毛细管气相色谱法测定富马酸福莫特罗中的残留溶剂

田 勇，王 卫

(天津市药品检验所，天津 300070)



毛细管气相色谱法测定富马酸福莫特罗中的残留溶剂

田 勇，王 卫

(天津市药品检验所，天津 300070)

目的：建立毛细管气相色谱法检测富马酸福莫特罗中乙醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺的方法。方法：采用DB-624毛细管色谱柱；柱温采用程序升温的方法；载气为氮气；FID检测器。结果：本色谱条件下，乙醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺线性关系良好，相关系数均在0.999 6以上，平均回收率分别为101.0%、100.9%、102.8%、97.1%及100.5%。检出限分别为5、5、3、5及1.8 μg/ml。结论：本法灵敏、准确，适用于富马酸福莫特罗残留溶剂的检测。

富马酸福莫特罗，毛细管气相色谱法，残留溶剂

富马酸福莫特罗是日本山之内制药株式会社研发的第三代β2肾上腺素受体激动剂类平喘药，用于缓解由支气管哮喘、急性支气管炎、喘息性支气管炎或肺气肿等气道阻塞性疾病引起的呼吸困难等症状[1]。本品在合成工艺中使用了乙醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和N，N-二甲基甲酰胺5种有机溶剂，在生产过程中无法完全去除，故需要确保产品中这些溶剂残留量符合《中国药典》和ICH的规定[2，3]，以保证这些溶剂残留量是人体可以接受的。本项目为国家药典委员会国家基本药物质量标准提高项目，为了提高对富马酸福莫特罗的质量控制，建立了毛细管气相色谱法测定产品中的残留溶剂，并进行了方法学验证研究。该方法准确、专属性强，可用于富马酸福莫特罗中残留溶剂的控制。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 7890A气相色谱仪；FID检测器。

1.2 试药 富马酸福莫特罗(天津力生制药有限公司，批号1072-10-02-03-2、1072-10-02-03-5及1072-10-02-03-6)，乙醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯及N,N-二甲基甲酰胺均为分析醇，二甲亚砜为色谱纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件及系统适用性 色谱柱为DB-624毛细管柱[(94%二甲基聚硅氧烷-6%氰丙基苯聚硅氧烷)，(30 m×0.32 mm，1.8 μm)]，载气为氮气，流速为2 ml/min，起始柱温50 ℃，维持5 min，以10 ℃/min速率升温至200 ℃，维持5 min，进样口温度200 ℃，检测器温度250 ℃，分流比10∶1，进样量1 μl。在该色谱条件下，乙醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺5种溶剂峰均得到良好的分离，分离度符合《中国药典》的规定。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液 精密称取乙醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯及N，N-二甲基甲酰胺适量，用二甲亚砜定量稀释制成每1 ml中含乙醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯及N，N-二甲基甲酰胺分别为250、250、30、250和44 μg的溶液，作为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液 精密称取样品0.5 g，置10 ml量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.2.3 阴性溶液 以溶剂二甲基亚砜作为阴性溶液。 精密量取对照品溶液、供试品溶液和阴性溶液各1 μl，依“2.1”项下色谱条件进样，记录色谱图，见图1。

2.3 线性试验 分别精密称取各残留溶剂适量，用二甲亚砜溶解并稀释制成每1 ml中含乙醇1.25 mg、异丙醇1.25 mg、二氯甲烷0.15 mg、乙酸乙酯1.25 mg和N，N-二甲基甲酰胺0.22 mg的对照品贮备液，用二甲亚砜逐步稀释制成梯度浓度。分别精密量取上述溶液1 μl，注入气相色谱仪，记录色谱图。以浓度(C)为横坐标，峰面积(A)为纵坐标，分别进行线性回归，结果见表1。

1.乙醇 2.异丙醇 3.二氯甲烷

溶剂回归方程r线性范围(μg/ml)乙醇A=0.9284C-0.00190.999950～500异丙醇A=0.9848C+0.81170.999950～500二氯甲烷A=0.2560C-0.10060.99966～60乙酸乙酯A=0.8459C+0.05700.999950～500N,N-二甲基甲酰胺A=0.6599C+0.92300.99998.8～88

2.4 检出限试验 取对照品溶液，用二甲亚砜稀释至信噪比约为3时，测得乙醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯及N,N-二甲基甲酰胺的检出限分别为5、5、3、5和1.8 μg/ml。

2.5 重复性试验 取同一批号样品适量，照“2.2.2”项下供试品溶液配制方法平行配制6份，进样分析，计算乙醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯及N,N-二甲基甲酰胺的含量，结果显示，重复性良好。

2.6 稳定性试验 取对照品溶液和供试品溶液于0、12和24 h分别进样测定，结果表明：对照品溶液和供试品溶液24 h内稳定。

2.7 回收率试验 精密称取样品0.5 g，共9份，置10 ml量瓶中，分别用相当于各溶剂检查限度80%、100%和120%对照品溶液溶解并稀释至刻度，进样分析，按外标法计算乙醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯及N,N-二甲基甲酰胺的平均回收率分别为101.0%、100.9%、102.8%、97.1%和100.5%，RSD分别为0.6%、0.8%、2.0%、2.1%和2.1%。见表2-表6。

表2 乙醇残留溶剂回收率

表3 异丙醇残留溶剂回收率

表4 二氯甲烷残留溶剂回收率

表5 乙酸乙酯残留溶剂回收率

表6 N,N-二甲基甲酰胺残留溶剂回收率

2.8 样品测定 取三批样品适量，照“2.2.2”项下供试品溶液配制方法，按上述色谱条件测定，结果三批样品中异丙醇均为0.01%，其他几种溶剂均未检出。

3 讨论

3.1 进样方式选择 采用顶空进样法测定残留溶剂，对测定干扰小，对仪器污染少，因此低沸点的乙醇、异丙醇、二氯甲烷及乙酸乙酯测定首选顶空进样。但N，N-二甲基甲酰胺的沸点较高，不宜采用顶空进样法测定，故采用直接进样测定。

3.2 色谱柱选择 试验考查了DB-5、DB-624及DB-WAX三种不同极性的毛细管柱，采用DB-5及DB-WAX毛细管柱分离时，未能将各组分完全分离，而采用DB-624柱满足检测分离条件，并且相关色谱峰峰形最佳。

本品原生产厂家采用干燥失重统一控制水分及残留溶剂量，此次，按照国家药典委员会要求，为了加强对产品的质量控制，建立了毛细管气相色谱法测定富马酸福莫特罗残留溶剂方法，提高了产品的质量标准，有利于控制产品的内在质量。

1 金勇, 张少辉. 富马酸福莫特罗[J]. 药学进展，1998，22(3)：187-189

2 中国药典[S].二部.2010:附录61

3 周海钧.药品注册的国际技术要求(质量部分)[M].北京：人民卫生出版社，2007：126-144

Capillary gas chromatograghy for determination of residual solvents in formoterol fumarate

Tian Yong, Wang Wei

(Tianjin Institute of Drug Control,Tianjin 300070)

Objective:To establish a sample capillary gas chromatography method for the analysis of residual ethanol,isopropanol,dichlormethane ethyl acetate and N,N-dimethyl formamide in formoterol fumarate.Methods:The method included chromatogram systems,using DB-624 capillary chromatograghic column (30 m×0.32 mm,1.8 μm) with procedural column temperature control ,was established.Nitrogen gas was used as carrier gas and FID as detector.Resuits:The correlation coefficient in ethanol,isopropanol,dichlormethane ethyl acetate and N,N-dimethyl formamide were all higher than 0.999 6.The recoveries were 101.0%，100.9%,102.8%,97.1%,100.5%,respectively.The limit detection respectively were 5,5,3,5,1.8 μg/ml.Cconclustion:This method is sensitive,accurate and can be used for quality control.

formoterol fumarate, capillary gas chromatography, residual solvents

2014-06-25

R927.11

A

1006-5687(2015)01-0014-04