痔炎冲洗灵散剂的质量标准研究

黄 芊，陈茹茹，袁倩倩，岳宝森，窦建卫＊（.西安交通大学药学院，西安 7006；.陕西中医学院，咸阳 7046；.西安市中医医院，西安 7000）

痔炎冲洗灵散剂的质量标准研究

黄 芊1，陈茹茹2，袁倩倩1，岳宝森3，窦建卫1＊（1.西安交通大学药学院，西安 710061；2.陕西中医学院，咸阳 712046；3.西安市中医医院，西安 710001）

目的 建立痔炎冲洗灵散剂的质量标准。方法 采用TLC法对痔炎冲洗灵中青黛、大黄进行定性鉴别，用HPLC法测定野菊花中蒙花苷的含量。结果 定性鉴别专属性好，阴性对照无干扰；蒙花苷含量在0.092 8～1.113 6μg范围内线性关系良好（r＝0.999 9）；平均回收率为99.6%RSD＝1.5%（n＝6）。结论 建立的分析方法准确、简便，可作为痔炎冲洗灵的质量控制方法。

痔炎冲洗灵散剂；质量标准；薄层色谱法；HPLC

痔炎冲洗灵散剂是西安市中医院院内制剂，由冰片、明矾、野菊花、青黛、生大黄等十味中药组成，具清热消肿、祛腐生肌、收湿杀虫、止血止痒的功效，用于肛门直肠的急慢性炎症，如：肛痛及血栓外痔初期，炎性外痔，肛裂肛瘘感染，内痔嵌顿，肛窦炎，湿疹，结、直肠炎（保留灌肠）等。该制剂为西安市中医医院肛肠科保守治疗的主要药物之一，临床使用疗效显著、可靠，深受广大医生、患者好评。为有效控制药品的质量，保证临床用药安全，本实验采用薄层色谱法对青黛、大黄进行薄层鉴别；采用HPLC法对野菊花中的有效成分蒙花苷进行含量测定。本法操作简便，重复性好，测定结果准确可靠，可作为本制剂的质量控制方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器 高效液相色谱仪（日本岛津LC－20A高效液相色谱仪）；N2010色谱工作站（浙江大学色谱信息研究所）；C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm，江苏汉邦公司生产）；YP1201N型分析天平（上海天平仪器厂）；超声波清洗机（昆山市超声仪器有限公司）；FA1104型0.1mg微量分析天平（上海天平仪器厂）。

1.2 试药 蒙花苷对照品（批号111528－200504，中国药品生物制品检定所）；大黄对照药材（批号121249－200402，中国药品生物制品检定所）；青黛对照药材（批号121170－200001，中国药品生物制品检定所）；痔炎冲洗灵由西安市中医医院制剂室提供；甲醇为色谱纯；其余均为分析纯。

2 薄层色谱鉴别

2.1 大黄 取本品5g，放入30mL甲醇中浸泡1 h，滤过，滤液蒸干，剩余残渣溶解于10mL水中，加盐酸1mL，加热回流30min，立即冷却，用乙醚提取2次，每次20mL，合并乙醚液，蒸干，残渣溶解于1 mL三氯甲烷中，作为供试品溶液。取大黄对照药材1g，放入30mL甲醇中浸泡1h，滤过，滤液蒸干，剩余残渣溶解于10mL水中，加盐酸1mL，加热回流30min，立即冷却，用乙醚提取2次，每次20mL，合并乙醚液，蒸干，残渣溶解于1mL三氯甲烷中，制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）实验，将上述溶液各吸取6μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，制备石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15∶5∶1）的上层溶液为展开剂，将点有供试品溶液及对照药材溶液的薄层板放入展开缸中，展开，取出，晾干，置于紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰［1］。

2.2 青黛 取本品5g，加三氯甲烷30mL，超声处理（功率240W，频率50Hz）20min，滤过，滤液作为供试品溶液。取青黛对照药材1g，加三氯甲烷30 mL，超声处理（功率240W，频率50Hz）20min，滤过的滤液制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）实验，将上述溶液各吸取10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，制备苯－三氯甲烷－丙酮（5∶4∶1）为展开剂，将点有供试品溶液及对照药材溶液的薄层板放入展开缸中，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。

3 含量测定

3.1 色谱条件与系统适用性实验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇－5mL·L－1醋酸溶液（50∶50）［2］为流动相；检测波长326nm。理论板数按蒙花苷峰计算应不低于1 500。

3.2 对照品溶液的制备 取蒙花苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。

3.3 供试品溶液的制备 取本品约10g，精密称定，置于100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定质量，加热回流3h，放冷至室温，称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3.4 专属性实验 精密吸取蒙花苷对照品溶液5 μL、痔炎冲洗灵供试品溶液5μL、缺野菊花药材的阴性对照溶液5μL，注入高效液相色谱仪，按3.1项下色谱条件进行测定。结果，在供试品溶液中，蒙花苷峰与其他色谱峰达到分离，阴性对照溶液在与蒙花苷对照品相同的位置上并未出现色谱峰，表明本品中其他成分对蒙花苷测定无干扰。

图1 HPLC图A.对照品；B.供试品；C.阴性对照品；1.蒙花苷Fig.1 HPLC chromatogramsA.reference substance；B.sample；C.negative sample；1.buddleoside

3.5 标准曲线及线性范围 取蒙花苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含蒙花苷0.371 2mg的溶液作为蒙花苷储备溶液，精密量取储备溶液适量，加甲醇稀释制成蒙花苷质量浓度分别为0.018 56，0.037 12，0.074 24，0.111 36，0.148 48，0.185 60和0.222 72mg·mL－1的溶液，将以上溶液分别进样5μL，采集数据。以蒙花苷各进样量值作为横坐标（X），以峰面积积分值作为纵坐标（Y），得回归方程：Y＝2 124 989.08 X－12 725.29，r＝0.999 9。表明蒙花苷在0.092 8～1.113 6μg范围内线性关系良好。

3.6 精密度实验 精密吸取蒙花苷对照品溶液和供试品溶液各5μL，分别重复进样5次，计算出RSD值分别为1.12%和1.32%，表明仪器精密度良好。

3.7 稳定性实验 精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μL，每隔一定时间测定1次（0，2，4，6，12和24h），结果对照品溶液和供试品溶液在24h内稳定性良好，RSD值分别为0.84%和1.54%。

3.8 重复性实验 取6份批号为20131101的样品，按照供试品溶液制备项下的方法制备供试品溶液，精密吸取对照品和供试品溶液各5μL进样，测定，计算样品中蒙花苷的含量，测得蒙花苷的平均含量为15.52 mg·袋－1，RSD为0.98%，表明本品重复性良好。

3.9 加样回收实验 取批号为20131101的样品6份，每份约5g，依次加入对照品2.65mg，按照供试品溶液制备项下的方法制备供试品溶液，计算回收率，结果见表1。

表1 加样回收率实验结果Tab.1 The results of recovery test （n＝6）

3.10 样品测定 按上述方法对3批样品进行含量测定，结果分别为15.95，15.57和15.67mg·袋－1，结合《中国药典》（2010年版一部）野菊花药材项下蒙花苷的含量限度规定（含蒙花苷不得少于0.8%）及其他因素，暂定本品每袋含蒙花苷不得少于10mg。

4 讨论

痔炎冲洗灵散剂是复方制剂，含药物多，成分复杂，质量标准控制指标成为质控中的难点，因此我们对其进行质量标准的研究。对痔炎冲洗灵中十味药物进行筛选，结果：青黛、大黄的薄层鉴别，在与对照药材相应的位置上有相同的斑点，阴性对照无干扰，方法具有专一性。采用高效液相色谱法测定制剂中蒙花苷的含量［3－5］，分离度好，精密度高，重复性好，阴性无干扰。通过对痔炎冲洗灵中物质定性鉴别、含量测定及方法学考察的研究表明，此方法准确，重复性好，可作为本品质量标准控制的依据。

［1］国家药典委员会.中国药典2010年版［S］.一部.北京：中国医药科技出版社，2010：283－284.

［2］黄杰芳.复方感冒灵片中蒙花苷的含量测定研究［J］.海峡药学，2012，24（11）：71－72.

［3］贺建春，冼少华，张远强，等.HPLC法测定鼻炎康片中间产品干浸膏粉中蒙花苷的含量［J］.西北药学杂志，2010，25（4）：258－259.

［4］高超.HPLC法测定夏桑菊颗粒中蒙花苷的含量［J］.中国当代医药，2013，20（3）：64－65.

［5］唐维宏，韦建华，马云婷.HPLC测定密蒙花配方颗粒中蒙花苷含量［J］.中国实验方剂学杂志，2013，19（20）：50－51.

Study on the quality standard of Zhiyanchongxiling Powder

HUANG Qian1，CHEN Ruru2，YUAN Qianqian1，YUE Baosen3，DOU Jianwei1＊（1.School of Pharmacy，Xi′an Jiaotong University，Xi′an 710061，China；2.Shaanxi University of Chinese Medicine，Xianyang 712046，China；3.Xi′an Traditional Chinese Medi－cine Hospital，Xi′an 710001，China）

Objective To establish the quality standard for Zhiyanchongxiling Powder.Method Indigo Naturalis and Rhubarb in the prescription were identified by TLC.Quantative analysis of buddleoside which is an effective component of the formula was adopted by HPLC.Results The TLC of Indigo Naturals and Rhubarb showed good specificity and no negative interference was observed.The calibration curve of buddleoside was in good linearity over the range of 0.092 8－1.113 6μg（r＝0.999 9）and the average recovery was 99.6%（RSD＝1.5%，n＝6）.Conclusion The method is simple，sensitive and accurate，and could be used for the quality control of Zhiyanchongxiling Powder.

Zhiyanchongxiling Powder；quality standard；TLC；HPLC

10.3969／j.issn.1004－2407.2015.04.010

R282

A

1004－2407（2015）04－0361－03

2014－09－10）

黄芊，女，中药师，在读硕士研究生

＊通信作者：窦建卫，男，博士，副教授