胱抑素C与基质金属蛋白酶9在急性脑梗死中临床价值的探讨

王　璇,吴成吉,董淑欣,王志群

(佳木斯大学附属第一医院 神经四科，黑龙江 佳木斯154000)



胱抑素C与基质金属蛋白酶9在急性脑梗死中临床价值的探讨

王璇,吴成吉,董淑欣,王志群*

(佳木斯大学附属第一医院 神经四科，黑龙江 佳木斯154000)

摘要：目的 探讨急性脑梗死患者血清胱抑素C(Cys C)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的水平变化及临床价值。方法随机选取92例急性脑封死患者作为观察组，同期健康体检者85例作为对照组，分别检测两组血清Cys C及MMP-9水平。于治疗后5 d及10 d时复查观察组上述两项指标。对观察组行颈部血管彩超检查并分级。结果观察组治疗前Cys C及MMP-9水平均高于对照组[(1.27±0.35)mg/L，(0.86±0.22) mg/L；(183.68±58.92)μg/L，(118.46±45.83)μg/L，P<0.05]。治疗后10 d观察组血清Cys C、 MMP-9水平较治疗前下降[(0.95±0.21)mg/L，(1.27±0.35)mg/L；(156.37±52.84)μg/L，(118.46±45.83)μg/L，P<0.05]。颈动脉狭窄组血清Cys C及MMP-9水平均高于无狭窄组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清Cys C及MMP-9水平在急性脑梗死时明显升高，且与颈动脉狭窄程度密切相关。在脑梗死的风险预判、病情评估、疗效及预后上有重要临床价值。

(ChinJLabDiagn,2015,19:1062)

急性脑梗死发病率高，起病急骤，病情凶险且具有较高的致残率和病死率。找到有效的判断风险、评估病情、评判疗效及预后的指标尤为重要。Cys C及MMP-9近年来被认为参与缺血性脑血管病的病理过程，与脑梗死关系密切。本研究通过测定急性脑梗死患者血清Cys C、MMP-9含量并分析其随病情进展及与颈动脉狭窄的关系，探讨Cys C、MMP-9在急性脑梗死中的临床意义。

1资料和方法

1.1一般资料选择2013年5月-2014年5月诊于我院的92例急性脑梗死患者作为研究组，其中男49例，女43例，年龄50-82岁，平均年龄(65.8±6.7)岁，所有患者均于发病后24 h内入院，诊断标准以第四届全国脑血管学术会议制定的标准为依据。对照组为同期在我院体检健康者85例，其中男44例，女41例，年龄49-81岁，平均年龄(63.2±7.3)岁。两组研究对象的选择排除恶性肿瘤、严重的心、肺、肝、肾等重要脏器疾病、颅脑外伤病史及严重感染征象者。两组研究对象性别、年龄等方面具有可比性，无显著差异 (P>0.05)。

1.2　方法

1.2.1生化指标检测清晨抽取研究对象5 ml空腹静脉血置于真空抗凝管中，加入20 μg抑肽酶(丽珠制药厂生产)及30 μl EDTA二钠，3 000 r/min 离心15 min，分离血清并取上清液与试管中，置-30℃冰箱中保存。采用免疫比浊法测定血清Cys C水平，试剂盒来自北京利德曼生化技术有限公司，测定由OLYMPUS公司生产的AU5400全自动生化分析仪完成。检测方法严格按试剂盒提供的说明书进行。样本中血清Cys C与超敏化的Cys C抗体胶乳颗粒试剂反应，形成免疫复合物产生浊度，在570 nm波长处检测吸光度的变化，其吸光度升高的水平与样品中的血清Cys C含量成正比。成人血清Cys C水平的正常范围是0.2-1.03 mg/L。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清MMP-9水平，MMP-9检测试剂盒购自艾莱萨生物科技有限公司，检测范围在45 μg/L-1 200 μg/L。检测方法严格按试剂盒提供的说明书进行。试剂盒采用双抗体夹心法原理，将抗人MMP-9蛋白与该抗体结合，再加入酶标记的MMP-9多克隆抗体与抗原-抗体复合物结合。最后加入底物显色，产生的颜色强度与MMP-9含量呈正比。观察组在治疗后5 d与10 d时复查血清Cys C及MMP-9。

1.2.2颈动脉超声检查对观察组患者于入院3d内行颈部血管彩超检查，采用Philips ALT-5000彩色多普勒超声检测仪，探头频率5-12 Mhz。两组均采用平卧位，头偏向一侧，分别于双侧颈动脉远端分叉处1 cm、颈动脉窦、颈内动脉起始处1 cm测量。采用北美症状性颈动脉内膜剥脱术研究(NASCET)标准计算颈动脉狭窄率[4]，并分为无狭窄(无斑块或可见内膜的增厚)、轻度狭窄(狭窄率小于50%)、中度狭窄(狭窄率50%-69%)、重度狭窄(狭窄率70%-99%)及完全闭塞。存在多处狭窄部位时以较严重等级划定。观察组中按照颈动脉狭窄程度分为：无狭窄组48例(颈动脉无狭窄)，有狭窄组44例(颈动脉轻、中、重度狭窄各18、15、11例)。

1.3统计学方法采用SPSS 11.0软件对所有实验所得数据进行处理，对计数资料用χ2检验，对计量资料用t检验，相关性分析采用Spearman相关性检验，P<0.05有显著差异。

2结果

2.1治疗前后两组Cys C与MMP-9水平变化观察组治疗前Cys C及MMP-9水平显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。对照组Cys C及MMP-9含量未见明显异常，在正常参考范围内。观察组血清Cys C水平在治疗后5 d及10 d呈下降趋势，与治疗前相比差异有统计学意义(P<0.05)；观察组血清MMP-9水平在治疗后5 d时高于治疗前，10 d时明显下降，与治疗前相比差异有统计学意义(P<0.05)，且两项指标治疗后5 d与10 d相比差异具有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1　治疗前对照组及治疗前后观察组Cys C与

注：与对照组相比*P<0.05;与治疗前相比#P<0.05；与治疗后5 d相比△P<0.05

2.2不同颈动脉狭窄程度Cys C及MMP-9水平观察组检出无狭窄48例(52.17%)，轻度狭窄18例(19.56%)，中度狭窄15例(16.30%)，重度狭窄11例(11.96%)。有狭窄组Cys C及MMP-9水平均高于无狭窄组，且随颈动脉狭窄程度增加而升高，各组间两两比较差异具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2　观察组不同颈动脉狭窄程度Cys C

注：与无狭窄组相比，统计学有显著差异，F=11.749(P<0.05)。与轻度狭窄组比较#P<0.05,与重度狭窄组比较△P<0.05

2.4Cys C和MMP-9相关性分析采用Spearman相关性检验，对所有急性脑梗死患者血清中CysC和MMP-9的水平分析发现，排除脑梗死相关的因素：吸烟、高血压病、糖尿病及年龄，控制其他危险因素后Cys C与是否患脑梗死呈正相关(r=0.739，P<0.01)，血清Cys C与颈动脉狭窄呈正相关(r=0.763，P<0.01)。血清MMP-9水平与外周血白细胞计数呈正相关(r=0.782，P<0.01)，血清MMP-9与颈动脉狭窄呈正相关(r=0.753，P<0.01)。

3讨论

颈动脉狭窄导致的血流动力学障碍是引起脑梗死的重要原因之一[5]。大量研究表明 ，多数脑血管病患者均伴有不同程度颈动脉狭窄，重度颈动脉狭窄还可显著增高脑梗死的复发率[6]。因引起狭窄的斑块富含脂质，本身极易脱落，加之狭窄处远端血管呈血流低灌注状态，狭窄处血流高速流动，作用于斑块表面易造成斑块破裂形成栓子。斑块破裂后导致血管壁胶原及脂质暴露，血小板聚集启动凝血途径形成血栓[7]。由此可见分析颈动脉狭窄程度与脑梗死的关系在脑梗死疾病的预防、病情程度及复发风险判断上具有重要临床意义。

Cys C是来源于所有有核细胞一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，与心血管疾病、肿瘤的生长转移等多种过程相关。Cys C参与动脉粥样硬化斑块的形成及各种炎性反应[8]。血管壁损伤时炎性细胞因子增加，刺激多种蛋白酶的过度表达，导致蛋白酶抑制剂随之增加，通过相应的Cys C上调达到蛋白酶及其抑制剂的平衡。Cys C在体内含量丰富，经肾小球滤过后在肾小管被完全吸收并酶解，是反应肾小球滤过功能的较理想指标。近年来Cys C被认为与脑血管疾病的发生发展关系密切。脑梗死后，脑脊液中的Cys C通过血脑屏障进入血浆，导致血浆Cys C含量升高。另外，脑梗死可导致急性脑水肿，从而导致颅内压增高，并通过神经内分泌紊乱机制使肾功能异常，血管紧张素和抗利尿激素分泌增加，肾血流减少，肾小球滤过率降低，血液循环中Cys C排除减少，更加促进血浆Cys C 增高[9]。国内外已研究表明血清Cys-C水平在急性脑梗死组显著增高，且与病情严重程度及CSS、NIHSS评分呈正相关[4]。研究结果表明，观察组急性脑梗死患者治疗前后血清Cys C水平显著高于对照组，Cys C水平随病情好转而逐渐下降。与国内外研究结果一致，表明Cys C 可作为诊断脑梗死的重要指标。并且大多数研究认为Cys C可能是脑梗死发生、发展的独立危险因素。

基质金属蛋白酶类是一组参与中枢神经系统多种生理和病理过程的钙离子和锌离子依赖性蛋白酶，MMP-9又称明胶酶B，主要来源于内皮细胞等，体内许多生长因子及炎性细胞因子均能诱导其表达[10]。同时MMP-9也是基质金属蛋白酶类家族中与动脉粥样硬化、脑血管疾病关系较为密切的成员之一。MMP-9是一种多源性糖蛋白，在中性粒细胞、血管内皮细胞、小胶质细胞等多种细胞中表达分泌。多项研究表明，MMP-9在脑梗死发生、脑疝形成、继发性脑水肿等病理过程中起重要作用[11]。脑梗死后血清MMP-9 含量明显增加，且与脑梗死体积、基底膜的损伤程度、血管源性的水肿呈正相关，而且梗死体积越大。病情越严重，局部和全身炎症反应越强烈。其机制可能为脑梗死时钙超载致使MMP-9 活性增加，大量降解细胞外基质中的Ⅳ型胶原，破坏了基底膜完整性并提高血脑屏障的通透性。本研究结果显示血清MMP-9水平在急性脑梗死时明显高，在治疗后5 d内先上升随后逐渐下降，其对脑梗死病情及预后有预测价值。

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关键词：急性脑梗死； 胱抑素C； 基质金属蛋白酶-9； 颈动脉狭窄

Discussion on cystatin C and matrix metalloproteinase 9 in patients with acute cerebral infarction in the clinical valueWANGXuan，WUCheng-ji，DONGShu-xin，etal.(FirstAffiliatedHospitalofJiamusiUniversityDepartmentofNeurology,JiaMu-si154000,China)

Abstract:ObjectiveTo explore the change of serum cystain C (Cys C) and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) concentration in acute cerebral infraction(ACI) patients and their clinical significance.Methods92 patients with acute cerebral infraction were chosen randomly as observational group,and 85 health examination were chosen as the control group.Measuring the level of Cys C and MMP-9 in the two groups separately.The observational group were grading by carotid duplex ultrasound.ResultsThe concentration of Cys C and MMP-9 in observational group were higher than control group before treatment [(1.27±0.35)mg/L，(0.86±0.22) mg/L；(183.68±58.92)μg/L，(118.46±45.83)μg/L，P<0.05].Compared to the control group,the level of Cys C and MMP-9 in observational group were decreased after treatment [(0.95±0.21) mg/L，(1.27±0.35)mg/L；(156.37±52.84)μg/L，(118.46±45.83)μg/L，P<0.05].The concentration of Cys C and MMP-9 in carotid stenosis group is much higher(P<0.05).Conclusion In the patients of ACI,Cys C and MMP-9 were improved significantly,and the degree of Carotid artery stenosis had contact with them closely.The level of Cys C and MMP-9 therefore might have great value in the clinical significance of ACI.

Key words:acute cerebral infraction;Cys C;MMP-9;Carotid artery stenosis

(收稿日期：2014-07-19)

文献标识码：A

中图分类号：R743

文章编号：1007-4287(2015)07-1062-03

*通讯作者

基金项目：黑龙江省青年科学基金项目(QC2011C053)