幽门螺杆菌感染对颈动脉粥样硬化患者血清同型半胱氨酸水平的影响

雷鸣，白驹，吴建华，夏丹妮，郑睿东

(1.常德市第一人民医院检验科，湖南常德415003; 2.常德市妇幼保健医院检验科，湖南常德415003)

幽门螺杆菌感染对颈动脉粥样硬化患者血清同型半胱氨酸水平的影响

雷鸣1，白驹2，吴建华1，夏丹妮1，郑睿东2

(1.常德市第一人民医院检验科，湖南常德415003; 2.常德市妇幼保健医院检验科，湖南常德415003)

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染对颈动脉粥样硬化患者颈动脉内膜中层厚度(CIMT)、斑块易损性以及同型半胱氨酸(Hcy)代谢的影响。方法选取行颈动脉彩超提示颈动脉粥样硬化的知情同意者129例，采用14C尿素呼气试验检测入选对象的Hp感染情况，同时采用循环酶法测定其血清Hcy水平。结果颈动脉粥样硬化患者中Hp感染者血清Hcy水平和CIMT高于Hp阴性者(P均＜0.01)，且随着患者体内Hp感染程度的加重，其血清Hcy水平及CIMT亦相应增高(P均＜0.01)。Hp不同感染程度各组血清Hcy水平及CIMT差异均有统计学意义(P＜0.01)。Hp感染组斑块检出率高于Hp阴性组(P＜0.05)，且Hp感染组易损斑块的发生率明显高于Hp阴性组(P＜0.05)。Logistic回归分析显示，在斑块性颈动脉粥样硬化患者中，Hp感染者并发易损斑块可能性是Hp阴性者的2.35倍;血清Hcy每升高1 μmol/L，发生易损斑块的可能性增加9%。结论Hp感染可能通过影响Hcy代谢以及增加CIMT和颈动脉硬化斑块的不稳定性，促进动脉粥样硬化的发生和进展。

同型半胱氨酸;幽门螺杆菌;颈动脉粥样硬化;颈动脉斑块;内中膜厚度

近期多项研究［1-3］表明，幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)感染可能是动脉粥样硬化的一个重要危险因素。幽门螺杆菌感染后通过炎性反应、氧化应激、免疫反应以及使脂肪代谢紊乱等多途径引起动脉粥样硬化相关因子增高，诱导血管内皮细胞损伤，促进动脉粥样硬化的发生、发展。同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)是蛋氨酸循环的中间产物，主要生理作用是为体内DNA、蛋白质以及磷脂等多种重要生理活性物质提供甲基［4］。当体内Hcy浓度过高时，可通过多种途径损伤血管内皮细胞，刺激血管平滑肌细胞异常增殖和迁移，同时破坏机体凝血和纤溶的平衡，从而启动及加速动脉粥样硬化的形成和发展［5-6］。我们拟通过观察Hp感染合并颈动脉粥样硬化患者血清Hcy水平的变化，探讨Hp感染对颈动脉粥样硬化患者颈动脉内中膜厚度(carotid intima-media thickness，CIMT)、斑块稳定性以及Hcy代谢的影响。

材料和方法

一、对象

选取2013年3月至2013年11月在常德市第一人民医院行颈动脉彩超提示颈动脉粥样硬化的知情同意者129例，其中男73例，女56例，平均年龄(65±17)岁。入选病例均排除肿瘤、免疫性疾病、消化道疾病、肝肾疾病、近4周内无感染和服用过抗生素且半年之内未服用维生素、叶酸等影响血清Hcy浓度的药物。

二、实验分组

所有受试者均采用14C尿素呼气试验检测Hp感染情况，参照试剂盒说明书标准测定数判断Hp的感染程度。以每分钟衰变数(disintegration per minute，dpm)＜50 dpm者纳入Hp阴性组(58例)，dpm为51～300 dpm者纳入轻度感染组(52例)，dpm＞300 dpm者纳入重度感染组(19例)。斑块回声分为4型:(1)低回声软斑，含脂质成分多; (2)中等回声纤维性斑块(扁平斑)，含胶原蛋白成分多;(3)强回声硬斑，斑块内有钙化;(4)非均质回声，多呈火山口样的溃疡性混合型斑块。其中(1)、(4)是易损斑块，(2)、(3)是非易损斑块。对于同时具有2类斑块统计时都列入易损斑块组。上述各组在性别构成、年龄、体重方面差异均无统计学意义(P＞0.05)。

三、诊断标准

采用GE Logic E9彩色超声诊断系统检测所有研究对象双侧颈动脉。颈动脉粥样硬化诊断标准［7］:1.0 mm＜CIMT＜1.5 mm为颈动脉IMT增厚，≥1.5 mm为斑块形成，CIMT增厚和斑块形成诊断为颈动脉粥样硬化。体重指数(body mass index，BMI)=体重(kg)/身高(m)2。肥胖的诊断标准参照2001年《中国成年人超重肥胖症预防控制指南》［8］:24 kg/m2＜BMI＜28 kg/m2为超重，BMI≥28.0 kg/m2为肥胖;血脂异常诊断标准参照2007年《中国成人血脂异常防治指南》［9］:(1)血清总胆固醇(total cholesterol，TC)升高:TC≥6.22 mmol/L; (2)低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C)升高:LDL-C≥4.14 mmol/L; (3)高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C)降低:HDL-C＜1.04 mmol/L; (4)甘油三酯(triglyceride，TG)升高:TG＞2.26 mmol/L。将满足上述任意1项或目前服用降脂药物将血脂控制在正常范围者定义为血脂异常患者。

四、检测方法

采用14C尿素呼气试验检测HP感染情况，呼气试验药盒及HUBT-01A型呼气试验检测仪为深圳市中核海得威生物科技有限公司生产，严格按照说明书操作步骤进行;血清Hcy在罗氏Modular DPP全自动生化分析仪上进行检测，试剂盒(循环酶法)由上海科华生物工程股份有限公司提供。

五、统计学方法

结果

一、Hp感染组和Hp阴性组基本资料比较

2个组性别构成、年龄、高血压、吸烟、肥胖、糖尿病、血脂异常的分布情况见表1。统计学分析显示2个组之间性别、年龄以及上述传统高危因素差异均无统计学意义(P＞0.05)，排除了年龄、高血压等已知的高危因素对研究结果的影响。

二、颈动脉粥样硬化患者Hp感染严重程度与血清Hcy水平及CIMT的关系

颈动脉粥样硬化患者中Hp感染者血清Hcy水平和CIMT高于Hp阴性者(P均＜0.01)，且随着患者体内Hp感染程度的加重，其血清Hcy水平及CIMT亦相应增高(P＜0.01)。3组之间两两比较，除Hp重度感染组和Hp轻度感染组之间CIMT差异无统计学意义(P＞0.05)外;其余各组之间两两比较，血清Hcy水平及CIMT差异均有统计学意义(P均＜0.01)。见表2。

表1 Hp感染组和Hp阴性组一般情况与传统高危因素的分布

三、颈动脉粥样硬化患者Hp感染组与Hp阴性组斑块检出情况及斑块类型比较

Hp感染组斑块检出率高于Hp阴性组(χ2= 3.283，P=0.035);Hp感染组易损斑块的发生率明显高于Hp阴性组(χ2=2.716，P=0.049)。见表3。

四、颈动脉粥样硬化患者中易损斑块组与非易损斑块组血清Hcy水平的比较

颈动脉粥样硬化患者中易损斑块组血清Hcy水平高于非易损斑块组(P＜0.01)，见表4。

表2 不同程度Hp感染者血清Hcy水平及CIMT的分析(±s)

表2 不同程度Hp感染者血清Hcy水平及CIMT的分析(±s)

组别例数Hcy(μmol/L)CIMT(mm) Hp阴性组58 16.55±5.86 0.95±0.23 Hp轻度感染组52 24.96±5.97 1.16±0.22 Hp重度感染组19 30.27±6.21 1.28±0.25 F值49.02 19.75 P值＜0.01＜0.01

表3 Hp感染组与Hp阴性组斑块检出情况及斑块类型比较［例(%)］

表4 易损斑块组与非易损斑块组血清Hcy水平的比较(±s，μmol/L)

表4 易损斑块组与非易损斑块组血清Hcy水平的比较(±s，μmol/L)

注:与易损斑块组比较，*P＜0.01

组别例数Hcy易损斑块组35 25.98±6.35非易损斑块组45 22.19±6.22*

五、斑块性颈动脉粥样硬化患者发生易损斑块影响因素的Logistic回归分析

以年龄、性别、空腹血糖、吸烟、肥胖、Hp感染状况和血清Hcy水平作为自变量，是否为易损斑块为因变量做Logistic回归分析，采用stepwise法进行变量的筛选。分析结果显示Hp感染和血清Hcy水平均为斑块性颈动脉粥样硬化患者发生易损斑块的影响因素。在斑块性颈动脉粥样硬化患者中，Hp感染者并发易损斑块可能性是Hp阴性者的2.35倍［比值比(OR)=2.35，95%可信区间(CI)=1.68～3.28］，血清Hcy每提高1 μmol/L，发生易损斑块的可能性增加9%，见表5。

表5 斑块性颈动脉粥样硬化患者发生易损斑块影响因素的Logistic回归分析

讨论

血清流行病学研究表明，Hp感染与颈动脉粥样硬化形成有关。Hp感染后通过浸润在巨噬细胞中到达动脉壁，引起动脉血管壁炎性反应，并导致动脉内膜持续受损，从而促进动脉粥样硬化的发生、发展。多数学者认为CIMT增厚是动脉粥样硬化的早期表现，颈动脉斑块形成是颈动脉粥样硬化的可靠依据。目前，动脉内中膜厚度(intima-media thickness，IMT)已成为1个无创的动脉硬化的预测指标。欧洲高血压组织和美国心脏协会推荐使用IMT进行心血管风险评估［10］。本研究结果显示，颈动脉粥样硬化患者Hp感染组CIMT高于Hp阴性组，且随着患者体内Hp感染程度的加重，其CIMT亦相应增高。不同Hp感染程度各组CIMT差异均有统计学意义(P均＜0.01)，提示Hp感染可能使CIMT增加，与AKBAS等［11］的研究结果一致。斑块的发生迟于CIMT的改变，是动脉粥样硬化程度进一步发展的表现［12］。国外曾有文献报道［13］，Hp感染可加重原本存在的动脉硬化斑块，导致斑块增大，斑块稳定性降低，并促使斑块破裂。本研究结果同时表明，Hp感染组斑块检出率高于Hp阴性组(P= 0.035)，且Hp感染组易损斑块的发生率明显高于Hp阴性组(P=0.049)。这提示Hp感染可能是易损斑块形成的危险因素。

SUNG等［14］研究发现，长期Hp感染能引起胃壁细胞数减少以及叶酸、B族维生素吸收不良，使Hcy代谢发生障碍，导致高Hcy血症。高Hcy血症可以通过损伤血管基质、加重对动脉壁内皮的氧化损伤、促进血管平滑肌的增殖、影响血管运动调节降低蛋白C活性、诱发凝血酶的产生及血小板聚集等促进动脉粥样硬化型血栓形成，从而导致动脉粥样硬化的形成［15-16］。本研究结果显示，在排除了年龄、高血压、吸烟、肥胖、糖尿病、血脂异常等已知的高危因素对研究结果的影响后，颈动脉粥样硬化患者中Hp感染组血清Hcy水平明显高于Hp阴性组(P＜0.01)，且随着患者体内Hp感染程度的加重，血清Hcy水平呈递增趋势。由此提示，Hp感染与血清Hcy水平有着密切的关系，Hp感染可能通过影响Hcy水平而启动及加速动脉粥样硬化的形成和发展。尤其是Hp重度感染可引起更高水平的Hcy代谢障碍，从而引发高Hcy血症。本研究结果还显示，颈动脉粥样硬化患者中易损斑块组血清Hcy浓度高于非易损斑块组(P＜0.01)。由此推测，高Hcy水平还可反映动脉粥样硬化斑块的活动性和易损性。Logistic回归分析显示Hp感染和血清Hcy水平均为斑块性颈动脉粥样硬化患者发生易损斑块的影响因素。在斑块性颈动脉粥样硬化患者中，Hp感染者并发易损斑块可能性是Hp阴性者的2.35倍，血清Hcy每提高1 μmol/L，发生易损斑块的可能性增加9%。

综上所述，Hp感染可能通过影响Hcy代谢以及增加CIMT和颈动脉硬化斑块的不稳定性，促进动脉粥样硬化的发生和进展。

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The influence of Helicobacter pylori infection on serum homocysteine level in patients with carotid atherosclerosis

LEI Ming1，BAI Ju2，WU Jianhua1，XIA Danni1，ZHENG Ruidong2.(1.Department of Clinical Laboratory，the First People's Hospital of Changde City，Hunan Changde 415003，China;2.Department of Clinical Laboratory，Maternal and Child Health Care Hospital of Changde City，Hunan Changde 415003，China)

ObjectiveTo investigate the influence of Helicobacter pylori(Hp)infection on carotid intima-media thickness(CIMT)，plaque stability and the metabolism of homocysteine(Hcy)in carotid atherosclerosis patients.MethodsAccording to carotid artery ultrasonography，129 patients with carotid atherosclerosis were enrolled.14C urea breath test was used to determine Hp infection.Meanwhile，enzymatic cycling method was used to determine serum Hcy levels.ResultsSerum Hcy levels and CIMT of patients with carotid atherosclerosis in Hp infection group were higher than those in Hp non-infection group(P＜0.01)，and they increased with the severity of Hp infection with statistical significance(P＜0.01).The plaque detection rate in Hp infection group was higher than that of Hp non-infection group (P＜0.05)，and the incidence of vulnerable plaques in Hp infection group was obviously higher than that in Hp noninfection group(P＜0.05).Logistic regression analysis showed that the possibility of vulnerable plaques in Hp infection group was 2.35 times higher than that in Hp non-infection group.With serum Hcy increasing by 1 μmol/L，the possibility of vulnerable p laque increased by 9%.ConclusionsHp infection is likely to promote the development and progression of carotid atherosclerosis through influencing Hcy metabolism and increasing CIMT and the instability of carotid atherosclerotic plaque.

Homocysteine;Helicobacter pylori;Carotid atherosclerosis;Carotid artery plaque;Intima-media thickness

1673-8640(2015)09-0894-04

R446.1

A

10.3969/j.issn.1673-8640.2015.09.007

2014-09-24)

(本文编辑:龚晓霖)

湖南省卫生厅医药卫生科技计划课题(B2013-146)

雷鸣，女，1975年生，学士，副主任技师，主要从事临床检验诊断工作。

吴建华，联系电话:0736-7788080。