中药复方防治肾纤维化研究进展

2015-02-09章娟娟阮诗玮

亚太传统医药 2015年9期

关键词：冲剂真武汤通脉

章娟娟,阮诗玮

(1.福建中医药大学, 福建福州 350004；2.福建中医药大学附属人民医院, 福建福州 350004)

中药复方防治肾纤维化研究进展

章娟娟1,阮诗玮2

(1.福建中医药大学, 福建福州 350004；2.福建中医药大学附属人民医院, 福建福州 350004)

肾纤维化(包括肾小球硬化和肾间质纤维化)是慢性肾脏病进展至终末期肾病的病理途径。因此，积极寻找防治肾纤维化的药物和方法以延缓肾功能衰竭，具有重要意义。中医药治疗肾脏病具有明显优势，其在防治肾纤维化方面具有良好的应用前景，就中药复方补肾化瘀汤、健脾清化方、解毒复肾逐瘀方、六味地黄方、真武汤等防治肾纤维化进行了综述。

肾纤维化；终末期肾病;中药复方；研究进展

慢性肾脏病的发病率随着我国人口老龄化以及糖尿病、高血压患病人数的增加而逐年上升。无论是原发性还是继发性的肾脏疾病，肾纤维化(renal fibrosis,RIF)是各种慢性肾脏疾病进展过程中存在的共同病理演变途径[1]。现代医学主要是应用血小板源性生长因子(PDGF)受体阻断剂、骨形成蛋白-7(BMP-7)增效剂、血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)、血管紧张素受体拮抗剂(ARB)等治疗措施抗肾纤维化，但效果并不理想。中医药治疗肾脏病具有明显优势，其在防治RIF方面具有良好的应用前景，本文就中药复方防治RIF做一综述。

1 补肾化瘀汤

补肾化瘀汤由熟地黄、巴戟天、补骨脂、山茱萸、当归、制大黄等组成，全方寒温并用、补泻兼施，共奏补肾化瘀降浊之功。宋朝功等[2]采用单侧输尿管结扎(UUO)大鼠实验模型，实验中模型组大鼠出现α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达增强，而补肾化瘀汤组和代文组α-SMA表达较模型组中有不同程度的下降(P<0.01)。提示α-SMA表达增加参与肾纤维化过程，且补肾化瘀汤通过抑制α-SMA的表达，从而抑制成肌纤维细胞的形成是该方可能的抗RIF作用机制。张立红[3]用补肾化瘀汤治疗慢性肾衰竭，发现该方可改善患者临床症状，明显降低血尿素氮(BUN)肌酐(Cr)值，甚至恢复到正常范畴，认为该方能改善肾纤维化，延缓慢性肾衰竭的进展。

2 健脾清化方

健脾清化方由党参、生黄芪、草果仁、苍术、黄连、制大黄等药物组成，有健脾益气、清热化湿之功。马晓红等[4]采用5/6肾切除大鼠模型(Platt法)，通过测定比较各组血BUN、Cr水平；肾组织HE染色及Masson染色，观察肾脏病变；采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)测定抑制转化生长因子β1-mRNA(TGF-β1-mRNA)及结缔组织生长因子mRNA(CTGT-mRNA)水平，发现健脾清化方治疗组血BUN、Cr水平、肾间质纤维化程度及TGF-β1-mRNA，CTGT-mRNA的表达均低于模型组(P<0.01)。证明健脾清化方对肾纤维化有积极的治疗意义，其机制可能是通过抑制TGF-β1-mRNA水平从而抑制CTGT-mRNA表达，影响细胞外基质(ECM)合成途径而实现的。

3 解毒复肾逐瘀方

解毒复肾逐瘀方由黄芪、党参、丹参、赤芍、路路通、川芎、山茱萸、车前子、牛膝、石韦、白花蛇舌草、大黄组成。研究显示，解毒复肾逐瘀汤可抑制ECM的合成沉积。可能的机制有两个：一方面通过抑制TGF-β1的产生，减少CTGT的合成，以抑制ECM的沉积，从而达到预防和治疗肾纤维化的作用[5];另一方面通过调节基质金属蛋白酶/基质金属蛋白酶抑制酶(MMP/TIMP)的平衡以防治肾纤维化[6]，但MMP和TIMP之间相互影响的机制尚未明确。

4 抗纤灵冲剂

抗纤灵冲剂由丹参、制大黄、桃仁、全当归、牛膝组成。王东等[7]应用抗纤灵冲剂治疗Platt大鼠，发现肾组织中Ⅰ型胶原(ColⅠ)、α-SMA水平较模型组下降(P<0.01)，表明抗纤灵可明显降低肾间质成纤维细胞α-SMA的表达，减少肌成纤维细胞的活化与形成，继而使细胞外基质Ⅰ型胶原生成减少，从而延缓慢性肾衰大鼠肾纤维化进程，保护肾功能。符强等[8]研究表明抗纤灵冲剂可降低肾小球硬化模型大鼠肾组织核转录因子-κB(NF-κB)表达及抑制血管紧张素Ⅱ受体活性，进而起到抗RIF作用。何立群等[9]实验发现该方能通过抑制肾组织肿瘤坏死因子α(TNFα)、PDGF的mRNA表达，降低血清TNFα，减少TNFα、PDGF对肾组织细胞的增生作用，从而减轻了肾小球和间质ECM的沉积，改善RIF，延缓肾功能恶化。临床研究表明抗纤灵冲剂可明显改善肾功能，同时显著降低了血清层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)和提高血浆型纤维连接蛋白(PFN)从而减轻肾组织纤维化[10]。

5 六味地黄汤

六味地黄汤由熟地黄、山茱萸、芍药、泽泻、牡丹皮、泽泻组成。实验研究[11-12]表明六位地黄汤可使模型大鼠血BUN、Scr及24h尿蛋白值降低，肾脏病理可见淋巴细胞侵润、肾间质胶原纤维沉积、肾小球系膜增生、肾小管萎缩等情况较模型组明显减轻；可降低5/6肾切除12周后大鼠肾组织中ColⅠ、ColⅢ的蛋白表达水平，改善细胞外基质集聚；能降低肾切除12周后大鼠肾组织缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、CTGT蛋白及mRNA表达水平。提示六位地黄汤可能通过改善缺氧从而抑制HIF-1α的表达，进而下调CTGF的蛋白水平，防止ColⅠ、ColⅢ等ECM的沉积，从而减轻肾间质纤维化。隆献等[13]通过实验研究显示六味地黄汤可诱导Platt大鼠肝细胞生长因子(HGF)在肾小球系膜、基底膜及肾小管上皮细胞的胞浆表达，同时促进肝细胞生长因子特异性受体c-Met蛋白于肾小管上皮细胞胞膜和肾间质中表达，促使肾小管上皮细胞的增生和修复。提示六味地黄汤能有效促进HGF/c-Met系统上调，促进细胞有丝分裂和损伤修复，从而有助于保护肾脏的结构和功能，抑制肾间质纤维化的产生。

6 真武汤

真武汤由炮附子、白术、生姜、茯苓、芍药组成。有文献[14]报道真武汤可降低UUO大鼠血BUN、Scr及血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)、整合素链激酶(ILK)蛋白的含量，并且在肾脏组织HE染色中可见炎性细胞侵润、肾小管萎缩、间质纤维化程度均较模型组减轻，免疫组化检测真武汤组肾组织中FN、MMP-9的表达受到抑制。推测其机制可能是真武汤通过下调 Ang-Ⅱ的蛋白表达，从而抑制ILK的蛋白表达，继而降低FN和MMP-9的蛋白含量，从而减缓肾间质纤维化的发展。韩凌等[15]在动物实验中发现该方可显著减轻肾间质的病理损伤，降低尿中肾损伤分子1(KIM-1)、Clusterin(CLU)、骨桥蛋白(OPN)含量，且以真武汤高剂量组作用明显，提示真武汤可通过降低KIM-1、CLU、OPN含量而达到延缓肾功能下降保护肾脏的作用，但该作用机制尚待进一步明确。李莎莎等[16]通过实验证明真武汤可提高UUO大鼠总超氧化物酶(T-SOD)的活力，增强肾脏组织细胞的抗氧化能力，从而缓解肾纤维化的进展。

7 肾复汤

肾复汤由熟地黄、山茱萸、淮山药、泽泻、牡丹皮、茯苓、大黄、猫须草、芡实、黄芪组成。黄仁发等[17]运用肾复汤治疗慢性肾脏病3～4期患者62例，观察治疗前后血BUN、Scr、24h尿蛋白定量、血清LN、血清胶原纤维Ⅳ(CV-Ⅳ)、血清SOD、血清丙二醛(MDA)的变化，并监测肝功能和心电图等安全性指标。结果发现肾复汤能减少慢性肾脏病患者尿蛋白的排泄，降低BUN和Scr水平，改善肾功能，增高血清FN水平，降低血清CV-Ⅳ水平，而肝功能和心电图指标两组无统计学差异(P>0.05)，提示肾复汤具有良好的抗肾RIF作用。且肾复汤可降低血清MDA水平、增高血清SOD水平，提示肾复汤的抗RIF作用与抗氧化应激有关，但有待多中心、大规模的临床对照研究进一步证实。

8 肾毒宁冲剂

肾毒宁冲剂由制大黄、制黄精、黄芪、丹参、桃仁、仙灵脾、沉香粉等组成。朱致军等[18]通过Platt大鼠实验认为肾毒宁冲剂能抑制TGF-β1的表达，从而抑制TGF-β1诱导的下游因子CTGT的合成与分泌，减少对肾小管上皮细胞的刺激，降低上皮细胞转化为肌成纤维母细胞(MFB)发生。还可降低肾衰大鼠血内皮素(ET)水平，使ET促进肾小球硬化及慢性肾衰竭进展的因素明显减低，以达到抗RIF的作用。还有研究[19-20]显示，肾毒宁冲剂能明显降低肾衰竭大鼠Ang-Ⅱ水平，使Ang-Ⅱ通过激活CTGT促肾纤维化作用得到抑制，进而减少Ⅰ、Ⅲ型胶原、FN等ECM的合成，从而起到延缓慢性肾脏病进展，改善肾纤维化的作用。

9 止血通脉宁

止血通脉宁主要由黄芪、生地黄、鬼箭羽、夏枯草、莪术、大黄、三七等药物组成。马新换等[21]观察止血通脉宁药物血清干预TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)CTGT、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)mRNA、MMP-9mRNA的表达，发现HK-2经TGF-β1诱导后CTGT、PAI-1mRNA的表达显著上升，再次证实了TGF-β1与肾纤维化发生的相关性。但经止血通脉宁药物血清干扰后，CTGT、PAI-1mRNA的表达逐渐下降，MMP-9mRNA的表达逐步上升，与单纯TGF-β1诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05)，说明止血通脉宁具有调控纤维化细胞因子网络的作用，可防治肾纤维化的发展。同样的实验方法张玉梅等[22]研究表明，该方可通过下调纤维化细胞因子血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达达到防治肾间质纤维化的目的。杨丽霞等[23]发现正常的HK-2细胞只表达E-钙黏蛋白(E-cadherin)，不表达α-SMA。经TGF-β1诱导后，免疫组化染色显示大量细胞表达α-SMA，且ColⅠ、ColⅢ和FN的分泌也明显增多，而E-cadherin的表达几乎消失。在经该方血清干预后，随着药物浓度增加，逐渐抑制了α-SMA的表达，并恢复上皮细胞标志性蛋白E-cadherin的表达，同时ColⅠ、ColⅢ和FN的分泌逐渐减少，说明止血通脉宁在一定程度上具有抗RIF的作用，其机理可能是抑制肾小管上皮细胞转分化。

综上所述，肾纤维化的形成与多种细胞因子如：α-SMA、TGF-β1、CTGT、HGF、SOD、MDA、BMP-7等参与有关。中药在治疗慢性肾衰竭和抗肾纤维化方面具有独特的作用，但中医药防治RIF的研究还比较零散，缺乏大样本、多中心循证医学的研究，并且有研究不够深入、低水平重复研究的现象。

[1] 郑春霞，秦卫松，王金泉.肾脏纤维化的发生机制及治疗新观点[J].肾脏病与透析肾移植杂志，2006,15(4):360-365.

[2] 宋朝功，田晓红，赵琪.补肾化瘀汤对肾纤维化大鼠肾组织中α-SMA表达的影响[J].中国民康医学,2011,23(9):1081-1082.

[3] 张立红.补肾化瘀法治疗慢性肾功能衰竭[J].辽宁中医杂志,2010(S1):674-676.

[4] 马晓红，王东，王云满，等.健脾清化方对慢性肾衰大鼠肾组织TGFβ1-mRNA及CTGTmRNA表达的影响 [J].中国中医药科技,2013,20(2):122-128.

[5] 阮君山，王少明，严晓华，等.解毒复肾逐瘀方对肾纤维化大鼠CTGF及TGFβ_1表达的影响[J].中医临床研究,2011,3(17):9-11.

[6] 王立勉，王少明，周欢，等.解毒复肾逐瘀方对肾纤维化大鼠MMP-2、MMP-9及TIMP-1表达的影响[J].海峡药学,2011,23(8):39-41.

[7] 王东，王云满.抗纤灵对5/6肾切除大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原的影响[J].中华临床医师杂志：电子版,2012(23):7790-7793.

[8] 符强.抗纤灵对5/6肾切除大鼠肾组织核因子κB、血管紧张素Ⅱ及其受体表达的影响[J].中医药信息,2010(1):65-68.

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[11] 唐群.从HIF-1信号通路探讨六味地黄汤干预5/6肾切除大鼠肾间质纤维化实验研究[D].长沙：湖南中医药大学,2013.