变（相差约6倍），在母子亲权鉴定时应该应用不同的策略。

因此，在受理亲子鉴定司法案件时，尽量要求提供父、母样本。单亲亲子鉴定应检验更多的STR基因座，若遇到有STR突变不要轻易下排除，有血缘关系时不要轻易下肯定。单亲案在无法否定争议父或争议母是真父或真母的近亲属时，即使没有发现矛盾基因座，也只作出“不排除亲生关系”的结论。单亲案鉴定起码要检测18个STR基因座以上，若发现矛盾基因座，要增加检测至≥40个。按公式计算PI值＞10 000后，才可以做出“不排除亲生关系”或“支持存在亲生关系”的结论；若发现3个以上矛盾基因座，则应作出否定“亲生关系”的结论［4］。目前法医学广泛使用的 Powerplex、IdentifilerTM、SinofilerTM、DNATyper TM15Plus、ACGU EX22、基点20A复合扩增体系均具有较高的个体识别率和非父排除率，通常检测这些试剂盒的STR基因座已能基本满足法医物证中个体识别和亲子鉴定的检测要求，但在单亲鉴定出现了突变、有血缘关系可能的案件中，我们的经验通常若只单做一个STR试剂盒或加做以上常用STR试剂盒很难下结论，因为他们都有13个CODIS基因座重复，加做ACGU 21＋1扩增体系，往往可提高系统效能，满足鉴定需求［7］。

［1］ Collete D，Sabine F，ceclle F，et al.A comprehensive genetic map of the human genome based on 5264microsatellites［J］.Nature，1996，380（14）：152－154.

［2］ America Association of Blood Banks.Annual report summary for testing in 2002 ［DB／OL］.http：／／www.aabb.org／about＿the＿AABB／stds＿and＿Accred／ptannrpt02.pdf.2003－11－01.

［3］ Brinkman B，klintschar M，Neuhuber F，et al.Mutation rate in human microsatellites：influence of the structureand length of the tandem repeat［J］.Am J Hum Genet，1998，62（6）：1408－1415.

［4］ 伍新尧，童大跃，朱运良，等.用STR分型技术作亲权鉴定时判断标准的研究 ［J］.中山大学学报，2010，31（1）：1－6.

［5］ 侯一平，吴瑾，颜静，等.考虑突变影响的亲子鉴定父权指数计算［J］.中华医学遗传学杂志，2008，25（2）：176－178.

［6］ 朱运良，黄艳梅，伍新尧，等.单亲案亲权鉴定结果判定策略［J］.法医学杂志，2006，22（4）：281－284.

［7］ 邵伟波，张素华，李莉，等.21个非CODIS STR基因座的遗传多态性 ［J］.法医学杂志，2011，27（1）：36－38.