PDGF-B在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

王新征 刘金彪 侯永强 王宁 王明军

PDGF-B在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

王新征 刘金彪 侯永强 王宁 王明军

目的 探讨血小板源性生长因子B链(PDGF-B)在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其意义。方法 免疫组织化学染色检测甲状腺乳头状癌组织(甲状腺乳头状癌病例组, n=35)和正常的甲状腺组织中(正常甲状腺组)PDGF-B的表达差异。结果 甲状腺乳头状癌病例组(HSCORE中位数=1.92, SEM=0.46)与正常甲状腺组(HSCORE中位数=0.38, SEM=0.05)PDGF-B链的表达差异有统计学意义(P＜0.05)。PDGF-B链在甲状腺乳头状癌病例组中较正常甲状腺组明显过度表达。甲状腺乳头状癌组阳性率68.6%, 而正常甲状腺组阳性率仅为17.1%。结论 PDGF-B在甲状腺乳头状癌的发病和发展中起到了一定的作用, PDGF很有希望成为甲状腺乳头状癌的一个潜在辅助诊断因子及治疗靶点。

血小板源性生长因子；甲状腺乳头状癌；免疫组织化学

甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer, PTC)是最常见的甲状腺恶性甲状腺肿瘤［1］, 尽管其特征性肿瘤呈乳头状排列,毛玻璃样核、核沟、核内包涵体等对诊断具有重要价值,但是临床工作中常出现甲状腺微小乳头状癌及滤泡上皮乳头状增生难以鉴别的病例,成为目前诊断的难点,本实验的目的是通过免疫组化技术检测甲状腺乳头状癌组织中血小板源性生长因子B链(platelet-derived growth factor-B, PDGF-B)蛋白的表达, 初步探讨PDGF与甲状腺乳头状癌的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 35例甲状腺乳头状癌组织标本取自河南科技大学第一附属医院2008～2012年行甲状腺癌根治术患者存档的石蜡块, 其中男9例, 女26例, 年龄11～74岁, 患者术前均未经过任何抗肿瘤治疗, 术后经病理检验证实为甲状腺乳头状癌。35例正常的甲状腺组织标本取自中山大学第一附属医院2008～2012年甲状腺腺瘤或节结性甲状腺肿手术患者切除标本的存档石蜡块中相对正常的甲状腺组织, 其中男6例, 女29例, 年龄16～73岁。

1.2 试剂及染色方法 兔抗人血小板源性生长因子B链多克隆抗体购自武汉博士德公司；二抗选用DAKO公司GK50075 EnVision两步法试剂盒。所有标本均5 μm厚连续切片。切片常规脱腊后行常规HE染色, 镜下观察鉴定病变性质及部位, 以确定所采用的标本的正确性。免疫组化染色检测按EnVision两步法试剂盒说明操作, 用TBS液代替一抗作为阴性对照。

1.3 分析方法 先在10×10倍光镜下观察免疫组化玻片染色结果, 随机选取10个细胞分布较均匀的视野, 每个视野在4×100下随机计数50个细胞。根据细胞棕黄色着色的强度按下列记分方法分为4个等级：0分=无着色, 1分=轻度着色, 2分=中度着色, 3分=强着色, 然后按公式HSCORE=Σ(i+1)Pi(这里i=1, 2, 3, Pi=评分为i的细胞/该例标本总观察细胞×100%)计算得到的HSCORE (histochemical score)得分［2,3］代表该张切片PDGF-B链蛋白表达的水平进行统计分析,该评分法考虑到了单个细胞是否阳性及其强弱,更具体更全面的反应细胞的蛋白表达情况。

1.4 统计学方法 采用SAS8.1统计学软件处理数据。计数资料采用Wilcoxon秩和检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

PDGF-B链主要表达于肿瘤细胞的胞浆中, 在细胞膜上也有表达, 而在癌旁的间质中很少表达。甲状腺乳头状癌病例组(HSCORE中位数=1.92, SEM=0.46)与正常甲状腺组(HSCORE中位数=0.38, SEM=0.05)PDGF-B链的表达差异具有统计学意义(P＜0.05)。PDGF-B链在甲状腺乳头状癌病例组中较对照组明显过度表达。设定HSCORE得分≥0.6分者为阳性, 则病例组阳性率68.6%, 而对照组阳性率仅为17.1%。

3 讨论

甲状腺乳头状癌发病率约占全身恶性肿瘤的1%～2%,且呈逐年上升趋势,尤其以女性明显增加,对人类健康危害极大［4-6］。甲状腺癌的具体病因尚不明确,临床研究及流行病学调查发现射线辐射、激素影响、摄入碘量等因素与其发病有关。但这些因素如何作用于细胞导致肿瘤发生发展的分子机制目前尚不清楚。

PDGF是目前人们研究较多的一种生长因子。目前国外的研究结果显示PDGF促进细胞恶性转化和肿瘤生长的作用很可能是通过肿瘤细胞中形成的PDGF的自分泌回路等机制过度激活PDGF受体介导的受体酪氨酸蛋白激酶细胞信号传导通路从而引起细胞的增殖转化。另外越来越多的资料显示PDGF与肿瘤新生血管的形成关系密切［7］。PDGF及其受体在肿瘤组织间液高压的形成中起着重要作用, 而组织间液压力(interstitial fluid pressure, IFP)较正常组织升高是许多实体性肿瘤共有的特点。这些都提示了PDGF在多种恶性肿瘤的发生和发展中所起的重要作用, 是很有前途的分子水平肿瘤治疗干预措施的靶向。但目前PDGF与甲状腺乳头状癌的关系仍不明了, 试验结果显示PDGF-B在甲状腺乳头状癌中存在过度表达, 其表达在甲状腺乳头状癌与正常甲状腺组织之间的差异明显, 提示PDGF-B在甲状腺乳头状癌的发病和发展中起到了一定的作用。联系到PDGF在其他多种恶性肿瘤的发生和发展中所起的重要作用, PDGF很有希望成为甲状腺乳头状癌的一个潜在辅助诊断因子及治疗靶点。

［1］ 夏宏才, 张佃乾, 陈丛绪, 等.甲状腺乳头状癌并颈淋巴结广泛转移的外科治疗.中国普通外科杂志, 1995(6):39.

［2］ 凌启柏.放疗后发生的甲状腺乳头状癌的治疗.国际外科学杂志, 1981(2):78.

［3］ 袁维堂,范正军,王庆兆.分化型甲状腺癌再次手术的评价.中国医刊, 1997(11):156.

［4］ 佟杰,罗杰,笪冀平,等. 甲状腺乳头状增生活跃与微小乳头状癌的诊断与鉴别诊断.诊断病理学杂志, 2011, 18(3):173-177.

［5］ 李琦,陈丽华,宋朝君,等.甲状腺球蛋白免疫组织化学在甲状腺癌诊断中的应用.中国组织化学与细胞化学杂志, 2008 , 17(4):375-376.

［6］ 张立海,王娇,孟凡石,等.MTA1基因在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义.黑龙江医药科学, 2006, 29(6):55-56.

［7］ 陈云新,沈丹华,孙昆昆,等. 甲状腺微小乳头状癌中Galectin-3、CK19、HBME-1和CD56的表达及意义.临床与实验病理学杂志, 2010, 26(4):425-428.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.03.023

2014-09-23］

471000 河南科技大学第一附属医院普外三科