类孟买血型血清学鉴定及家系调查探讨

朱泽航，陆元善

(上海交通大学附属第一人民医院输血科，上海200080)

类孟买血型血清学鉴定及家系调查探讨

朱泽航，陆元善

(上海交通大学附属第一人民医院输血科，上海200080)

目的探讨正确鉴定类孟买血型的方法，为罕见血型人群找寻更多相合供者。方法对4例正反定型不符者用ABO正反定型、Lewis血型鉴定、H抗原检测、红细胞吸收放散试验、冷抗体检测和检测唾液血型物质的中和抑制试验进行综合鉴定，并且进行家系调查。结果4例被检者均证实为类孟买血型。先证者c的妹妹也被证实为同型类孟买型。结论对正反定型不一致的标本要高度警惕，应加做其它必要的血清学试验。冷抗体检测还能为类孟买血型患者辅助选择合适的血液输注。家系调查不仅能查清类孟买血型的来源和遗传，而且可以提供更多相同稀有血型供者。

类孟买血型;ABD正反定型;H抗原;冷抗体

作为ABO和Lewis等血型形成的前体糖链，H血型抗原存在于几乎所有人的红细胞表面。而类孟买血型是罕见的H缺陷的ABO分泌型［1］。我们对4例正反定型不符且疑似类孟买血型者做了以下进一步血清学鉴定，并对其中一个家庭进行了家系调查。

材料和方法

一、研究对象

4例(分别为被检者a、b、c、d)标本在常规血型鉴定时正反定型不符，且排除抗-A、抗-B减弱。男2例，女2例，年龄23～45岁。调查家系成员包括先证者父母、姑姑和弟妹，共5人。

二、试剂

单克隆抗-A、抗-B、抗-H及标准ABO红细胞均购自上海血液生物医药有限责任公司。抗-Lea、抗-Leb购自荷兰Sanquin公司。人源抗-A和抗-B、新鲜O型脐血细胞、新鲜成人ABO细胞均由本实验室自制。

三、方法

1.ABO血型、红细胞吸收放散试验、抗体检测和唾液中和抑制试验均按《全国临床检验操作规程》(第3版)进行。

2.H抗原检测、Lewis血型鉴定按试剂说明书操作。

结果

一、血型鉴定

4名被检者a、b、c和d的红细胞与抗-A、抗-B、抗-H、抗-Lea均不凝集，与抗-Leb均凝集。被检者血清与标准ABO红细胞的反应均不符合正定型，但与自身红细胞不发生凝集。见表1。

二、红细胞吸收放散试验

被检者a、b、c检出红细胞上有弱B抗原，被检者d红细胞上有弱A和弱B抗原。正常成人O细胞上A、B抗原阴性。见表2。

表1 ABO、H、Lewis血型鉴定结果

表2 红细胞吸收放散试验结果

三、抗体鉴定

被检者a和d血清中检出抗-H，被检者b和c血清中检出抗-HI。

四、唾液中血型物质检测

在被检者a、b和c的唾液中检测到B物质和H物质，在被检者d的唾液中检测到A、B和H物质。

根据以上结果判定被检者a、b和c的血型为Bmh，被检者d的血型为ABmh。

五、家系调查结果

对被检者c家系成员进行血型血清学鉴定，除妹妹与先证者c同为Bmh外，其他成员血型均表现正常。家系图见图1。

图1 先证者c家系图

讨论

ABO血型正反定型结果可以相互参照，正反定型结果相符才能确保ABO血型鉴定的正确性［2］。类孟买血型作为一种稀有血型，主要表现在红细胞H抗原部分或全部缺失。由于H抗原是A和B抗原前身物质，其缺失直接影响A和B抗原形成，导致实验室易将类孟买血型误定为O型。因此，反定型加O细胞是非常有必要的［3］。针对这种情况还必须加做H抗原检测。Lewis抗原不是红细胞本身的抗原，而是被血浆中鞘糖脂从血浆吸附到红细胞膜上。由于Lewis物质与ABH起源于一个共同的前身物，检测Lewis血型有助于鉴定类孟买血型。类孟买血型个体Lewis血型表现为Le(a-b+)或Le(a-b-)，而不会表现为Le(a+ b-)，当Se位点为Sew时，表现为Le(a+b+)［4］。红细胞表面H抗原缺乏，唾液等分泌液中检测出H物质是类孟买血型最重要血清学依据。本研究被检者红细胞上H抗原为阴性，Lewis血型表现为Le(a-b+)，红细胞吸收放散试验与唾液血型物质测定结果一致，且后者检出H物质，由此可断定被检者为类孟买血型。类孟买血型人群血清中通常存在冷抗体抗-H或抗-HI。本研究也检测到此类抗体，进一步证实为类孟买血型。另外，抗-H或抗-HI能跟大多数具有H抗原的红细胞凝集，在无法找到相同H抗原缺乏血型血源时应根据类孟买血型患者抗-A、抗-B、抗-H或抗-HI实际情况，选择37℃时与类孟买血型患者血清反应最弱的ABO血型血液进行输血治疗［5］。

目前，在欧洲、东南亚、美国等人群中均发现了类孟买型。文献报道在日本约为(1～2)/ 300 000，中国香港约为1/15 620，中国台湾约为1/8 000［6］，提示不同地区不同人群中类孟买型表型频率存在地区性差异。中国大陆尚无这方面的统计资料，有待进一步研究。

有研究表明，H(FUT1)位点基因控制H抗原物质在红细胞表达，其突变可导致类孟买血型;而Se(FUT2)位点基因则控制H抗原在体液中表达。孟买型是由于FUT1和FUT2基因发生突变，H抗原在红细胞和分泌液中均检测不到;而类孟买型仅为FUT1基因发生突变，因此分泌液中仍存在ABH物质［7］。本研究结果与文献相符。FUT1基因直接编码产物是α-1，2岩藻糖基转移酶。将供给底物二磷酸鸟苷-L-岩藻糖(guanosine diphosphate-L-fucose，GDP-L-fucose)的岩藻糖基转移到接受底物前体糖链上形成H抗原，并进一步在A和B糖基转移酶的作用下形成A和B抗原［8］。推测4例类孟买血型者FUT1基因的突变使α-1，2岩藻糖基转移酶失活，导致H抗原合成减弱，继而使红细胞上A或B抗原表达弱于正常型［9］。

类孟买型由基因突变或自亲代获得2个隐性基因(hh)而产生［10］。本调查家系中，先证者c与妹妹同为Bmh，父母和弟弟均表现为正常ABO和H表型。从分子遗传机制考虑存在如下可能: (1)父母H位点基因正常(HH)，姐妹俩FUT1基因发生突变;(2)父母为单链突变基因携带者(Hh)。姐妹从亲代继承了h基因，发生纯合或杂合甚至复合突变，使得α-1，2岩藻糖基转移酶活性严重下降甚至失活，影响了血型抗原的形成，最终导致了先证者及其妹妹的类孟买血型。突变携带者的血型表型正常，可能是这些个体在另一半正常表达的H抗原基础上合成了足够多的ABO血型抗原，细胞表面的抗原位点数量能够满足单克隆抗体的结合所需，从而显示了正常的血清学实验结果［11］。至于弟弟是否为单链突变基因携带者留待今后对其子代进行调查。

本研究中有3人同为Bmh，促使考虑能否建立类孟买型信息库，使这种稀有同血型者能快速找到最适供者。另外，由于类孟买型隐性遗传，常可在先证者同胞中发现相同类孟买血型，因此对其同胞进行调查也不失为寻找相合供者的重要途径。

［1］SCHENKEL-BRUNNER H.ABO system.Human blood groups chemical and biochemical basis of antigen specificity［M］.2nd edition.New York: Springer wien，2000:110-117.

［2］樊凤艳，王洪波，魏少平，等.不规则抗体导致ABO正反定型不符处理探讨［J］.检验医学，2012，27(10):822-824.

［3］江慧.常规血型鉴定发现类孟买型Bhm1例［J］.检验医学与临床，2013，10(18):2494.

［4］郭忠慧，向东，朱自严，等.中国类孟买血型FUT1和FUT2基因研究［J］.中华医学遗传学杂志，2004，21(5):417-421.

［5］向东，张雄民，朱自严，等.1例类孟买血型的鉴定及输血［J］.中国输血杂志，2004，17(4):275-276.

［6］BLUMENFELD OO，PATNAIK SK.Allelic genes of blood group antigens:a source of human mutations and cSNPs documented in the Blood Group Antigen Gene Mutation Database［J］.Hum Mutat，2004，23 (1):8-16.

［7］杰夫·丹尼尔.人类血型［M］.朱自严，译.2版.北京:科学出版社，2007:8-79.

［8］许国先，洪小珍，刘瑛，等.一个类孟买血型家系的α1，2岩藻糖基转移酶基因突变分析［J］.中华医学遗传学杂志，2010，27(3):250-254.

［9］林甲进，黄颖，朱碎永.一例类孟买血型的家系分析和分子机制研究［J］.中华医学遗传学杂志，2013，30(2):165-167.

［10］吴远军，刘景春，刘兴玲，等.类孟买血型OHmB的血型血清学及家系调查［J］.第四军医大学学报，2006，27(19):1778-1781.

［11］骆宏，林健伟，张润青，等.类孟买血型两例的分子遗传机制研究［J］.中华检验医学杂志，2012，35(9):815-819.

Study on the serology identification of para-Bombay phenotype and the investigation of a family

ZHU Zehang，LU Yuanshan.(Department of Transfusion，Shanghai General Hospital，Shanghai Jiaotong University，Shanghai 200080，China)

ObjectiveTo study the correct serology identification methods of para-Bombay phenotype and search compatible donors for rare blood type.MethodsA total of 4 cases of positive and reverse typing discrepancy were identified comprehensively.ABO positive and reverse typing，Lewis blood type identification，H antigen detection，red blood cell absorption-elution test，cold antibody detection and hemagglutination inhibition test for blood type substance in saliva were performed.A family investigation was made.ResultsAll the 4 cases were confirmed as para-Bombay phenotype.Proband c＇s sister was also proved that she was the same para-Bombay phenotype.ConclusionsThe cases of positive and reverse typing discrepancy should be added other essential tests for para-Bombay phenotype.The detection of cold antibody assists in not only identifying para-Bombay phenotype but also selecting compatible blood for transfusion.Family investigation makes possible observe source and inheritance of para-Bombay phenotype and provide homogeneous donors for transfusion.

Para-Bombay phenotype;ABD positive and reverse typing;H antigen;Cold antibody

1673-8640(2015)09-0874-03

R446.11

A

10.3969/j.issn.1673-8640.2015.09.002

2015-03-04)

(本文编辑:范基农)

朱泽航，女，1969年生，学士，副主任技师，主要从事血型鉴定和输血技术工作。