RP-HPLC测定地佐辛的含量

祖若玉 徐凌霞 杨敏 管晓琴 蔡亚兰 李燕

（扬子江药业集团质量管理部，江苏 泰州 225321）

RP-HPLC测定地佐辛的含量

祖若玉 徐凌霞 杨敏 管晓琴 蔡亚兰 李燕

（扬子江药业集团质量管理部，江苏 泰州 225321）

目的：建立地佐辛含量测定的反相高效液相色谱法（RP-HPLC）。方法：色谱柱为SHIMADZV VP-ODS（250 mm× 4.6 mm；5μm），流动相为乙腈-三乙胺溶液（20∶80），检测波长：281 nm，流速：1.0 m L/min，柱温：30℃，进样量：20μL。结果：地佐辛在0.05～ 0.30 mg/m L范围内线性关系良好，r=1.000 0；平均回收率为100.2%（RSD=1.0%）。结论：该法操作简便、结果准确，可以用于地佐辛的定量分析。

反相高效液相色谱法；地佐辛；含量测定

地佐辛是一种新型强效阿片类镇痛药，用于缓解术后和癌症等引起的中重度疼痛，与非甾体类消炎药联合应用于大手术后止痛，有良好的应用前景。本文参考原国家食品药品监督管理局YBH09172006（试行）质量标准和《中国药典》[1]对测定地佐辛含量的方法进行了研究及各项验证，结果表明反相高效液相色谱法（RP-HPLC）可以简便、准确地测定地佐辛的含量。

1 仪器与试药

Agilent1260型高效液相色谱仪，G1314B可变波长紫外检测器，Chemstation化学工作站，梅特勒-托利多（Mettler-Toledo）XS205型电子天平，梅特勒-托利多（Mettler-Toledo）MP220型酸度计。地佐辛对照品（来源：原中国药品生物制品检定所，批号：171262-200901，含量：100%），乙腈为色谱纯，其他制剂为分析纯。地佐辛（批号：11100711，11101111，11101311，11102511，11110311，11110611）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：SHIMADZV VP-ODS（250 mm× 4.6 mm；5μm），流动相：乙腈-三乙胺溶液（取1 000 m L水，加2.5 m L三乙胺，用稀磷酸（1→5）调节 pH至 3.2）（20∶80），流速：1.0 m L/min，检测波长：281 nm，柱温：30℃，进样量：20μL。

2.2 对照品溶液的制备

取地佐辛对照品约20mg，精密称定，置100m L的量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1 m L中约含0.2 mg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备

取本品约20 mg，精密称定，置100 m L的量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1 m L中约含0.2 mg的溶液，即得。

2.4 专属性试验

按上述色谱条件，取对照品溶液、样品溶液和溶剂各20μL，分别注入液相色谱仪。样品溶液色谱图中，在与对照品色谱图相应的位置上，有相同色谱峰，保留时间均为16.95分钟，而溶剂在此保留时间处无干扰。见图1。

2.5 线性关系

取地佐辛对照品约20 mg，精密称定，加流动相分别配制成含地佐辛浓度约为0.05，0.10，0.15，0.20，0.25，0.30 mg/m L的溶液，按上述色谱条件进行检测分析，记录峰面积，以峰面积（Y）为纵坐标，浓度（μg/m L）为横坐标，进行线性回归，绘制标准曲线，得地佐辛的回归方程为：

Y=10 044.787 76X＋2.469 21（r=1.000 0），

结果表明地佐辛在0.05～ 0.30 mg/m L范围内线性良好。

2.6 精密度试验

取地佐辛对照品溶液（0.201 4 mg/m L），进样体积：20μL，重复进样 6次，结果地佐辛峰面积RSD为0.1%。

2.7 重复性试验

取地佐辛（批号：11100711）6份，按照“2.3”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件进行测定。结果地佐辛的含量为100.14%（RSD=0.5%）。

2.8 稳定性试验

取“2.7”项下的供试品溶液1份，在室温下放置，在不同时间段（0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12 h）分别进样测定，测得地佐辛峰面积的RSD为0.1%，说明供试品溶液在12小时内稳定。

2.9 回收率试验

取已知含量的地佐辛9份，分别加入精密称定的约 0.4，0.5，0.6 mg的地佐辛对照品溶液各3份，混匀，按上述色谱条件分别进样 20μL，测得峰面积值，计算回收率，结果见表1。

2.10 样品含量测定

2.1 0.1按本方法检测选不同批号（6批）的地佐辛，按照 “2.3”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件进行测定，并按外标法计算样品中地佐辛的含量，结果见表2。

2.1 0.2按原质量标准检测取地佐辛约0.2 g，精密称定，加冰醋酸20 m L溶解后，加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1 mol/L）滴定至溶液显蓝色，并将滴定结果用空白试验校正。每1 m L高氯酸滴定液 （0.1 mol/L）相当于 24.54 mg的C16H23NO。计算地佐辛的含量，结果见表3。

图1 HPLC图谱

表1 地佐辛回收率试验结果

表2 6批样品地佐辛含量检测结果 （%）

表3 6批样品按原质量标准地佐辛含量检测结果(%)

3 讨论

3.1 由2.10项可看出，按本方法检测所得的结果与按原质量标准检测所得的结果可比。

3.2 作者分别选取了不同比例的流动相，不同厂家和规格的色谱柱进行对比分析，并根据原国家食品药品监督管理局 YBH09172006（试行）有关物质检测项下规定，选择了最佳色谱条件色谱柱为SHIMADZV VP-ODS（250 mm×4.6 mm；5μm），流动相为乙腈-三乙胺溶液（20∶80），流速：1.0m L/min，柱温：30℃，检测波长：281 nm。

上述色谱条件下，RP-HPLC测定地佐辛的含量线性关系良好，精密度高，稳定性好，准确可靠，可以用于地佐辛的定量分析。

[1] 国家药典委员会.中国药典2010年版（二部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010.

Content Determ ination of Dezocine by RP-HPLC

Zu Ruoyu，Xu Lingxia，Yang M in，Guan Xiaoqin，Cai Yalan，Li Yan （Quality Management Department of Yangtze River Pharmacy Group，Jiangsu Taizhou 225321，China）

Objective:To establish a method for the content determination of dezocine by reversed phase high-performance liquid chromatography（RP-HPLC）method.Methods：SHIMADZV VP-ODS（250 mm×4.6 mm；5μm)column was used w ith the mobile phase of acetonitrile three triethylam ine solution（20∶80）， the detection wavelength was at 281 nm， the flow rate was 1 m L/m in，the column temperature was at 30℃，and the sample size was 20μL.Results:A good linear relationship of dezocine was w ithin the range of 0.05～ 0.30 mg/m L（r= 1.000 0），the average recovery rate was 100.2% （RSD=1.0%）.Conclusion:The method is simple and accurate，and can be used for quantitative analysis of dezocine.

RP-HPLC；Dezocine；Determ ination of Content

10.3969/j.issn.1672-5433.2015.01.007

2014-07-28）

祖若玉，女，工程师，主管药师。研究方向：药物分析及标准研究。E-mail：648167921@qq.com