栀子柏皮汤不同配伍在大鼠体内的药代动力学研究

黄健忠

栀子柏皮汤不同配伍在大鼠体内的药代动力学研究

黄健忠

目的 探讨栀子柏皮汤不同配伍对栀子苷体内药代动力学的影响。方法 将30只SD大鼠随机分为5组, 每组6只。分别灌胃含等量栀子苷的栀子苷单体溶液及栀子、栀子-炙甘草、栀子-黄柏、栀子-黄柏-炙甘草汤剂, 采用HPLC方法测定给药后不同时间血药浓度, 比较药代动力学参数。结果 汤剂组AUT及T1/2显著高于栀子苷单体组, 栀子-炙甘草、栀子-黄柏及栀子黄柏-炙甘草组T1/2、AUT0-t及AUT0-∞均显著高于栀子组, 栀子-黄柏-炙甘草组AUT0-t、AUT0-∞、T1/2、Tmax及Cmax均高于其他组, 组间比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 栀子柏皮汤药材间相互作用有助于促进栀子苷吸收, 从而提高药物生物利用度。

栀子柏皮汤；配伍；药代动力学

栀子柏皮汤源于《伤寒论》, 由栀子、黄柏和炙甘草三种中药组成, 在身黄发热症、伤寒治疗方面具有良好功效［1］。药代动力学可用于研究不同配伍对药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄的影响, 从而明确发挥药效的物质基础［2］。本文就栀子柏皮汤不同配伍对栀子苷体内药代动力学的影响进行研究。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂 栀子苷对照品购自中国药品生物制品检定所, 批号：110749-200714；中药栀子、黄柏和炙甘草购自桂平市人民医院药剂科；色谱纯乙腈和甲醇购自美国Tedia公司；分析纯冰乙酸购自国药化学试剂有限公司。

1.2 仪器 高效液相色谱仪Agilent 1200型(美国Ailent公司)；高速冷冻离心机Z32HK型(上海贺默仪器科技有限公司)；真空干燥箱DZF-6020MBE型(上海博讯实业有限公司)。

1.3 动物 SD大鼠, 雌雄各15只, 230～250 g, 南方医科大学动物实验中心提供, 合格证号：0092481。

1.4 方法

1.4.1 标准溶液配制 精确称量1 mg栀子苷对照品, 甲醇溶解配制成0.1 g/L储液, 倍比稀释成0.5、1、2、4、8、16、20 mg/L的系列工作液。

1.4.2 汤剂制备及含量测定 按10∶6∶3比例称取栀子、黄柏及炙甘草, 100℃蒸馏水煎煮3次, 20 min/次, 煎液合并过滤取上清, 浓缩后取100 μl上清液甲醇稀释至1000倍, 混匀后离心取上清液, 0.22 μm滤膜过滤后HPLC分析测定栀子苷含量。栀子、栀子-黄柏及栀子-炙甘草的汤剂制备及栀子苷含量测定方法同上。

1.4.3 色谱条件 Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm)；柱温25℃；进样量为10 μl；流动相为0.1%冰乙酸水溶液-甲醇；检测波长为238 nm。

1.4.4 药代动力学实验 将30只SD大鼠随机分为5组,每组6只。雌雄各3只, 实验前12 h禁食, 以40 mg/kg栀子苷的标准给予栀子苷单体、栀子、栀子-炙甘草、栀子-黄柏和栀子-黄柏-炙甘草灌胃, 于给药后6、15、30、45 min及1、2、4、6、8、10 h进行眼眶取血, 肝素离心管离心取上清后冻存待测。

1.4.5 血浆样品预处理 取200 μl血浆, 加600 μl乙腈混匀后离心取700 μl上清, 真空干燥后用100 μl的30%甲醇溶液进行复溶, 然后测定。

1.5 统计学方法 采用3P97药代动力学软件进行血药浓度-时间数据分析, 采用SPSS17.0统计学软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 线性范围 取200 μl SD大鼠空白血浆, 加入栀子苷系列工作液, 分别配制成0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.20、1.60及2.00 mg/L样品进行测定, 以栀子苷峰面积为纵坐标,以栀子苷浓度为横坐标, 得到线性方程为Y=0.6926X+0.0248 (r=0.9997), 线性范围为0.06～2.00 mg/L。

2.2 药代动力学研究 5组SD大鼠分别灌胃含等量栀子苷的栀子苷单体溶液及栀子、栀子-炙甘草、栀子-黄柏、栀子-黄柏-炙甘草汤剂, 经血药浓度-时间数据分析结果表明,汤剂组AUT及T1/2显著高于栀子苷单体组, 栀子-炙甘草、栀子-黄柏及栀子黄柏-炙甘草组T1/2、AUT0-t及AUT0-∞均显著高于栀子组, 栀子-黄柏-炙甘草组AUT0-t、AUT0-∞、T1/2、Tmax及Cmax均高于其他组, 组间比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

3 讨论

中药配伍是中医药基本理论之一, 是中医药现代化研究的重要组成部分之一［3］。目前, 中药方剂配伍的研究已经从组织器官、动物模型发展到了药细胞, 甚至分子水平［4］。中药药代动力学在考察中药体内分布、吸收、代谢和排泄方面具有重要作用［5］。本研究初步建立了利用HPLC研究栀子柏皮汤不同配伍对栀子苷体内药代动力学影响的测定方法, 并利用此方法研究发现, 汤剂给药比栀子苷单体给药生物利用度高, 全组方给药比其他配伍给药生物利用度高, 从而说明,栀子柏皮汤药材间相互作用有助于促进栀子苷吸收, 从而提高药物生物利用度。

［1］ 张英丰, 董宇, 朱晓新.中药复方药代动力学研究的方法与思考.中国天然药物, 2008, 6(5):321-324.

［2］ 韩静文, 黄成, 宋珏, 等.栀子柏皮汤不同配伍在大鼠体内的药代动力学研究.中国实验方剂学杂志, 2014, 20(8):110-113.

［3］ 黄立华, 夏侯林, 王建安.息香在大鼠体内的药代动力学研究.时珍国医国药, 2013, 24(4):813-814.

［4］ 张鹏, 杨秀伟.紫花前胡苷在大鼠体内的药代动力学研究.中国药理学通报, 2008, 24(9):1240-1244.

［5］ 刘益华, 李晶, 林曼婷, 等.栀子有效成分栀子苷的现代研究进展.中国药学杂志, 2012, 47(6):406-309.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.05.203

2014-09-19］

537200 广西桂平市人民医院药剂科