款冬花化学成分和药理活性研究进展

吴琪珍，张朝凤，许翔鸿，张 勉

(中国药科大学 生药学研究室， 江苏 南京 211198)

款冬花化学成分和药理活性研究进展

吴琪珍，张朝凤，许翔鸿，张 勉*

(中国药科大学 生药学研究室， 江苏 南京 211198)

款冬花是菊科植物款冬TussilagofarfaraL. 的干燥花蕾，为传统止咳药物。近几年来关于款冬花的研究重点是倍半萜、酚酸和款冬多糖，在抗肿瘤、抗结核及神经保护等活性研究方面有了新的进展。本文就近年来款冬花化学成分与药理活性的研究进行了简要综述。

款冬花；化学成分；药理活性

款冬花为菊科植物款冬(TussilagofarfaraL.) 的干燥花蕾。每年12月或地冻前当花尚未出土时采挖，除去花梗及泥沙，阴干[1]。款冬花辛、甘而温，无毒；主治润肺下气，化痰止嗽。治咳逆喘息，喉痹[2]。《神农本草经》称款冬花为“治嗽之最”，尤其是款冬有甘温清补的功效，因此古今常用。随着现代研究的发展，从款冬花中分离得到了各种化学成分，包括倍半萜、黄酮、有机酸等，款冬花的一些新的药理作用也渐渐发掘，为传统中药的现代应用提供了广阔的前景。本文主要对款冬花的化学成分及近年来的药理研究进行综述，为款冬花的深入研究和开发利用提供依据。

1 化学成分

1.1 萜类

款冬花中的萜类主要有三萜和倍半萜类成分。三萜如山金车二醇、款冬二醇，款冬巴耳新二醇(bauer-7-ene-3,16-diol)，巴耳三萜醇(bauenenol)和异巴耳三萜等[3]。

倍半萜有：tussilagonone (1)、tussilagone (2)、 7β-(3-ethyl-cis-crotonoyloxy)-1alpha-(2-methylbutyryloxy)-3,14-dehydro-Z-notonipetranone (3)、8-angeloylxy-3,4-epoxy-bisabola-7(14),10-dien-2-one (4)[4]、1α,5α-bisacetoxy-8-angeloyloxy-3β,4β-epoxy-bisabola-7(14),10-dien-2-one(5)、7β-(4-methylsenecioyloxy)oplopa-3(14)E,8(10)-dien-2-one(6)、7β-senecioyloxyoplopa-3(14)Z,8(10)-dien-2-one(7)、1α-7β-di(4-methulsenecioyloxy)oplopa-3(14)Z,8(10)-dien-2-one(8)、(3R,4R,6S)-3,4-epoxybisabola-7(14),10-dien-2-one (9)、(1R,3R,4R,5S,6S)-1-acetoxy-8-angeloxoyloxy-3,4-epoxy-5-hydroxybisabola-7(14),10-dien-2-one(10)、14(R)-hydroxy-7β-isovaleroyloxyoplop-8(10)-en-2-one(11)、1α-(3″-ethyl-cis-crotonoyloxy)-8-angeloyloxy-3β,4β-epoxy-bisabola-7(14),10-diene(12)、 7β-angeloyloxy-14-hydroxy-notonipetranone(13)[5]、1α-hydroxy-7β-(4-methylsenecioyloxy)-oplopa-3(14)Z,8(10)-dien-2-one(14)[6]等。

1.2 黄酮类

款冬花中含有大量黄酮类化合物，如：槲皮素，异槲皮素苷(isoquercitrin)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素4′-O-β-D-葡萄糖苷、金丝桃苷、芦丁、山柰酚和山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷、柯伊利素(chryserol)、木犀草素(Luteolin)、橙皮苷、芹菜素-7-甲醚、芹菜素7-O-β-D-葡萄糖苷(apisenin-7-O-β-D-glucopyranoside)等[7-8]。

1.3 酚酸类

酚酸类成分主要有咖啡酸衍生物，如咖啡酸、咖啡酸甲酯、咖啡酸乙酯、(E)-2,5-二羟基桂皮酸、绿原酸、3-O-咖啡酰基奎宁酸、3-O-咖啡酰基奎宁酸甲酯、3,4-二咖啡酰基奎尼酸、3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎尼酸、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯[7-9]。此外，Liu Yufeng等[10]从款冬花中分离得到反式阿魏酸、异阿魏酸、反式咖啡酸、邻苯二甲酸、对羟基苯甲酸、没食子酸等。

1.4 生物碱类

款冬花主要含有肾形千里光碱(senkirkine)和千里光宁(senecionine)，二者均为有毒的吡咯里西啶类生物碱[11]。濮社班等[12]从款冬花中分离得到tussilagine、tussolaginine、isotussilagine和isotussolaginine。

1.5 挥发油类

余建清等[13]对款冬花挥发油进行了研究，通过GC-MS鉴定了52种化合物，占挥发油总量90.20%，化合物类型主要是倍半萜及链状烯烃，主要含有的挥发油有：α-十一烯(12.93%)、β-红没药烯(9.12%)、1,10-十一二烯(7.56%)、环十一烯(5.66%)、斯巴醇(5.26%)、二表-α-香松烯环氧化物(4.99%)、榄香烯(4.32%)及反-10-甲基-内-三环[5.2.1.0(2.6)]癸烷(3.36%)。

1.6 甾体及其他

刘可越等[14]从款冬花中分离得到常见的甾体类化合物，如：β-谷甾醇、麦角甾醇、豆甾醇、α-菠甾醇、豆甾醇-β-D-葡萄糖苷、胡萝卜苷和α-菠甾醇-β-D-葡萄糖苷。此外，款冬花中还含有其他类型成分，比如核苷酸、葡萄糖、氨基酸等。

2 药理活性

2.1 止咳、祛痰和平喘作用

传统中药方剂中，款冬花主要功效为“润肺下气，止咳化痰，用于新久咳嗽，喘咳痰多，劳嗽咳血”[1]。东欧一些地区亦用款冬花或叶的制剂治疗气管炎、咽炎及支气管哮喘[15]。吴笛等[16]通过豚鼠离体气管条实验表明，款冬酮和克氏千里光碱具有一定的解痉作用，这或许和款冬的平喘作用有关。Li Zhenyu 等[17]通过款冬花蕾和花梗的代谢组学分析和药效比较发现，款冬花中含有大量的绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、芦丁，可能为款冬花止咳药效成分。

2.2 抗炎作用

Lim等[18]发现，倍半萜类化合物款冬酮能抑制LPS刺激BV-2小神经胶质细胞引起的 iNOS及 COX-2表达，从而抑制炎症因子的释放。Cheol Hwangbo等[19]则研究了款冬酮的抗炎机制，发现款冬酮是通过诱导血红素氧合酶-1(HO-1)的释放从而产生抗炎效果。此外，体外抗炎实验研究表明，款冬花中分离得到的三种新的倍半萜类化合物能够抑制LPS诱导的 RAW 264.7细胞NO释放，进一步证实了款冬花具有抗炎作用[6]。

2.3 抗肿瘤作用

款冬多糖和款冬酮具有抗肿瘤的作用。细胞体外实验发现，款冬粗多糖能诱导人白血病K562细胞的凋亡[20]，且对人非小细胞肺癌A549生长及凋亡实验证明，款冬花多糖剂量依赖性地抑制A549细胞24h增殖(P<0.05)，并可诱导A549细胞凋亡，同时上调p53基因表达、下调bcl-2基因表达[21]。余涛等对款冬多糖抗肿瘤进行了小鼠体内实验，以小鼠鼠肉瘤(S180)、小鼠肝癌(H22)瘤株及小鼠网状细胞白血病(L615)瘤株造模，结果发现款冬花多糖对S180、H22小鼠的抑瘤率分别为55.76%、45.61%；对L615白血病小鼠生命延长率>55.76%[22]。这些研究表明款冬多糖具有抗肿瘤的效果。

Li等[23]发现款冬酮有抗抗结肠癌的作用，降低β-catenin活性，同时能够降低 Wnt/β-catenin 信号通路目标基因 cyclin D1 和 c-myc的表达，从而抑制结肠癌细胞的增殖。此外，从500个天然产物的ELISA系统活性筛选发现，款冬花对TRAIL具有增敏作用[24]。TRAIL 通路是未来发展抗癌药的一个非常重要的通路，因为它能选择性地诱发癌细胞凋亡，对抗肿瘤研究具有重要意义。

2.4 抗结核作用

款冬的正己烷部位和乙酸乙酯部位显示有抗结核的作用。其中，对香豆酸单独给药或对香豆酸与对羟基苯甲酸混合给药表现出最强的抗结核作用[25]。

2.5 神经保护作用

款冬提取物具有神经保护作用，有可能用于神经退行性疾病的治疗[26]。Lim等[27]从款冬花中分离得到4个倍半萜化合物，能抑制LPS诱导的BV-2细胞NO、PGE2及活性氧(ROS)的释放，并且通过抑制NF-κB通路及清除ROS而抑制LPS诱导的神经细胞死亡。冯延琼等[28]利用荧光光谱法初步分析发现款冬提取物与“节点蛋白”PICK1的结合位点位于PDZ结构域，款冬提取物能有效抑制PDZ结构域与GluR2的相互作用。在GluR2下调引起兴奋性毒性而产生的多种神经性疾病中，PICK1的PDZ结构域是一个潜在的药物靶标。

2.6 减肥作用

大鼠肝脏肝微粒体和HepG2 细胞肝微粒体的体外 DGAT (甘油酰基转移酶)实验筛选结果表明，款冬酮能有效抑制DGAT1 的产生，同时能显著抑制甘油三脂的合成，预示款冬酮可能成为治疗肥胖或二型糖尿病的先导化合物[29]。Gao Hong等[30]从50个传统中药中筛选发现款冬花甲醇提取物具有抗α-葡萄糖苷酶活性，并且从中分离得到四个化合物，其中3,4/3,5/4,5/-二咖啡酰奎宁酸具有明显的抑制麦芽糖酶活性，其构效关系表明连接在奎宁酸母核上的咖啡酰基团对活性十分重要。

2.7 抗菌作用

Lukáš Hleba等[31]对斯洛伐克几种野生药用植物进行了抗菌活性筛选，发现款冬花提取物具有最强烈的抗菌活性。从款冬花提取物中鉴别出槲皮素、山奈酚及几种酚酸类化合物，其中槲皮素和咖啡酸含量最高，可能为抗菌有效成分。

3 安全性评价

款冬花中含有西啶生物碱，可引起肝脏毒性，这是人们对款冬花存在质疑的最主要原因。张燕等[32]探讨了款冬花提取物、总生物碱部位、非生物碱部位和克氏千里光碱(senkirkine)对小鼠肝脏的毒性作用。结论在所给剂量下，水提液无肝脏毒性，用药安全；总生物碱、克氏千里光碱有明显的肝脏毒性。

然而多年的临床应用中，款冬花复方并未发现有不良反应。在中国药典中，款冬花为“无毒”，并没有特别规定；在Australian SUSMP 中，款冬花属于不在违禁物质的范畴，可以使用。现代药理研究显示，款冬花水提液口服给药，小鼠的LD50为124 g/kg，人体理论等效剂量为603.2 g/60kg；乙醇提取物腹腔注射LD50为112 g/kg，人体理论等效剂量为544.9 g/60 kg；醚提取物静脉注射LD50为43 g/kg，人体理论等效剂量为209.2 g/60 kg[33]。这些LD50值远远高于中国药典规定的款冬常用剂量5～10 g，因此，正常范围内使用款冬用药是安全的。不过，在款冬花制剂工艺过程中，要注意加强对肝毒性生物碱含量的监测，确保用药安全。

4 结语与展望

款冬花为传统止咳化痰良药，临床常与紫菀配伍使用，《本经疏证》曰：“《千金》、《外台》，凡治咳逆久咳，并用紫菀、款冬者十方二九。”随着科学技术的发展，对款冬花的质量评价和药效评估有了更为严谨的科学手段，同时，从款冬花中分离得到了各种化学成分，浸膏与植物单体的共同研究让款冬花走出了传统用药的局限，不再是单一的止咳平喘药物，而是在抗肿瘤，抗氧化，神经保护等多个方面显示出了良好的药理活性。希望款冬花的这些作用能够得到更深入的研究，与临床相结合，为传统中药的现代化应用做出贡献。

[1] 国家药典委员会. 中国药典：一部[S]. 北京：化学工业出版社，2010：312 .

[2] 南京中医药大学.中药大辞典:下册[M].2版.上海:上海科学技术出版社，2006：3194-3197.

[3] 陈雪园，张如松，杨苏蓓.款冬花化学成分及药理毒理研究进展[J]. 亚太传统医药，2012，8(1)：173-4.

[4] Park H R, Yoo M Y, Seo J H, et al. Sesquiterpenoids isolated from the flower buds ofTussilagofarfaraL. inhibit diacylglycerol acyltransferase [J]. J Agric Food Chem，2008, 56(22): 10493-10499.

[5] 刘可越，张铁军，高文远,等.款冬花的化学成分及药理活性研究进展[J].中国中药杂志，2006，31(22)：1387-1341.

[6] Li Wei, Huang Xin, Yang Xiuwei. New sesquiterpenoids from the dried flower buds ofTussilagofarfaraand their inhibition on NO production in LPS-induced RAW264.7 cells [J]. Fitoterapia, 2012, 83(2): 318-322.

[7] 吴笛，张勉，张朝凤，等. 款冬花中黄酮和酚酸类成分的研究[J].中国中药杂志，2010，35(9)：1142-1144.

[8] 刘可越，张铁军，高文远，等. 款冬花的化学成分研究[C]. 第六届全国药用植物与植物药学术研讨会.

[9] 刘玉峰，杨秀伟，武滨. 款冬花化学成分的研究[J].中国中药杂志，2007，32(22)：2378-2381.

[10] Liu Yufeng . Chemical constituents the flower buds ofTussilagofarfara[J].Journal of Chinese pharmaceutical scienes, 2007, 16: 288-293.

[11] Jiang Zhangjian, Liu Feng, Jennifer Jia Lei Goh, et al. Determination of senkirkine and senecionine inTussilagofarfarausing microwave-assisted extraction and pressurized hot water extraction with liquid chromatography tandem mass spectrometry [J]. Talanta, 2009, 79(2): 539-546.

[12] 濮社班，徐德然，张勉. 中药款冬中肝毒吡咯里西啶生物碱的LC / MSn 检测[J]. 中国天然药物，2004，9 ( 2 ) ：2932-2961.

[13] 余建清，于怀东，邹国林. 款冬花挥发油化学成分的GC-MS分析[J]. 中国中药杂志，2005，30(15)：1216-1218.

[14] 刘可越，刘海军，张铁军，等. 款冬花中萜类及甾体化合物的分离与鉴定[J]. 复旦学报，2010，49(3)：389-393.

[15] Xue Shuiyu, Li Zhenyu, Zhi Haijuan, et al. Metabolic fingerprinting investigation ofTussilagofarfaraL. by GC-MS and multivariate data analysis[J]. Biochemical Systematics and Ecology, 2012, 41: 6-12.

[16] 吴笛，张朝凤，张勉，等. 中药款冬花的化学成分研究[J].中国药学杂志，2008，43(4)：260-263.

[17] Li Zhenyu, Zhi,Haijuan Xue Shuiyu, et al.Metabolomic profiling of the flower bud and rachis ofTussilagofarfarawith antitussive and expectorant effects on mice [J]. Journal of Ethnopharmacology, 2012, 140: 83-90.

[18] Lim H J, Lee H S, Ryu J H. Suppression of inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 expression by tussilagone from Farfarae flos in BV-2 microglial cells [J]. Arch Pharm Res, 2008, 31: 645-652.

[19] Cheol Hwangbo, Hyun Sun Lee, Juhee Park, et al.The anti-inflammatory effect of tussilagone, fromTussilagofarfara, is mediated by the induction of heme oxygenase-1 in murine macrophages [J]. International Immunopharmacology, 2009, 9(13): 1578-1584.

[20] 张秀昌，刘华，刘玉玉，等. 款冬花粗多糖体外诱导人白血病K562细胞的凋亡[J].中国组织工程研究与临床康复，2007，11(11)：2029-2031.

[21] 罗强，李迎春，任鸿，等. 款冬花多糖对肺腺癌A549细胞生长及凋亡的影响[J]. 河北北方学院学报：自然科学版，2013，29(4)：63-66.

[22] 余涛，宋逍，赵鹏，等. 款冬花多糖对荷瘤小鼠的抑瘤率及对白血病小鼠生存期的影响[J]. 中南药学，2014，12(2)：125-128.

[23] Li H, Lee H J, Ahn Y H, et al. Tussilagone suppresses colon cancer cell proliferation by promoting the degradation of β-catenin [J]. Biochem Biophys Res Commun, 2014, 443(1): 132-7.

[24] Lee Hyo-Jung, Cho Hyun-Soo, Jun Soo Young, et al.TussilagofarfaraL. augments TRAIL-induced apoptosis through MKK7/JNK activation by inhibition of MKK7-TIPRL in human hepatocellular carcinoma cells [J]. Oncology Reports, 2014, 32(3) :1117-1123.

[25] Zhao Jinlian, Evangelopoulos Dimitrios, Bhakta Sanjib, et al. Antitubercular activity of Arctium lappa andTussilagofarfaraextracts and constituents [J]. Journal of Ethnopharmacology, 2014, 155(1): 796-800.

[26] Cho J, Kim H M, Ryu J H, et al. Neuroprotective and antioxidant effects of the ethyl acetate fraction prepared fromTussilagofarfaraL. [J]. Biol Pharm Bull, 2005(3):455-60.

[27] Lim H J, Dong G Z, Lee H J, et al. In vitro neuroprotective activity of sesquiterpenoids from the flower buds ofTussilagofarfara[J]. J Enzyme Inhib Med Chem, 2014,29:1-5.

[28] 冯延琼，李爱平，支海娟. 款冬提取物对PICK1蛋白功能的影响[J]. 山西大学学报：自然科学版，2013，36(3)：455-459.

[29] Park H R, Yoo M Y, Seo J H, et al. Sesquiterpenoids isolated from the flower buds ofTussilagofarfaraL. inhibit diacylglycerol acyltransferase[J]. J Agric Food Chem. 2008，56(22):10493-7.

[30] Gao Hong, Huang Yina, Gao Bo, et al. a-Glucosidase inhibitory effect by the flower buds ofTussilagofarfaraL.[J]. Food Chemistry, 2008, 106: 1195-1201.

[31] Lukáš Hleba, Nenad Vukovic, Elena Horská, et al. Phenolic profile and antimicrobial activities to selected microorganisms of some wild medical plant from Slovakia [J]. Asian Pacific Journal of Tropical Disease, 2014, 4(4): 269-274.

[32] 张燕，黄芳，吴笛，等.款冬花及其所含生物碱对小鼠肝脏毒性作用的研究[J]. 时珍国医国药，2008，19(8)：1810-1811.

[33] Ellie J Y K, Chen Yuling, Johnson Q H, et al. Evidence-based toxicity evaluation and scheduling of Chinese herbal medicines [J]. Journal of Ethnopharmacology, 2013, 146(1):40-61.

Advances in the Chemical Constituents and Biological Activitiesof the Flower Buds ofTussilagofarfara

Wu Qizhen, Zhang Chaofeng, Xu Xianghong, Zhang Mian*

(Research Department of Pharmacognosy, China Pharmaceutical University, Nanjing 211198, China)

The flower buds ofTussilagofarfaraL. is one of traditional Chinese medicines for the treatment of cough, phlegm, bronchitic and asthmatic conditions. The recent researches were focused on sesquiterpene, phenolic acids and polysaccharide, which had various new pharmacological activities such as antineoplastic, antituberculotic and neuroprotection effects. This review devoted to illustrate the recent progresses on the chemical constituents and biological activities ofTussilagofarfara.

Tussilagofarfara; chemical constituents; biological activities

2014-07-19

吴琪珍(1990-)，女，在读硕士研究生。研究方向：中药活性成分与质量标准研究。E-mail：wuqizhen2012@163.com

*通讯作者：张勉(1962-)，女，博士生导师。研究方向：中药活性成分与质量标准研究。E-mail：mianzhang@126.com

10.3969/j.issn.1006-9690.2015.02.009

R284;R285

A

1006-9690(2015)02-0033-04