不同产地不同采收时间枫香树叶中异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷含量的比较*

不同产地不同采收时间枫香树叶中异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷含量的比较*

★钟瑞建1*吴安明2周国平1鄢庆伟1付辉政1*何阳虎2

(1.江西省药品检验检测研究院/江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心南昌 330029；2.江西天施康中药股份有限公司江西 鹰潭 335000)

摘要：目的：比较不同产地、不同采收期枫香树叶中异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量。方法：采收相同产地下不同采收期和相同采收期下不同产地的枫香树叶，称重、晒干，并用HPLC 法测定异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量。结果：24批枫香树叶,同一采收期中江西余江、江西鹰潭、江西弋阳三个产地的枫香树叶异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷的总含量均较高；同一产地的8个采收期中,以5,6,7月份采收的枫香树叶异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷的总含量较高,12月份采收的异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷的总含量最低。结论：不同产地、不同采收期枫香树叶中异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量存在明显差异,应注意生长环境和采收季节对枫香树叶药材质量的影响。

关键词：枫香树叶；异槲皮苷；山奈酚-3-O-芸香糖苷；HPLC 法

枫香树叶为金缕梅科枫香属植物枫香LiquidambarformosanaHance的叶，性平，味辛苦，具有祛风除湿、行气止痛、解毒之功效。民间用于治疗急性胃肠炎、痢疾、产后风等疾病，其根、树皮、树脂、叶均可入药[1-2]。 枫香树叶的主要成分有黄酮和酚酸等类化合物以及微量元素等[3-6]。枫香树叶原标准收载于1996 年版《江西省中药材标准》，该标准项下仅有性状和显微鉴别项[1]。作者以枫香树叶主要成分异槲皮苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷为指标成分对枫香树叶进行了定性和定量研究[7]，提高后的标准已收入2014版《江西省中药材标准》[8]。在1996 年版《江西省中药材标准》中规定枫香树叶夏季采收，但目前市场需求巨大，难以满足实际生产需求，且未见不同产地不同采收期枫香树叶中成分含量差异的报道。本实验选择异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷2个指标成分，对江西余江、江西鹰潭、江西弋阳3个主要产地不同采收时间的枫香树叶中的异槲皮苷及山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量进行了测定，以期明确其成分含量差异及变化，为扩大枫香树叶药源及合理采收提供理论依据。

1 材料、仪器与试剂

1.1 材料 枫香树叶药材共24批，为2014年5月至12月，采摘于江西余江、江西鹰潭、江西上饶三个产地，江西省药品检验检测研究院袁贵平主任中药师鉴定为金缕梅科植物枫香树LiquidambarformosanaHance 的叶。标本存于江西省药品检验检测研究院。

1.2 仪器 202-OAB型电热恒温干燥箱(天津泰斯特仪器有限公司)、DHG-9101-39A型电热恒温鼓风干燥箱(上海三发科学仪器有限公司)、HH-4 数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)、AB265-S 万分之一分析天(Switzerland)、ZF-2型三用紫外仪(上海市安亭电子仪器厂)、电子显微镜、Agilent1100高效液相、Agilent1200高效液相(美国Agilent)、MHXS-4-10 型高温电炉仪(上海南阳仪器有限公司)。

1.3 试剂 乙腈为色谱纯，水为娃哈哈饮用纯净水，其他试剂均为分析纯，对照品异槲皮苷(批号：131227)，山奈酚-3-O-芸香糖苷(批号：140120)，均为从上海融禾医药科技有限公司购买。

2 方法与结果

2.1 异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量测定

2.1.1色谱条件色谱柱：YMC-Pack ODS-A ( 150 mm × 4.6 mm，5 μm) ；流动相：乙腈-0.2%磷酸水溶液(13∶87)；检测波长：351 nm；柱温：25℃；流速：1.0 mL /min；进样量：10 μL。

2.1.2对照品溶液的制备精密称取异槲皮苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷的对照品适量，置50 mL 量瓶中，加甲醇溶解并定容，摇匀，得含异槲皮苷0.011mg/mL和山柰酚-3-O-芸香糖苷0.020 mg/mL 的混合对照品溶液。

2.1.3供试品溶液的制备取枫香树叶粉末( 过4 号筛)约1. 0 g，精密称定，置100 mL锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，摇匀，称定重量，回流提取1.5 h，取出放冷，称重，用甲醇补足减失重量，摇匀，过滤，精密量取续滤液25 mL 于蒸发皿中，蒸干，残渣用20 mL水使溶解，先用石油醚提取3次，每次20 mL，弃去石油醚液，再用乙酸乙酯提取3次，每次20 mL，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣用甲醇溶解置10mL 量瓶中，定容至刻度，摇匀，即得。

2.2 异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷标准曲线的绘制 分别精密吸取“2.1.2”项下混合对照品溶液，按上述色谱条件进样分析，以对照品溶液浓度X( μg/mL) 为横坐标，峰面积Y为纵坐标，绘制标准曲线。结果表明：异槲皮苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷浓度分别在5.485 ～ 54.452 μg/mL和4.561～45.613 μg/mL范围内，与峰面积呈良好线性关系，回归方程分别为：Y= 19.751X- 14.152 ，r= 0. 9999；Y= 19.831X- 3.877 ,r= 0.9999。

2.3 样品测定 取不同产地、不同采收期的枫香树叶，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.1.1”项下色谱条件测定，根据峰面积计算样品中异槲皮苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷的含量。结果见表1-3。

从表 1可知，2014年5-11月，江西余江枫香树的树上叶子(01)中异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷含量，随着时间的推移，基本平稳，表明夏、秋季江西余江枫香树的树上叶子(01)中异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷含量基本稳定。2014 年 12 月，江西余江枫香树的落叶(02)中异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量较低，也比树上叶子(01)含量低很多，结合该批次药材采收前的天气情况，应是淋了雨所致。表明枫香树叶中异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷含量可能与淋雨水有较大关系。

表1　江西余江不同采收期枫香树叶异槲皮苷

注：YJ14120802批次药材在2014年11月 20日观察时，叶子正由黄变红，已经开始集中掉落，2014年12月 8日采收时观察，叶子已经全部掉落。17天期间，江西余江2014年12月3日天气为小雨-阵雨，下了阵雨。

表2　江西鹰潭不同采收期枫香树叶异槲皮苷

注：YT14120702批次药材在2014年11月10日观察时，叶子正由黄变红，已经开始掉落，2014年12月7日采收时观察，叶子已经部分掉落。27天期间，江西鹰潭2014年12月3日天气为阴-雨，下了小雨。

从表2可知，2014年5一11月，江西鹰潭枫香树的树上叶子(01)中异槲皮苷含量基本平稳，但山奈酚-3-O-芸香糖苷含量随着时间的推移，略有下降趋势，表明夏、秋季江西鹰潭枫香树的树上叶子(01)中异槲皮苷含量基本稳定，而山奈酚-3-O-芸香糖苷在叶子较嫩时含量较高，随后基本平稳。2014年12月，江西鹰潭枫香树的落叶(02)中异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量较低，也比树上叶子(01)含量低很多，结合该批次药材采收前的天气情况，应是淋了雨所致。表明枫香树叶中异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷含量可能与淋雨水有较大关系。

表3　江西上饶不同采收期枫香树叶异槲皮苷

注：YY14120502批次药材在2014年11月18日观察时，叶子正由黄变红，已经开始掉落，2014年12月5日采收时观察，叶子已经部分掉落。17天期间，江西鹰潭2014年12月3日天气为阴-雨，下了小雨。

从表3可知，2014年5一11月，江西弋阳枫香树的树上叶子(01)中异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷含量基本平稳，表明夏、秋季江西弋阳枫香树的树上叶子(01)中异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷含量基本稳定。2014 年 12 月，江西弋阳枫香树的落叶(02)中异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷的含量较低，也比树上叶子(01)含量低很多，结合该批次药材采收前的天气情况，应是淋了雨所致。表明枫香树叶中异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷含量可能与淋雨水有较大关系。

3 结论和讨论

2014 年 5一11 月，江西余江、江西鹰潭、江西弋阳三个产地的枫香树的树上叶子中异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷含量总和均较高，高于2014版《江西省中药材标准》中枫香树叶含量测定项下的规定。表明江西余江、江西鹰潭、江西弋阳地区枫香树的树上叶子药材质量较好，异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷含量均能满足枫香树叶含量测定项下的规定。

2014 年 5一11 月，江西余江、江西鹰潭、江西弋阳枫香树的树上叶子中异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷含量随时间推移，含量基本稳定，表明江西余江、江西鹰潭、江西弋阳的枫香树的树上叶子中异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷含量随着时间的推移，较稳定，这为增加枫香树叶秋季采收来源提供了数据支持。

2014 年 12 月，江西余江、江西鹰潭、江西弋阳三个产地的枫香树的落叶中异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷含量均较低，表明鹰江西余江、江西鹰潭、江西弋阳三个产地的地上落叶需要及时采收，以免被雨淋，导致含量不合格。

参考文献

[1]江西省卫生厅. 江西省中药材标准[S]. 南昌：江西科学技术出版社，1996: 130.

[2] 江苏新医学院编. 中药大辞典(上册)[M].上海：上海科学技术出版社，1985:1 261.

[3] 刘亚敏，刘玉民，马明，等. 枫香树叶总 酮提取工艺优化及含量动态变化[J]. 食品科学，2010，31(4):35.

[4] 谢跃生，郑小军， 郑丽蓉，等. 枫香树叶中某些水溶性微量元素的分析[J].广西师院学报 ，2000，17(3) : 5.

[5] 刘志林，倪士峰， 刘惠，等. 枫香成分及其生物学活性研究进展[J].西北药学杂志，2009，24(6):513.

[6]容若. 枫香树属植物化学成分及其药理活性研究进展[N]. 中国中医药报，2003-04-09.

[7]袁惠，钟瑞建，付辉政，等. RP-HPLC 法同时测定枫香树叶药材中 3 个主要黄酮苷成分的含量[J]. 药物分析杂志，2014，34(6)：1 021-1 024.

[8] 江西省卫生厅. 江西省中药材标准[S]. 南昌：江西科学技术出版社，2014: 213.

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收稿日期：(2015-05-07)编辑：曾文雪

中图分类号：R284.2

文献标识码：A

通信作者:付辉政，博士，助理研究员。研究方向：中药活性成分及质量标准。Tel:0791-86217386，E-mail:fhzfhz620@sohu.com。

基金项目:第一作者: 钟瑞建(1963—)，主任药师。研究方向：中药活性成分及质量标准。Tel:0791-88158786，E-mail: zhongrj@jxfda.gov.cn。