卵巢皮质间质细胞增生的免疫组化表达

余瑛

卵巢皮质间质细胞增生的免疫组化表达

余瑛

目的 探讨卵巢皮质间质细胞增生的免疫组化表达并对基因进行免疫组织化学检测。方法 随机选取40例卵巢皮质间质细胞增生伴子宫内膜癌、卵巢癌、平滑肌瘤等疾病增生的卵巢皮质间质细胞进行免疫组织化学各项指标检测。另外，观察内膜癌各项癌基因蛋白、肿瘤细胞增殖的表达。结果 良性与恶性肿瘤检测结果中超过60%存在C-erbB-2表达，对合并有恶性肿瘤的卵巢皮质增生细胞Rb进行监测发现增生间质细胞有12例表达，占60%。所有皮质间质细胞增生病例中合并内膜癌患者2例且增生间质细胞p53有表达。另8例患者合并子宫内膜癌，癌基因C-erbB-2和Rb有表达。2例良性肿瘤患者有该2种指标的共同表达。结论 伴有子宫内膜癌、卵巢癌的卵巢增生的皮质间质细胞C-erbB-2、Rb表达阳性，在子宫肌瘤等良性病变C-erbB-2和PCNA表达阳性，p53在增生间质细胞表达较少。血E2及P检测均正常，在子宫内膜癌细胞各项免疫组化染色多呈阳性。

卵巢；皮质间质细胞增生；免疫组织学；内膜癌；平滑肌瘤

卵巢皮质间质细胞增生易引发瘤样病变，以发生增生的间质细胞呈漩涡状排列结节或卵巢全皮层增厚且卵巢内滤泡发育停止为主要表现[1-2]。患者一旦发病多表现为雄激素水平过高或乳腺癌等发病率升高。本文将探究卵巢皮质间质细胞增生相关基因的表达，并对伴发癌的癌基因与抑癌基因进行免疫组织化学检测。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012年12月～2013年12月江西省赣州市肿瘤医院妇科手术全切子宫及附件患者标本共40例。患者年龄26～64岁，平均年龄（45.3±19.2）岁。所有患者均有不同程度阴道出血、腹部包块等。其中20例患者为卵巢皮质增生伴有子宫内膜癌及卵巢癌；20例患者伴子宫平滑肌瘤、月经紊乱及内膜息肉。所有患者入院时一般资料差异无统计学意义，具有可比性。

1.2 方法 取双侧卵巢及子宫标本进行常规切片HE染色，观察其形态学改变。卵巢增生的间质细胞及子宫内膜癌标本进行免疫组织化学检测[3-4]。S-P试剂盒按照实验步骤逐步完成。进行血清雌二醇、孕酮放射免疫检测。

1.3 统计学方法 对本组研究的数据采用SPSS13.0统计软件进行分析。计数资料用例数（n）表示，计数资料组间率（%）的比较采用χ2检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 免疫组织化学染色 见表1。

2.2 血液学检测 在手术治疗后3d内，所有患者E2及P水平均在正常指标范围内。

表1 良性与恶性肿瘤检测结果(n)

3 讨论

本次试验对发生卵巢皮质间质细胞增生合并良性及恶性疾病的患者其卵巢皮质增生间质细胞进行免疫组织化学实验对比。结果显示，伴有恶性肿瘤的增生间质细胞主要以C-erb-2和Rb癌基因为主，伴有良性肿瘤发生增生间质细胞主要以Rb和PCNA表达为主。PCNA（增殖细胞核抗原）在肿瘤组织中分布较正常组织中分布更为广泛，是判断各种恶性肿瘤细胞增殖及恶性程度的重要指标，同时还能够在一定程度上对预测肿瘤细胞分化程度、浸润深度、淋巴结转移及化疗效果发挥作用。另外，它参与细胞DNA损伤修复、细胞周期转换调控、染色体重组及DNA甲基化等，能够反映肿瘤细胞的代谢和DNA、RNA的合成状态，与多种肿瘤的分化、浸润、淋巴结或脏器转移、肿瘤复发等有关。合并内膜癌、卵巢癌恶性肿瘤细胞C-erb-2、Rb及p53均为过度表达。Rb基因是遗传性呈视网膜细胞瘤中发现的抑癌基因。该基因位于13q14区，是G1期Gyclin/CDK复合物介导的磷酸化作用共同的限速底物，其发生突变或某些DNA病毒基因的产物可结合去临滑状态的Rb，导致细胞过度增殖。它的突变有可能与卵巢癌的发生和早期行为有关。对绝经后卵巢间质细胞增生妇女进行检查发现其睾酮水平仅在卵巢静脉中有所增高。本次试验中对雌激素、孕酮等指标进行检测发现血中雌激素水平未有明显变化。发生肿瘤样病变多由于间质增生细胞导致雌性激素紊乱所引起。C-erB-2与表皮生长因子受体EGFr同源[5-6]。不同肿瘤的发生与发展均与该指标扩增及基因表达有关。P53基因是与人类肿瘤关系最密切的肿瘤相关基因，也是约半数恶性肿瘤的代表性抑癌基因，具有调节转录、抑制细胞生长、诱导细胞凋亡的作用。当细胞DNA损伤、发生肿瘤时，该基因蛋白积聚，可通过PCR或免疫组化法检测出突变型P53,因此，P53在正常子宫内膜和增殖型子宫内膜中无表达，但在子宫内膜癌中有阳性表达。该基因在子宫内膜癌发病过程中阳性表达率约为17%～75%。本次试验结果显示，良性与恶性肿瘤检测结果中超过60%存在C-erbB-2表达。P53和Rb基因属于抑癌基因，具有生长负调节作用，可有效抑制细胞恶性生长[7-9]。当抑癌基因结构遭到破坏时会导致突变且不表达正常产物；或在蛋白水平抑制抑癌基因产物的活性导致细胞生长负调节基因作用失常，导致细胞恶性生长。本实验对合并有恶性肿瘤的卵巢皮质增生细胞Rb进行监测发现增生间质细胞有12例表达，占60%。所有病例中仅有2例合并内膜癌患者增生间质细胞P53有表达。8例合并有子宫内膜癌病C-erbB-2和Rb 2种癌基因在增生的间质细胞表达；伴有良性肿瘤仅有2例两种癌基因共同表达。

Milde在对子宫内膜癌Rb研究中发现正常内膜上皮细胞，增生内膜上皮细胞及内膜癌细胞均呈阳性表达。而Li在研究中发现在不同细胞周期p53和Rb可表现为弱表达和不表达。本次试验中恶性肿瘤病例癌细胞C-erbB-2、Rb、p53和PCNA均为过度表达，与其他研究报道相一致。说明癌基因和抑癌基因在子宫内膜癌和卵巢癌的发生发展中起着重要作用。

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Objective To investigate the immunohistochemical expression of ovarian stromal cells proliferation and to detect the expression of the gene for immunohistochemistry. Methods 40 cases of stromal cells proliferation with endometrial cancer, Ovarian Cancer, Leiomyoma were selected randomly, immunohistochemistry staining was used to evaluate the cell proliferation. In addition, the expression of oncogene protein and the proliferation of tumor cells were also observed. Results The results showed that the positive rate of C-erbB-2 in both begion and malignant tumor cells are more than 60%, from the cbservation of Rb in malignant tumor with ovary cortex proliferation, the positive rate is 60% with 12 cases shows the expression of cell proliferation. p53 showed only 2 cases expressed from stromal cells proliferation with endometrial cancer patients,furthermore, C-erbB-2 and Rb showed 8 cases expressed from stromal cells proliferation complicated with endometrial cancer patients. For begion tumor cases, only 2 showed C-erbB-2 and Rb gene expressed. Conclusion C-erbB-2 and Rb are positive in proliferating stromal cells in the cases of cell proliferation of ovary cortex complicated with endometrium carcinoma or ovarian carcinoma, C-erbB-2 and PCNA showed positive in begion tumor cases, p53 shows little expressed in proliferating stromal cells. E2 and P test shows normal, immunohistochemical staining of endometrium carcinoma cells are positive.

Ovary; Stromal cell proliferation; Immunohistology; Endometrial carcinoma; Leiomyoma

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.22.008

江西 341000 江西省赣州市肿瘤医院 （余瑛）