梅毒检测中TRUST和TPPA应用价值的分析

方 菲 柯方妮

（中山医科大学第一附属医院东山院区检验科，广东 广州 510080）

梅毒检测中TRUST和TPPA应用价值的分析

方 菲 柯方妮

（中山医科大学第一附属医院东山院区检验科，广东 广州 510080）

目的 对梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）检测的临床价值进行分析。方法 用TRUST和TPPA检测1221份血清标本，并对检测结果进行统计分析。结果 658份血清标本中，TRUST检出阳性45份（6.84%）。563份血清标本中TPPA检出阳性69份（12.26%）。二组之间阳性检出率有显著性差异（P＜0.005）。69份TPPA阳性血清标本中，用TRUST法检测，其中阳性的有21份（30.44%），经治疗后第一次复查TRUST仍为阳性者9份（13.04%），二次复查TRUST仍为阳性者2份（2.89%），失访10份（14.49%）。结论 TRUST法检测适用于梅毒筛查，随访疗效，判断复发或再次感染。TPPA法检测准确可靠，适用于确诊梅毒。二法联合应用是一种理想组合，对梅毒的诊断可以减少漏诊误诊，提高确诊率。对于梅毒的有效防治，监测随访有重大意义。

梅毒；梅毒螺旋体；TRUST；TPPA

梅毒是由梅毒螺旋体（treponema pallidum）引起的一种全身性损害的性病。其临床表现复杂呈多样性，病程长，危害大。近年来我国梅毒发患者数呈急剧性上升趋势。有报道指出［1］，在梅毒阳性检出者中，隐性梅毒数量最多，分布较广，增幅明显。梅毒阳性检出者几乎覆盖了所有的科室和所有的年龄段。梅毒检测是防治监测该病重要而有效手段之一。因此，有必要对门诊可疑患者和住院患者进行梅毒筛查。目前梅毒检测有多种方法。一类是检测非特异性抗体方法。如快速血浆反应素试验RPR（rapid plasma regain），不加热血清反应素试验USR（unheated serum regain），甲苯胺红不加热血清实验TRUST（toluidine red unheated serum test），性病研究实验室试验VDRL（renereal disease research laboratory test）等。另一类是检测特异性抗体方法。如梅毒螺旋体血球凝集试验TPHA（treponema pallidum hemagglutination assay），梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验TPPA（treponema pallidum particle agglutination assay），酶联免疫吸附试验ELISA（engyme linked immunosorbent assay）等。本文试以TRUST和TPPA组合联用，对检测结果进行分析，探讨其特异性、敏感性和互补性在临床合理应用中的价值。

1　材料与方法

1.1一般资料：收集2013年1至11月门诊住院患者血清标本5007份。其中男性1771份，女性3236份，年龄1～97岁。用化学发光法检测3786份，检出梅毒阳性76份，阳性检出率2.0%。用TRUST法检测658份，检出阳性45份，阳性检出率6.84%。用TPPA法检测563份，检出梅毒阳性69份，阳性检出率12.26%。

1.2试剂和仪器：TRUST检测采用上海荣盛生物技术有限公司试剂盒。TPPA检测采用日本富士瑞比欧株式会社试剂盒。

1.3检测方法。TRUST：将50 µL患者血清与1滴TRUST试剂混合，按每分钟100转摇动8 min，肉眼观察结果，可见红色凝聚物为阳性；TPPA：试剂中的致敏颗粒与患者血清中的梅毒螺旋体抗体（TP）进行反应发生凝集，由此可检测出TP抗体。

1.4统计方法：TRUST和TPPA阳性检出率用χ2检验分析。

2　结 果

TRUST和TPPA阳性检出率有显著性差异，有统计学意义。χ20.005（1）=7.88，χ2=10.51，P＜0.005。梅毒阳性检出者的性别、年龄段和科室分布无特殊可比性。69份TPPA阳性检出者，用TRUST作疗效随访检测，其中TRUST转阴者48份（69.56%），随访一次TRUST仍为阳性者9份（13.04%），随访二次TRUST均为阳性者2份（2.89%），失访10份（14.49%）。

3　讨 论

人体感染梅毒螺旋体后，发生一系列血清免疫学反应，产生并释放出两种抗体。一种是磷脂类物质，黏附在螺旋体上，形成新的复合抗原。此种抗原可刺激机体6周后产的抗磷脂类的自身免疫性抗体，即非特异性抗体，也称反应素。另一种是直接针对梅毒螺旋体特异抗原的梅毒特异性抗体，主要成分是IgM和IgG，大约在感染4周后形成。

TRUST试验用于检测反应素，是VDRL试验的一种改良方法。用炭颗料作为指示物，用特制的白纸卡替代玻璃反应板。所用的抗原是标准牛心肌脂抗原。血清不需要加热灭活，节省了操作时间。肉眼可观察试验结果，并可以保存。TRUST试验操作简单快捷。经治疗后患者的TRUST滴度随着病情好转而下降或因疗效不佳而反复。抗类脂质抗体效价的消长曲线与临床病情症状的变化相关性较好［2］。因此，用TRUST检测梅毒，不但可作为梅毒的筛查，还可以用于疗效的随访观察，判断复发或再次感染。TRUST试验比ELISA和TPPA有更长的检测观察窗口期。缺点是某些自身免疫性疾病也有磷脂类物质产生和消失，导致假阳性发生［3］。当一至三期梅毒患者治疗后，抗体随之变化。有时TRUST阳性检出率下降，又可以出现假阴性［4］。所以TRUST检测要用TPPA检测进行复核确诊。

TPPA试验用于检测梅毒特异性抗体。该试验是TPHA试验的改良方法，可取代TPHA。在梅毒血细胞凝集试验基础上，以明胶颗粒为载体，吸附TP-Nichols株菌体抗原，克服了血细胞易自溶而造成的漏检出弊端。TPPA检测结果的稳定性好，不易出现假阳性［5］。检测结果准确可靠，可作为临床标准化的确诊方法之一。已在国际上广泛使用。患者抗梅毒治疗后，梅毒抗原消失后很长时间内IgG仍可通过记忆细胞作用继续产生，甚至终身可在血清中检出TPPA持续阳性。TPPA滴度变化与病情变化不一致表明TPPA试验不能作为评价疗效或判断复发或次感染的指标。

ELISA是一种基于基因工程的特异性检测技术［6］。采用双抗原夹心法，同时检测梅毒IgM和IgG混合特异抗体。用基因重组工程技术，在体外表达得到了梅毒相应特异抗原，提高了ELISA检测的灵敏度和特异度。在梅毒潜伏期产生的特异性抗体可被检出。虽然对梅毒的早期诊断较好，但只能说明正在感染或曾经感染。ELISA成本低，效率高，操作简单，但阳性时不能判断梅毒的活动性程度，也有假阳性发生［7］。因而不能作为现症梅毒确诊指标，还须用TPPA检测作确诊。许多报告指出ELISA和TPPA二者相比较无统计学差异。二者均为高特异性，高敏感性的梅毒血清学诊断方法。

TPPA相对成本高，操作较复杂，耗时较长。但准确可靠，对早期梅毒检出率也高，优于ELISA，有较高的临床应用价值。本文认为TRUST和TPPA是理想的检测组合，二者的显著性差异由此得到取长补短。二者联用对梅毒的筛查，诊断准确可靠，同时达到跟踪疗效，判断复发或再次感染的多项目的。上述临床应用范围的复盖，对梅毒的有效防治，随访监测有很大的实用价值。

［1］王华，张洪为，李代渝，等.综合医院住院患者梅毒感染检出情况分析［J］.中华皮肤性病学杂志，2011，25（8）：618.

［2］王光超.皮肤性病学［M］.3版.北京：人民卫生出版社，1993：128.

［3］尹跃平.快速梅毒螺旋体抗体检测试验的实验室初步评价［J］.岭南皮肤性病杂志，2009，16（1）：11-14.

［4］林耀堂.3种梅毒血清学检测方法临床应用结果的比较［J］.中国伤残医学，2013，21（9）：301-302.

［5］程艳杰.梅毒螺旋体血清学检测方法的实验室评价［J］.中国皮肤性病学杂志，2005，19（8）：503-504.

［6］吴先玉.ELISA和TRUST两种方法检测梅毒结果分析［J］.中外医学研究，2009，7（9）：176-179.

［7］张建平.三种梅毒血清试验方法学评价［J］.现代检验医学杂志，2010，25（6）：14-15.

R759.1

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1671-8194（2015）012-0096-02