荧光法测定果汁饮料中胭脂红的含量

2015-02-20张彦青

当代化工研究 2015年3期

张彦青

（衡水学院化工学院河北衡水 053000）

引言：胭脂红(Ponceau 4R)是在我国乃至全世界用量最大、使用最广泛的单偶氮类人工合成食用色素。我国卫生部规定，食品及饮料中最大食用量为0.05 g/kg[1]。目前最常用的检测胭脂红的方法有高效液相色谱法(HPLC)、极谱法、分光光度法、高效毛细管电泳法（HPCE）等[2-6]。荧光分析法相对于其他的测定方法灵敏度高，选择性好，试样用量少。相对于传统方法，分析过程简单、省时且易于推广。是一种高效且精确的分析方法。

一、实验部分

1.主要仪器和试剂

日立F-4500 荧光分析仪；FA2204B 电子天平（上海精密科学仪器有限公司）；TU-1901 双光束紫外可见分光光度计; 胭脂红(天津多福源实业有限公司)

2.实验方法

在 10 mL 比色管中，加入一定量的胭脂红标准溶液（或胭脂红样品液），用二次蒸馏水定容，摇匀，在激发波长为301.0 nm、扫描速度为1200nm/min、激发单元狭缝为10.0nm，发射单元狭缝为5.0nm、光电管电压为700V、响应速度为2.0s，在 200 ～600 nm 波长范围内测定上述待测液的荧光发射光谱。根据442.0 nm 波长处的荧光强度进行定量分析。

二、结果与讨论

1.确定激发波长范围

按照测定方法2.2.2，扫描10μg/mL 胭脂红标准溶液的吸收谱图，结果如图1 所示。

图1 10μg/mL 胭脂红标准溶液吸收谱图

由图1 可知：10μg/mL 胭脂红标准溶液在330nm 附近有明显吸收，由此可确定其最佳激发波长在330nm 附近。

2.确定最佳激发波长

于1 支10 mL 的比色管中准确移取0.1mL 胭脂红标准储备液，用二次蒸馏水定容，摇匀，配成10μg/mL 胭脂红标准溶液。选用1 cm石英比色皿，扫描各个激发波长（330.0nm附近）下的荧光谱图，见图2，

图2 不同激发波长下胭脂红荧光光谱图

由图2 可知：在280.0-330.0nm 激发光照射下，10μg/mL胭脂红标准溶液在440.0nm左右可以产生明显的荧光峰。且随着激发波长的增大，荧光相对强度先增大后减小，且在301.0 激发光照射下荧光相对强度达到最大，由此即可确定胭脂红的最佳激发波长为301.0nm。

3.最佳发射波长的确定

扫描胭脂红标准溶液的荧光谱图，扫描结果如图3：

图3 激发波长为301.0nm 荧光光谱图

由图3 可知：当激发波长为301.0nm 时，胭脂红的发射波长为442.0nm。

4. 标准曲线的绘制

表1 胭脂红标准溶液浓度C 与荧光强度的关系

以荧光强度F 对胭脂红标准液浓度C 作直线，如图4 所示。其线性拟合方程及相关系数为：F= 17.86525+ 17.09652c，r = 0.9979，线性范围为0.1～ 13.0μg/mL。

图4 胭脂红标准曲线

5.样品含量测定

从样品一原液中取5mL 于100mL 容量瓶中，用二次蒸馏水定容，摇匀。并将此溶液标记为样品一稀释溶液。再分别于6 支10 mL 的比色管中准确移取1.0mL 样品一稀释溶液，用二次蒸馏水定容，摇匀，配成样品一溶液。测定其荧光强度。根据线性回归方程计算出待测液中胭脂红的浓度，再换算成饮料原液中胭脂红的含量。结果见表2。