葛花降糖丸的质量标准研究

2015-01-24吴庆淼吴宛玲

中国医药指南 2015年27期

关键词：糖丸甲苷川芎

吴庆淼吴宛玲

（1 吉林省松原市食品药品检验所，吉林松原 138000；2 白求恩医科大学制药厂，吉林长春 131100）

葛花降糖丸的质量标准研究

吴庆淼1吴宛玲2

（1 吉林省松原市食品药品检验所，吉林松原 138000；2 白求恩医科大学制药厂，吉林长春 131100）

目的建立葛花降糖丸（川芎、黄连、黄芪等）的质量标准。方法采用TLC法鉴别处方中的川芎、黄连；用HPLC-ELSD法测定黄芪中黄芪甲苷的含量，色谱柱：菲罗门Luna C18（250 mm×4.6 mm，5 µm），流动相：乙腈-水（36∶64）；流速：1.0 mL/min；漂移管温度：105 ℃；载气流速：2.7 L/min。结果 TLC鉴别色谱特征斑点明显，黄芪甲苷在0.493～2.465 µg范围内呈线性关系，r=0.9997；平均回收率为98.7%（n=6），RSD=1.5%。结论所建立的TLC和HPLC-ELSD方法操作简便，结果准确，重复性好，可用于葛花降糖丸的质量控制。

葛花降糖丸；TLC；HPLC-ELSD；川芎；黄连；黄芪甲苷

葛花降糖丸原标准为吉林省食品药品监督管理局［1］医疗机构制剂标准，黄芪、金银花、丹参、川芎、黄连等17味中药组成，具有养阴益气，生津止渴，活血祛瘀，降糖补肾的功效。用于口干，烦渴，多饮，多尿，乏力，肢体酸软等糖尿病所致诸症。原标准为医疗机构制剂标准，只有一个显微鉴别项［2］。为了提高该制剂的生产质量，更好的进行生产监管，本文增加了TLC法对川芎、黄连定性鉴别，采用HPLC-ELSD法对制剂中黄芪甲苷的含量进行测定，更好的对产品质量进行控制。

1　试药与仪器

川芎对照药材（批号：120918-201110），黄连对照药材（批号：101512-200702），盐酸小檗碱（批号：110713-200911）黄芪甲苷对照品（批号：110781-200613），均购自中国药品生物制品检定所。LC-10AT型高效液相色谱仪，ALLTECH ELSD2000型蒸发光散射检测器。葛花降糖丸样品由前郭尔罗斯蒙古族自治县蒙医院（批号：130624、130626、130628）提供。

2　薄层鉴别

2.1川芎的薄层色谱鉴别：供试品溶液的制备为取本品6丸，研细，加乙醇25 mL，置水浴上加热回流60 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，即得。对照药材溶液的制备为取川芎对照药材1 g，按上述方法制成对照药材溶液。将对照药材溶液、三批供试品溶液、阴性对照溶液点于同一个硅胶G薄层板上，点样量为5 µL，展开剂使用醋酸乙酯：正己烷（1∶9）的混合液，展开，在紫外光灯（365 nm）下检视。结果在对照药材色谱中出现荧光斑点的位置上，三批供试品溶液都显相同颜色的荧光斑点，而阴性对照溶液色谱中无其他斑点干扰。

2.2黄连的薄层色谱鉴别：供试品溶液的制备为取本品5丸，研细，加甲醇25 mL，回流提取15 min，滤过后蒸干，残渣加甲醇1 mL，作为供试品溶液。对照药材溶液的制备为取黄连对照药材0.5 g，加甲醇50 mL，按上述方法制成对照药材溶液。取盐酸小檗碱对照品5 mg，置于10 mL容量瓶中，制成对照品溶液。将对照药材溶液、对照品溶液、三批供试品溶液、阴性对照溶液点于同一个硅胶G薄层板上，点样量为5 µL，展开剂使用甲苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-水（6∶3∶1.5∶1.5∶0.3）的混合液，置氨蒸气预饱和的层析缸内，展开，在紫外光灯（365 nm）下检视。结果在对照药材和对照品色谱中出现荧光斑点的位置上，三批供试品溶液都显相同颜色的荧光斑点，而阴性对照溶液色谱中无其他斑点干扰。

3　含量测定

3.1色谱条件与系统适用性试验：色谱柱菲罗门Luna C18，流动相：乙腈+水（36+64）；流速：1.0 mL/min；柱温：40 ℃；漂移管温度：105 ℃；载气流速：2.7 L/min［3］；理论板数以黄芪甲苷峰计算应不低于3000。

3.2对照品溶液的制备：精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成对照品溶液（每1 mL含黄芪甲苷0.1 mg）。

3.3供试品溶液的制备：取重量差异项下的已研细的药粉5 g，精密称定，置于索氏提取器中，加甲醇50 mL，放置过夜，再加适量甲醇，回流提取6 h，提取液蒸干后加水20 mL溶解，用水饱和的正丁醇萃取3次，每次10 mL，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次40 mL，弃去氨洗涤液，正丁醇层蒸干，残渣加水10 mL溶解，放冷后通过D101型大孔吸附树脂柱，先用水40 mL洗脱，弃去，再用40%乙醇30 mL洗脱，弃去，最后用70%乙醇100 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并定容至5 mL量瓶中，即得。

3.4线性：取对照品溶液（0.0986 mg/mL）5、10、15、20、25 µL依次测定，结果黄芪甲苷在0.493～2.465 µg范围内线性关系良好，标准曲线为：Y=1.953X+13.6（r=0.9997）。

3.5空白：空白阴性溶液未出现与黄芪甲苷对照品保留时间一致的色谱峰，即空白阴性溶液无干扰。

3.6稳定性：取本品（批号：130626），按本文方法制备，分别于0、2、4、8、12、24 h进行测定，结果RSD为1.5%。说明供试液具有良好的稳定性。

3.7精密度：吸供试液20 µL进行测定，重复进样6次，RSD为0.6%。

3.8重复性：取同批次样品6份按上述方法制备，进行测定，黄芪甲苷的平均含量为0.0907 mg/g，结果RSD为0.9%。

3.9回收率：称取样品（批号：130626，含量为 0.0907 mg/g）2.5 g，分别加入对照品0.2220 mg，按本文方法提取和测定，结果平均回收率为98.7%。RSD为1.5%。

3.10样品测定：以本文方法测得三批样品中黄芪甲苷含量为0.1011 mg/g（批号：130624）；0.0907 mg/g（批号：130626）；0.0935 mg/g（批号：130628）。