细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在人前列腺癌组织的表达及临床意义▲

黄俊波 庄晓波 郑跃东

(广东省揭西县人民医院泌尿外科，揭西县 515400，E-mail:306669335@qq．com)

随着人口老龄化和居民饮食结构变化，前列腺癌的发病率和死亡率逐年上升。恶性肿瘤的生物学特性多变，其生长和侵袭、转移是一个多因素、多步骤的复杂过程［1］。运用分子生物学技术对调控基因及其表达的蛋白进行检测，可更好地了解恶性肿瘤的生物学行为，并有助于寻找治疗的新靶点［2］。细胞外基质金属蛋白酶诱导因子CD147是新发现的肿瘤细胞膜相关抗原，在肿瘤侵袭和转移的多个关键环节扮演着重要角色［3］。但目前CD147在前列腺癌中作用的报告较少。本研究运用免疫组化方法检测CD147蛋白在人前列腺癌的表达情况，旨在探讨其在前列腺癌发生发展中的作用，现报告如下。

1 资料与方法

1．1 临床资料 2008年1月至2012年12月我院收治前列腺癌患者56例(前列腺癌组)，年龄(58．6±4．2)岁。同期在我院就诊良性前列腺增生患者56例(前列腺增生组)，年龄(56．9 ±5．4)岁，高分化8 例，中分化16例，低分化36例。两组均经病理确诊。排除合并严重脏器损伤者、严重精神性疾病者等。本研究经医学伦理委员会批准，两组患者或家属均知情同意。

1．2 主要试剂 CD147单克隆抗体(稀释浓度1∶50)、链霉菌抗生物素蛋白－过氧化酶试剂盒及二氨基联苯胺染色显色试剂盒均购自美国Sigma公司。

1．3 方法

1．3．1 收集临床资料及标本:记录前列腺癌组患者的详细临床资料，包括年龄、病理分级、临床分期、Gleason评分［4］、有无淋巴结转移、生存情况、分化程度等。Gleason评分＜5分为分化程度好;Gleason评分5～7分为分化程度中;Gleason评分＞7分为分化程度差或未分化。记录前列腺增生组的年龄、病情等。于我院病理科取两组患者的病灶石蜡标本，标本经10%甲醛固定，常规石蜡包埋，制作5 μm连续切片备用。

1．3．2 免疫组织化学染色:将组织蜡块制成厚约5 μm的切片，按照链霉菌抗生物素蛋白－过氧化酶试剂盒说明书严格操作。使用已知阳性切片作为阳性对照，磷酸盐缓冲液代替一抗作阴性对照。

1．3．3 结果判读:光镜(德国徕卡公司，DM1000型)下进行观察，阳性表达位于细胞质或细胞膜，出现浅黄色、黄色或棕黄色颗粒时为阳性反应，出现阳性反应的细胞即为阳性细胞。依据染色深浅与视野内阳性细胞所占比例评定阳性反应的强度。观察时每张切片选取5个高倍视野，每个视野计数100个细胞，按照观察视野中阳性细胞所占的百分比例进行评分:≤5%时为0分，5% ～25%为1分，25% ～50%为2分，50% ～75%为3分，＞75%为4分。按照染色强度进行评分:0分 为阴性，1分为弱阳性，2分为中等阳性，3分为强阳性。两者相乘得分≥3分时为阳性表达，＜3分时为阴性表达。

1．4 统计学分析 采用SPSS 20．0软件进行统计分析，计数资料的比较采用χ2检验，各病理特征与临床预后的关系采用Cox回归分析法，以P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 两组CD147表达情况比较 前列腺癌组CD147表达阳性率为100．0%(56/56)，明显高于前列腺增生组的 14．3%(8/56)(χ2=84．000，P ＜0．001)。

2．2 前列腺癌组CD147与临床病理参数间的关系

CD147的表达与Gleason评分、TNM分期、淋巴结转移具有明显关系(P＜0．05)，与患者的年龄和肿瘤分化程度无关(P ＞0．05)，见表1。

表1 前列腺癌组患者CD147与临床病理参数间的关系(n，%)

2．3 前列腺癌患者Cox回归模型多因素分析 对56例前列腺癌患者进行随访发现，1年时存活51例(91．1%)，2年时存活43例(76．8%)。CD147表达阳性、Gleason评分高是前列腺癌患者的预后差的危险因素(P＜0．05)，CD147阳性、Gleason评分高的患者，复发和死亡的风险大。见表2。

表2 Cox回归模型多因素分析结果

3 讨论

目前恶性肿瘤已成为我国居民首位死亡原因，肿瘤的浸润转移特性使其成为导致肿瘤患者死亡的主要原因和肿瘤临床治疗的主要困难。目前恶性肿瘤的发病机制及生物学行为成为生命科学中的研究热点［5］。

CD147是一种新发现的肿瘤细胞膜相关抗原，广泛表达于恶性肿瘤细胞表面［6］。肿瘤的侵袭及转移的关键环节，涉及细胞外基质和基底膜的降解、肿瘤血管的形成等［7］。在这过程中，基质金属蛋白酶(MMPs)几乎能降解细胞外基质和基底膜的所有成分，在肿瘤细胞的浸润与转移中发挥着重要作用［8］。血管内皮生长因子(VEGF)是迄今发现的最重要的血管生成促进因子，已被证实是肿瘤新生血管生成的主要调节因子。VEGF通过促进血管内皮细胞的有丝分裂，增加血管通透性等使血管内胶质外渗，为血管内皮细胞生长提供必需的基质，进而促进肿瘤血管形成，为肿瘤的增殖和转移提供条件［9］。有研究证明CD147具有刺激肿瘤细胞和间质细胞分泌和活化MMPs，介导肿瘤细胞之间、肿瘤细胞和基质细胞的相互作用;与MMPs在肿瘤细胞表面形成复合物，形成肿瘤细胞－细胞外基质金属蛋白酶类－基质成分构成的肿瘤侵袭和转移的局部微环境［10－12］。因此人们广泛认同CD147的表达与人体某些恶性肿瘤的恶性程度、侵袭能力和转移及预后密切相关。

本文结果显示，前列腺癌组CD147表达阳性率为100．0%，明显高于前列腺增生组的 14．3%(P ＜0．05)。表明前列腺癌组织中CD147表达率明显高于前列腺良性增生组织，这与相关文献［13］报告一致。本文结果显示，CD147的表达与前列腺癌Gleason评分、TNM分期、淋巴结转移显著相关(P＜0．05)，而与患者的年龄和肿瘤分化程度无关(P＞0．05)。Cox回归模型分析结果显示，CD147表达阳性、Gleason评分高是前列腺癌患者的预后危险因素(P＜0．05)，CD147阳性、Gleason评分高的患者，复发和死亡的风险大。Gleason评分是由病理科医生在显微镜下，通过对前列腺癌细胞进行形态学观察所建立的病理学评估方法，其结果受医生的主观因素影响较大［14］。相对而言，CD147的检测结果更为客观可靠。本组研究结果表明CD147异常表达是除Gleason评分外的可用来独立判断前列腺癌进展程度的临床指标，其表达上调可作为前列腺癌预后不良的危险信号。

综上所述，前列腺癌组织CD147的高表达在肿瘤的发生与发展中发挥着重要作用，可作为研究肿瘤发病机制、判断肿瘤进展及临床预后的有效分子标志。

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