血浆Lp-PLA2及YKL-40浓度与冠状动脉病变程度的相关性分析

侯卫涛，高东来，彭跃华，周 俐

血浆Lp-PLA2及YKL-40浓度与冠状动脉病变程度的相关性分析

侯卫涛1，高东来2，彭跃华1，周 俐1

目的 探讨血浆脂蛋白相关磷脂酶A2(LP-PLA2)及几丁质酶-3样蛋白-1(YKL-40)浓度与冠状动脉病变严重程度的相关性。方法 选取2010年12月—2014年6月因胸痛在焦作煤业集团中央医院及山西医科大学第二医院心内科住院并接受冠状动脉造影术(CAG)患者230例。将CAG显示为非冠心病者设为对照组共76例，稳定型心绞痛组68例，急性冠脉综合征组86例。采用Gensini评分系统评定冠脉病变程度，同时测定3组患者LP-PLA2及血清YKL-40浓度变化，评估冠脉病变严重程度与血浆LP-PLA2及YKL-40水平的相关性。结果 稳定型心绞痛组、急性冠脉综合征组Lp-PLA2及YKL-40水平明显高于非冠心病组(P<0.05)，急性冠脉综合征组Lp-PLA2及YKL-40水平明显高于稳定型心绞痛组，差异有统计学意义(P<0.05)。将病变支数相同的患者合并，结果显示：随着病变支数增加，LP-PLA2及YKL-40水平逐步升高，差异有统计学意义(P<0.05)；随着Gensini积分增加，Lp-PLA2及YKL-40水平逐步升高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LP-PLA2及YKL-40的水平与冠脉病变严重程度及斑块不稳定性相关，可以作为预测冠心病危险程度的重要指标。

冠状动脉病变程度；脂蛋白相关磷脂酶A2；几丁质酶-3样蛋白-1

冠心病是当今严重危害人类健康、影响人们生活质量的最常见心血管疾病之一。目前许多的证据表明[1]，局部和全身的炎症在冠心病动脉硬化及其并发症的发生和发展中起重要作用。脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)及几丁质酶-3样蛋白-1(YKL-40)作为新近研究的炎症介质，具有促进动脉粥样硬化的作用，与心血管事件的发生有密切相关，可能成为冠心病发病的独立危险因素。因而控制血浆Lp-PLA2及YKL-40活性及含量可能成为冠心病治疗的潜在目标靶点。本研究入选不同类型冠心病及对照组的患者，对其进行选择性冠状动脉造影(CAG)，测定不同组别之间血浆中Lp-PLA2及YKL-40的水平，以探讨Lp-PLA2及YKL-40与冠状动脉病变严重程度的关系。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取2010年12月—2014年6月因胸痛在焦作煤业集团中央医院及山西医科大学第二医院心内科住院并接受冠状动脉造影术患者230例，其中男129例，女101例，年龄36岁～82岁(60.1岁±10.3岁)。将造影显示为非冠心病者设为对照组共76例，稳定型心绞痛组68例，急性冠脉综合征组86例。所有患者均详细询问病史、体格检查、行相关化验、检查等。CAG术前均测定血清Lp-PLA2、YKL-40。本研究经焦作煤业集团中央医院及山西医科大学第二医院伦理委员会批准，入选患者均签署知情同意书。

1.2 排除标准 血液系统疾病，急慢性感染性疾病，甲状腺疾病，急慢性肝肾功能不全，自身免疫性疾病，恶性肿瘤及心功能不全、心脏瓣膜病等。

1.3 方法

1.3.1 Lp-PLA2水平测定 冠状动脉造影当天清晨空腹采集肘静脉血5 mL，肝素抗凝，静置后以2 500 r/min离心10 min，取上层血浆置于-80 ℃冰冻保存待测。在1个月内测定各项指标。测定当日于37 ℃水浴中迅速复融。所有样本一次性成批检测，试剂盒由南京诺尔曼公司提供。操作过程严格按照说明书要求。

1.3.2 YKL-40水平测定 冠状动脉造影当天清晨空腹采集肘静脉血5 mL，室温静置30 min，离心分离血清，并置于-80 ℃冰箱保存，所有样本一次性成批检测。YKL-40测定采用酶联免疫吸附测试法(ELISA)，试剂盒由上海基尔顿生物科技有限公司提供。操作过程严格按照说明书要求。

1.3.3 冠状动脉造影及冠状动脉狭窄程度的评价 所有入选对象均采用Judkins法进行选择性冠状动脉造

影，多角度、多体位投照。由2名经验丰富的医生共同判读造影结果。参照1984年美国心脏病学会/美国心脏病协会(ACC/AHA)冠状动脉造影指南和Gensini积分评估系统，采用两种方式评估，①冠脉病变支数：当病变管腔狭窄≥50%时为冠心病，累及左前降支、左回旋支、右冠脉各记为1支，累及左主干记为2支。②Gensini积分法：将冠脉分段，根据病变血管的不同节段和血管病变不同程度制定不同的权重系数，评分方法为冠脉狭窄程度权重系数乘以各病变血管的权重系数，最后评分为各分支评分之和。

2 结 果

2.1 3组患者一般资料比较(见表1) 3组在年龄、吸烟、饮酒、血脂、体重指数、糖尿病发病率方面差异无统计学意义(P>0.05)。详见表1。

表1 3组患者一般资料对比情况

2.2 Lp-PLA2及YKL-40水平与冠脉病变支数关系 稳定型心绞痛组、急性冠脉综合征组的Lp-PLA2及YKL-40水平明显高于非冠心病组(P<0.05)，急性冠脉综合征组Lp-PLA2及YKL-40水平明显高于稳定型心绞痛组(P<0.05)。将病变支数相同的3组患者合并后结果显示：随着病变支数增加，Lp-PLA2及YKL-40水平逐步升高，差异有统计学意义(P<0.05)。Lp-PLA2及YKL-40水平与冠脉狭窄程度评估：随着Gensini积分增加，Lp-PLA2及YKL-40水平逐步升高，差异有统计学意义(P<0.05)。详见表2。

表2 LP-PLA2及YKL-40浓度与冠脉病变支数的关系(±s)

2.3 冠心病危险因素Logistic回归分析 以冠心病(无=0，有=1)为应变量，以性别、年龄、高血压(无=0，有=1)、糖尿病(无=0，有=1)、抽烟(无=0，有=1)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白(a)[LP(a)]、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、Lp-PLA2为自变量，进行Logistic回归分析，结果显示：Lp-PLA2、YKL-40、吸烟与LDL-C与冠心病独立相关；性别、TC等其他指标与冠心病无明显相关。详见表3。

表3 冠脉病变严重程度的Logistic逐步回归分析结果

2.3 冠状动脉积分(Gensini积分)危险因素的多元逐步回归分析 以Gensini积分为应变量，以年龄、吸烟、体重指数、TC、TG、HDL-C、LDL-C、血浆Lp-PLA2及YKL-40为自变量进行多元逐步回归分析，采用逐步筛选法引入方程，最终保留在方程中的变量为LDL-C、Lp-PLA2、YKL-40上述3个变量与Gensini积分独立相关。详见表4。

表4 冠心病患者Gensini积分危险因素的多元逐步回归分析

3 讨 论

动脉粥样硬化是冠心病形成和进展的基础，炎症反应尤其是血管内的炎症反应参与了动脉粥样硬化的发生、发展和斑块的破裂以及继发的心血管事件过程。但是现有的检测手段不能快速有效地检测血管内的炎症反应情况，从而在早期评估发生心血管事件的风险，以便于尽早干预，减少恶性心血管事件的发生。因此，发现能对心血管事件预测的灵敏炎症标记物成为目前研究的重点。而Lp-PLA2及YKL-40是近年来发现的新型炎症标志物，国外诸多研究显示，Lp-PLA2及YKL-40独立于传统危险因子及炎症标志物，可以动态反映血管内的炎症反应，从而用于预测冠心病患者远期发生心血管事件的风险[2]。

Fan等[3]及Eva Motyková等[4]研究显示，Lp-PLA2及YKL-40由局部活化的巨噬细胞和中性粒细胞在炎性环境下分泌、释放，因此Lp-PLA2及YKL-40多存在于巨噬细胞高聚集区，特别是在病灶深处。因此，较之全身炎症标志物C反应蛋白等，局部分泌的Lp-PLA2及YKL-40更具特异性。研究显示[5]，巨噬细胞在薄纤维粥样斑块帽和破裂斑块中更显著，提示Lp-PLA2及YKL-40在易损斑块和破裂斑块的坏死核心区及周围巨噬细胞中存在强表达，推测Lp-PLA2及YKL-40有潜在的促进斑块不稳定的作用。动脉粥样硬化研究显示，Lp-PLA2及YKL-40是炎症组织局部巨噬细胞激活的特异性血清学指标[6]。

本研究结果显示，稳定型心绞痛组、急性冠脉综合征组Lp-PLA2及YKL-40水平明显高于非冠心病组，急性冠脉综合征组Lp-PLA2及YKL-40水平明显高于稳定型心绞痛组，且随着冠脉积分的增加及冠脉病变血管数目的增多，血中Lp-PLA2及YKL-40浓度明显增加，多因素分析表明，冠心病及冠脉积分与吸烟、LDL-C、Lp-PLA2及YKL-40独立相关。说明Lp-PLA2及YKL-40活性不仅与冠脉病变的稳定性有关，且与冠脉病变严重程度明显相关。因此，Lp-PLA2及YKL-40不只是冠心病急性阶段的炎性标志物，而且直接参与了致动脉粥样硬化作用。这与Predersen等[7]的研究相一致。

Lp-PLA2及YKL-40促进粥样斑块形成及加速斑块不稳定可能机制：吸烟、糖尿病、高血脂、血压变异性大等因素可促使巨噬细胞和淋巴细胞合成并分泌Lp-PLA2及YKL-40，Lp-PLA2及YKL-40产生增加和活性增高后，诱导产生、活化炎症介质，活化的炎性介质促进单核细胞从管腔衍化为巨噬细胞，巨噬细胞吞噬氧化型低密度脂蛋白变成脂质泡沫细胞，泡沫细胞增多诱导或加剧炎性反应，导致产生更多Lp-PLA2及YKL-40，Lp-PLA2及YKL-40表达上调，使局部炎性反应加强，从而加重内皮的损伤，受损的内皮细胞保护性机制破坏，为进一步加强局部炎症反应及促进新斑块形成创造了条件；活化的炎性介质可直接刺激Lp-PLA2及YKL-40表达上调，使血管内皮细胞重塑、增殖，促进血管平滑肌的增生和向内膜迁移，促进形成新生小血管，导致血管壁粥样斑块不稳定且进展迅速，进而诱发心血管事件发生；同时Lp-PLA2及YKL-40介导的细胞因子可引起斑块表达基质金属蛋白酶，基质金属蛋白酶降解纤维帽的平滑肌细胞和胶原基质，使纤维帽变薄，斑块变得脆弱，导致斑块在血流冲刷下破裂，诱发心血管事件。总之，Lp-PLA2及YKL-40之间相互联系、相互促进，形成了一个由Lp-PLA2介导、YKL-40参与放大的炎症信号传导通路，形成促炎物质的持续正调节，从而促进了粥样斑块的进展及不稳定型增加，导致斑块破裂、血栓形成和不良心血管事件的发生。

本研究结果显示，Lp-PLA2及YKL-40活性不仅与斑块稳定性有关，并且也与冠心病的严重程度相关。Winkler等研究也显示，Lp-PLA2及YKL-40活性和冠心病的严重程度有相关性，且Lp-PLA2及YKL-40活性升高对冠心病危险的预示独立与其他确定的危险因素之外，尤其独立于LDL-C，是冠心病新的独立危险因子[8]。因此检测血浆中Lp-PLA2及YKL-40水平不仅可以用来识别高危个体，也可以预测冠心病发生的风险。

综上所述，Lp-PLA2及YKL-40水平在冠心病患者冠脉斑块的发生、发展中起重要作用，与冠心病密切相关。但因本试验样本数量较少，因此，需要更大的样本量来深入研究两者与冠心病的关系。Lp-PLA2及YKL-40将为冠心病的预防及治疗开辟新的途径。

[1] 任丽珏，王云枝.脂蛋白相关磷脂酶A2和YKL-40在2型糖尿病及其大血管病变发病中的意义[J].医学综述，2014，20(11)：2023-2025.

[2] Abulajiang M，Boulanger M，Husseini DE，et al．Increased expression of LP-PLA2in aortic stenosis is associated with mineralization and tissue remodelling[J].Canadian Journal of Cardiology，2013，29(10)：s270.

[3] Fan JT，Si XH，Liao Y，et al.The diagnostic and prognostic value of serum YKL-40 in endometrial cancer[J].Arch Gynecol Obstet，2013，287(1)：111-115.

[4] Eva Motyková，Lukš Zlatohlávek，Martina Prusíková，et al．LP-PLA2：a new marker of cardiovascular risk[J].European Journal of Internal Medicine，2011，22(1)：S100

[5] Hyun MK，Chang HJ，Bong SC，et al．Association between coronary heart disease and inflammatory biomarker YKL-40 in type 2 diabetes subjects[J].Journal of Cardiac Failure，2012，18(8)：s16-s17.

[6] Du YM，Wei FT，Dong ZQ，et al．Prognostic value of serum LP-PLA2and hs-CRP in unstable atherosclerotic plaques[J].Clinical and Experimental Hypertension，2011，33(2)：113-116.

[7] Pedersen MW，Koenig W，Christensen JH，et al．The effect of marine n-3 fatty acids in different doses on plasma concentrations of Lp-PLA2in healthy adults[J].European Journal of Nutrition，2009，48(1)：1-5.

[8] Juan PC，Ewa Ninio，Andrie Panayiotou，et al．PLA2G7 genotype，lipoprotein- associated phospholipase A2 activity，and coronary heart disease risk in 10 494 cases and 15 624 controls of European ancestry[J].Circulation，2012，121(21)：2284-2293.

(本文编辑 郭怀印)

1.焦作煤业集团中央医院(河南焦作 454000)；2.山西医科大学第二医院

高东来，E-mail：houwthappy@126.com

R541.4 R256.2

B

10．3969/j．issn．1672-1349．2015．16．019

1672-1349(2015)16-1869-04

2015-03-02)