孕激素膜受体1在40例卵巢癌中的表达及意义

任峻青 郑洪

（遵义医学院附属医院病理科，贵州 遵义563003）

近年来发现孕激素膜受体1（PGRMC1）是一种新型膜激素受体，广泛存在于细胞膜、微粒体及突触膜上。PGRMC1是作为一种接头蛋白并参与细胞信号转导通路，与肿瘤细胞增殖，侵袭密切相关。PGRMC1在乳腺癌、结肠癌、卵巢癌和肺癌等多种肿瘤细胞和肿瘤组织系中高表达，表明PGRMC1促进肿瘤的生存和发展 。目前关于PGRMC1在卵巢癌发生、发展过程中作用少有报道，因此，本文探讨PGRMC1表达水平和卵巢癌分期、分级的相关性，为卵巢癌的治疗提供新的治疗靶点。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 采集遵义医学院附属医院病理科2011－2013年卵巢浆液性囊腺癌石蜡标本40例，10%甲醛固定，石蜡包埋。年龄28～69岁，平均46.7岁，全部患者术前未化疗，术后予以化疗，具有完整的临床病理资料。年龄 ＜50岁18例，≥50岁22例；肿瘤大小＜5cm 11例，≥5cm 29例；病理分级：Ⅰ～Ⅱ期13例，Ⅲ期27例；有淋巴结转移的10例，无淋巴结转移的30例。另选择正常输卵管伞端上皮10例（来自尸检，病理证实输卵管上皮组织无异常者，年龄28～46岁，平均38.9岁）为对照组，浆液性囊腺瘤10例（年龄23～45岁，平均31.5岁），交界性肿瘤10例（年龄32～62岁，平均47.5岁）。

1.2 试剂 兔抗人PGRMC1一抗购自北京博奥森生物技术有限公司，抗体工作浓度1∶200，EnVision试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司。

1.3 PGRMC1的免疫组化定位 每例石蜡标本脱蜡，水化；用3%H2O2阻断内源性过氧化物酶活性。在pH 9.0的EDTA缓冲液中微波修复抗原后，加入已稀释的一抗PGRMC1（1∶200）4℃孵育过夜；加入生物素标记的二抗，滴加DAB显色剂显色，苏木素复染核，脱水、透明、封片。以PBS缓冲液代替一抗作空白对照，正常肾脏组织为阳性对照。

1.4 结果判定标准 细胞质染成淡黄色至棕黄色为阳性标志，将阳性细胞数和显色强度分为3级：弱阳性（＋），阳性细胞数＜10%，显色强度为淡黄色或仅个别细胞为黄至棕黄色；强阳性（＋＋＋），阳性细胞数＞60%，多数细胞为黄至棕黄色；中度阳性（＋＋）阳性细胞数及强度介于前两者之间。

1.5 图像分析 每张切片应用美国 MediaCybemetics公司生产的Image－ProPlus图像分析软件（IPP6.0）进行图像分析平均光密度值（MOD）。

1.6 统计学处理 采用SPSS 17.0统计软件分析，PGRMC1阳性表达率和卵巢癌临床病理学计数资料采用卡方检验。

2 结 果

2.1 PGRMC1在卵巢癌中的阳性表达率 对照组10例，PGRMC1阳性表达率20%；良性组10例，PGRMC1阳性表达率30%，F＝12.370，P＝0.006；交界性组10例，PGRMC1阳性表达率50%；恶性组40例，PGRMC1阳性表达率72.5%。各组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。阳性部位主要以癌细胞胞浆内呈现棕黄色颗粒状染色。见图1。

2.2 PGRMC1在实验各组的阳性表达量 对照组10例，MOD（0.0 180±0.00 789）；良性组10例，MOD（0.0 210±0.00 738），F＝14.648，P＝0.000；交界性组10例，MOD（0.0 320±0.0 103）；恶性组40例，MOD（0.0 470±0.01 870）。良性组与对照组比较，差异有统计学意义（P＞0.05）；交界性组与良性组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；恶性组分别与对照组、良性组、交界性组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。

图1 PGRMC1在各组中的表达（×400）

2.3 PGRMC1的表达与卵巢癌临床病理指标的关系 PGRMC1的表达与卵巢癌肿瘤大小（P＝0.02）、病理分级（P＝0.011）密切相关，与年龄（P＝0.498）和临床分期（P＝0.4）、淋巴结转移情况（P＝0.838）无关。见表1。

表1 PGRMC1在卵巢癌中的表达及其与临床指标的关系 （n＝40）

3 讨 论

PGRMC1在多种肿瘤组织和肿瘤细胞系中高表 达［1－2］。 本 研 究 表 明，卵 巢 良 性 肿 瘤 组 织 中PGRMC1的表达水平相对于正常对照组来说增高不明显（P＞0.05），且交界性组相对于良性组增高不明显（P＞0.05），恶性组与正常组、良性组、交界组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。随着恶性程度的增加，PGRMC1的阳性表达量显著增多，与上述结果基本一致。可以推测PGRMC1在卵巢癌中过度表达。

Peluso等［3］研究显示PGRMC1／Hpr6.6跨膜区的C末端参与孕激素抗正常颗粒细胞凋亡的调控，而PGRMC1与纤溶酶原激活物抑制剂RNA结合蛋白1（PAIRBP1）结合位点也在其C末端的70～130aa的位置，敲除PGRMC1表达后，可使3－H孕激素入胞率下降60%，孕激素抗卵巢癌细胞凋亡效应丧失。体内外PGRMC1均与卵巢癌细胞对顺铂的敏感度密切相关，敲除PGRMC1基因后，瘤细胞体外培养生长缓慢，荷瘤裸鼠瘤体明显小于对照组［4］。因此，结合本实验中卵巢浆液性囊腺癌组织中PGRMC1表达与临床病理特征关系表明，在卵巢癌临床病理特征分组中PGRMC1在各组中表达，组与组间比较有肿瘤大小、病理分级差异有统计学意义（P＜0.05）。可推测PGRMC1在一定程度上减弱或阻止凋亡及阻断凋亡通路引起细胞凋亡，肿瘤直径越大、分化越差的卵巢癌PGRMC1表达较高，提示卵巢癌的发生与PGRMC1密不可分，PGRMC1可能是指示肿瘤进展的潜在标志物和治疗肿瘤的潜在靶标分子。因此需进一步深入研究PGRMC1与卵巢癌发生的关系有助于寻找新的肿瘤标志物，将为卵巢癌的早期诊断提供理论和实验依据。

［1］ H.Neubauer，S.E.Clare，W.Wozny，et al.Breast cancer proteomics reveals correlation between estrogen receptor status and differential phosphorylation of PGRMC1［J］.Breast Cancer Research，2008，10（5）：R85.

［2］ G.Crudden，R.Loesel，R.J.Craven.Overexpression of the cytochrome p450activator hpr6 （heme－1 domain protein／human progesterone receptor）in tumors［J］.Tumour Biology，2005，26（3）：142－146.

［3］ J.J.Peluso，X.Liu，M.M.Saunders，et al.Regulation of ovariancancer cell viability and sensitivity to cisplatin by progesterone receptor membrane component－1［J］.Journal of Clinical Endocrinloogy ＆ Metabolism，2008，93（5）：1592－1599.

［4］ 纪术峰，吴爱国，杨华峰.孕激素膜受体1在乳腺癌的表达及其生物学意义［J］.南方医科大学学报，2012，32（5）：635－638.