陕西省水产品中4种硝基呋喃代谢物的检测

张艺蓓，岳田利，乔海鸥，蒋旭鹏，贾 如，李 璐

(1 西北农林科技大学 食品科学与工程学院，陕西 杨凌 712100； 2 陕西省疾病预防控制中心 理化检验室，陕西 西安 710054)

陕西省水产品中4种硝基呋喃代谢物的检测

张艺蓓1，岳田利1，乔海鸥2，蒋旭鹏1，贾 如1，李 璐1

(1 西北农林科技大学 食品科学与工程学院，陕西 杨凌 712100； 2 陕西省疾病预防控制中心 理化检验室，陕西 西安 710054)

【目的】 对陕西省市售水产品中4种硝基呋喃代谢物进行检测，为保证当地食品安全提供依据。【方法】 从陕西西安、宝鸡、安康、延安、咸阳、渭南、商洛、铜川、汉中和榆林共10个地市的超市和农贸市场随机采集16种120份鱼样品，将样品匀浆后在酸性条件下用2-硝基苯甲醛避光振荡衍生16 h，Oasis HLB固相萃取柱提取、净化，超高效液相色谱-串联质谱法检测，同位素内标法定量，统计水产品中呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-噁唑烷基酮(AOZ)、呋喃它酮代谢物5-甲基-吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮(AMOZ)、呋喃妥因代谢物1-氨基-2-内酰脲(AHD)和呋喃西林代谢物氨基脲(SEM)的检测结果，分析样品中硝基呋喃类药物的残留情况。【结果】 4种硝基呋喃代谢物的总检出率为6.5%，呋喃唑酮代谢物检出率最高，为8.3%；16种水产品中4种硝基呋喃代谢物残留的样品检出率为15.0%；16种鱼品种的检出率为37.5%，其中武昌鱼、罗非鱼、草鱼、鲶鱼、鲤鱼和鲫鱼检出率依次为100.0%，100.0%，20.6%，15.4%，15.2%和6.3%，其余鱼样未检出；草鱼中4种代谢物的平均含量远高于其他鱼种；咸阳、商洛、延安、渭南、宝鸡和西安的检出率分别为22.9%，20.8%，8.3%，8.3%，2.1%和2.1%；咸阳的草鱼、商洛的鲤鱼、渭南的草鱼和鲤鱼在养殖或运输过程中有使用多种硝基呋喃类药物的情况。【结论】 陕西省部分地区、部分鱼种中硝基呋喃类药物残留水平超标，草鱼、鲤鱼、鲶鱼和鲫鱼等当地养殖的鱼类安全性较低，应引起有关食药监部门的重视。

水产品；硝基呋喃代谢物；残留检测；陕西省；食品安全

硝基呋喃类药物(Nitrofurans)是一类分子结构中含有5-硝基呋喃环的化学合成类广谱抗菌素，曾作为治疗和预防埃希氏菌和沙门氏菌引起的哺乳动物消化道疾病的药物和饲料添加剂。硝基呋喃常见品种有呋喃唑酮(FZD)、呋喃它酮(FTD)、呋喃妥因(NFT)和呋喃西林(NFZ)4种药物，对应的代谢物分别为3-氨基-2-噁唑烷基酮(3-amino-2-oxalidone,AOZ)、5-甲基-吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮(5-morpholinomethyl-3-amino-2-oxalidinone,AMOZ)、1-氨基-2-内酰脲(1-amino-hydantoin,AHD) 和氨基脲(Semicarbazide,SEM)。

近年来研究发现，硝基呋喃类药物在生物体内有慢性毒性，可以诱导基因突变，可致癌、致畸、致突变[1]。呋喃唑酮是硝基呋喃类药物中最具代表性的一种，动物服用呋喃唑酮后，原药分子在动物体内不稳定，几小时内迅速代谢，代谢物与细胞膜蛋白结合，长期保持稳定[2]，蒸煮、烘烤、磨碎和微波等烹调方法均无法有效降解，且这种蛋白结合态的呋喃唑酮含有AOZ的完整侧链，在人胃弱酸性条件下，AOZ侧链从母体分子上解离下来，代谢成为β-羟乙基肼，可以致癌、致突变[3-5]。同样，其他硝基呋喃代谢物AMOZ、SEM、AHD等都能在体内与细胞膜蛋白结合形成稳定的结合态长期存在，食用含有硝基呋喃类药物的肉制品会对人体产生一定的毒副作用[6-7]。因此，对其检测监控显得相当重要。

许多国家明令禁止硝基呋喃类药物在食源性动物中使用[8]。1990年7月欧盟颁布2377/90/EEC条例，将硝基呋喃类药物及其代谢产物列为A类禁用药物，规定其在动物源性食品中的残留检测限为1.0 μg/kg[9]。美国和日本分别于1975、1977年禁止呋喃唑酮作为医药使用，在动物性食品中的检出限为0.5 μg/kg[10]。美国21CFR530.41中规定食源性动物禁止使用呋喃唑酮和呋喃妥因。韩国2002年《食品公典》规定，猪肉中呋喃唑酮不得检出。我国农业部2002年4月发布了193号公告，公布了《食品动物禁用兽药及其他化合物清单》，该清单将硝基呋喃类药物列为禁止使用药物[11]，2003年又将水产品硝基呋喃代谢物纳入残留监控计划。

水产品硝基呋喃类药物残留超标事件屡屡发生，严重威胁人民身体健康和我国进出口贸易。动物源性食品中抗生素残留量的检出已成为世界肉类贸易中的重要技术指标和技术壁垒之一，我国出口欧盟的鱼虾、禽肉和肠衣等被检出呋喃唑酮、呋喃西林，严重影响了动物食品的出口贸易。因此，加强该类物质的检测和控制有着重要的现实意义。

目前，对于硝基呋喃类抗生素残留的检测主要是对其代谢物进行检测，方法主要有液相色谱-紫外法[12]、酶联免疫法[13]、液相色谱-质谱法[14-15]和液相色谱-串联质谱法[16-17]，但液相色谱-紫外法、酶联免疫法和液相色谱-质谱法灵敏度较差，样品前处理时间长、过程繁琐。超高效液相色谱-串联质谱法(Ultra-performance Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry，UPLC-MS/MS)是近几年发展起来的一种药物残留分析检测技术，样品前处理时间短、灵敏度和准确性高，定性定量能力强，是国际上普遍采用的硝基呋喃代谢物检测和确证方法[18-22]。

本研究采用UPLC-MS/MS技术，在酸性条件下，利用2-硝基苯甲醛对4种硝基呋喃代谢物进行衍生，用Oasis HLB固相萃取柱净化，对陕西省10个地市16种120份鱼肉样品中的硝基呋喃代谢物进行检测，以期为当地政府进行食品安全监管提供可靠数据，并对水产品的食品质量安全进行预警。

1 材料与方法

1.1 主要仪器和试剂

UltiMateTM3000超高效液相色谱仪，美国Dionex公司；API-3200三重四极杆质谱仪，美国Applied Biosystems公司。硝基呋喃代谢物标准品： AOZ、AMOZ、AHD、SEM，同位素内标标准品：d4-AOZ、d5-AMOZ、13C3-AHD、13C-15N-SEM，硝基呋喃代谢物衍生物标准品：2-NP-AOZ、2-NP-AMOZ、2-NP-AHD、2-NP-SEM和硝基呋喃代谢物衍生物同位素内标标准品：2-NP-d4-AOZ、2-NP-d5-AMOZ、2-NP-13C3-AHD、2-NP-13C-15N-SEM，购自Sigma-Aldrich公司，所有标准品纯度均≥99%。甲醇、乙腈、乙酸铵，均为色谱纯。二甲亚砜(DMSO)、氢氧化钠(NaOH)、0.2 mol/L盐酸溶液，均为分析纯。衍生剂：称取0.075 g 2-硝基苯甲醛(2-NPA)溶于10 mL二甲亚砜，浓度为0.05 mol/L，现用现配。Oasis HLB固相萃取柱(60 mg,3 mL)。Millipore A10纯水系统，美国Millipore公司。

1.2 UPLC-MS/MS检测条件

1.2.1 色谱条件 色谱柱：Dionex Acclaim®RSLC C18柱 (2.1 mm×100 mm,2.2 μm)；流动相A：乙腈；流动相B：含5 mmol乙酸铵和体积分数0.1%乙酸水溶液；A、B混合液(V(A)∶V(B)=1∶3)等梯度洗脱；流速：0.5 mL/min；柱温：40 ℃；进样体积：10.0 μL。

1.2.2 质谱条件 电喷雾ESI离子源(正离子)；扫描方式：多反应监测(MRM)；电喷雾电压：5 000 V；气帘气压力：68 kPa；雾化气压力：482 kPa；辅助气压力：206 kPa；离子源温度：650 ℃。

1.3 标准溶液的制备

1.3.1 标准储备液(1 mg/mL) 分别称取10 mg 4种硝基呋喃代谢物标准品，置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，-18 ℃冷藏，避光保存。

1.3.2 混合标准溶液(1 μg/mL) 分别取0.1 mL 4种标准储备液，置于10 mL容量瓶中，用甲醇稀释成10 μg/mL标准中间液，再取1 mL的标准中间液，用甲醇水溶液(V(甲醇)∶V(水)=1∶1)稀释成1 μg/mL混合标准溶液，4 ℃冷藏，避光保存。

1.3.3 标准系列溶液 分别取l μg/mL的混合标准溶液0.01，0.05，0.10，0.20，0.50，1.00 mL于10 mL容量瓶中，用甲醇水溶液(V(甲醇)∶V(水)=1∶1 )定容到刻度，得到质量浓度为1，5，10，20，50，100 ng/mL的标准系列溶液。

1.3.4 混合内标工作溶液 分别取硝基呋喃代谢物同位素内标标准品d4-AOZ、d5-AMOZ、13C3-AHD、13C-15N-SEM，用纯水配成100 ng/mL混合溶液，4 ℃冷藏保存。

1.4 样品的采集

根据全国食品污染物监测网中规定的监测项目和种类，结合陕西省经济发展水平、地域特征和人口分布情况，在西安、宝鸡、安康、延安、咸阳、渭南、商洛、铜川、汉中和榆林共10个监测点，采用随机抽样和定点抽样相结合的方法，选择20个农贸市场对不同鱼品种进行采样。共得到16个品种120份鱼样品。采样后立即密封样品，及时运回实验室冷藏，样品的品种及数量见表1。

表1 陕西省10地市水产品中采集样品的数量及种类Table 1 Species and numbers of aquatic products in 10 cities of Shaanxi province

续表1 Continued table 1

1.5 样品的UPLC-MS/MS检测

取鱼样可食部分匀浆，准确称取1.00 g(精确至0.01 g)已匀浆的样品，置于50 mL离心管中，加入200 μL 100 ng/mL 4种硝基呋喃代谢物内标溶液，再加入10.0 mL 0.2 mol/L的盐酸溶液和0.3 mL 2-硝基苯甲醛，涡旋混匀，37 ℃避光振荡衍生16 h(过夜)；衍生完后，向溶液中加入约1.8 mL 1 mol/L氢氧化钠溶液，调pH至7.2～7.5，室温下10 000 r/min离心10 min。安装Oasis HLB固相萃取柱，依次用3 mL甲醇和3 mL水活化，加入离心后得到的上清液，用3 mL纯水淋洗，5 mL甲醇洗脱，洗脱液用氮气吹干；样品用甲醇水溶液(V(甲醇)∶V(水)=1∶3)定容至1.0 mL，漩涡混合1 min，过0.22 μm滤膜，取滤液进行UPLC-MS/MS检测。

1.6 标准曲线及最低检出限

采用内标法定量。将4种硝基呋喃代谢物标准储备液稀释成质量浓度为1，5，10，20，50，100 ng/mL 的标准系列溶液，在空白鱼肉样品(1.5节未检出硝基呋喃代谢物的样品)中添加AOZ、AMOZ、AHD、SEM的标准系列溶液，分别取10 μL进行UPLC-MS/MS分析。取100 ng/mL的硝基呋喃代谢物同位素内标标准品10 μL，进行UPLC-MS/MS分析。以分析物质量浓度与内标物质量浓度的比值为横坐标(x)，以分析物峰面积与内标物峰面积的比值为纵坐标(y)，绘制标准曲线。分别按信噪比(S/N)大于3和信噪比大于10计算本方法的检出限(LOD)和定量限(LOQ)。

1.7 加标回收率和精密度

以空白鱼肉样品为测试样品，AOZ、AMOZ、AHD、SEM的添加质量浓度均设50，100，200 ng/mL 3个水平，进行UPLC-MS/MS分析，每个添加水平在相同的试验条件下做6个平行样，对照标准曲线计算每个样品的浓度，计算加标回收率、相对标准偏差(RSD)。

1.8 样品中目标化合物残留量的计算

式中：w为样品中待检测化合物残留量，μg/kg；C为由回归曲线计算得到的上机试样溶液中目标化合物质量浓度，ng/mL；m为样品的质量，g。

2 结果与分析

2.1 硝基呋喃代谢物检测方法的准确性确定

在质量浓度为1～100ng/mL时，AOZ、AMOZ、AHD、SEM质量浓度比值(x)与峰面积比值(y)均呈现良好的线性关系，其线性回归方程分别为：yAOZ=0.006 44x+0.010 20(r=0.998 5),yAMOZ=0.011 10x+0.013 00(r=0.998 8),yAHD=0.005 67x+0.004 97(r=0.998 1),ySEM=0.012 90x+0.017 00(r=0.995 9) (图1)。4种物质的检出限为0.5μg/kg，定量限为1.5μg/kg，表明本方法具有良好的线性关系，线性范围宽，灵敏度高。加标回收试验显示，回收率为87.8%～110.8%，相对标准偏差为1.98 %～4.32 %，表明本方法具有较高的准确性。

2.2 4种硝基呋喃代谢物残留的总体检出情况

陕西省16种水产品的120份样品中4种硝基呋喃代谢物残留量的检测结果见表2。表2表明，120份样品中，AOZ、AMOZ、AHD、SEM的检出率分别为8.3%，7.5%，5.0%和5.0%，4种硝基呋喃代谢物的总检出率为6.5%(31/480)。

2.3 16种水产品中硝基呋喃代谢物的检测结果

检测结果显示，鲢鱼、金昌鱼、鲈鱼、麒麟鱼、梭边鱼、鲜带鱼、大黄鱼、鳕鱼、江团鱼、鲑鱼等10种鱼未检测到硝基呋喃代谢物；武昌鱼、罗非鱼、草鱼、鲶鱼、鲤鱼和鲫鱼等6种鱼检测出硝基呋喃代谢物，鱼种检出率为37.5%(6/16)，其中检出AOZ和AMOZ的各有3种(18.8%,3/16)，检出AHD和SEM的各有4种(25.0%,4/16)，说明硝基呋喃类药物在这6种鱼的养殖和运输中均有使用。武昌鱼、罗非鱼、草鱼、鲶鱼、鲤鱼和鲫鱼的检出率分别为100.0%，100.0%，20.6%，15.4%，15.2%和6.3%，2份武昌鱼样品中1份检出AHD，另1份检出SEM；仅有的1份罗非鱼样品中有SEM检出；34份草鱼样品中分别有5，4，3，2份样品有AOZ、AMOZ、AHD、SEM检出，检出率为20.6%；33份鲤鱼样品分别有4，4，1，2份样品检出了AOZ、AMOZ、AHD和SEM，检出率为15.2%；13份鲶鱼样品分别各有1份样品检出AOZ和AHD，16份鲫鱼样品中只有1份样品检出AMOZ(表3)，16种水产品中4种硝基呋喃代谢物残留的样品检出率为15.0%(18/120)。

图1 4种硝基呋喃代谢物的线性回归曲线

表2 陕西省水产品中4种硝基呋喃代谢物残留的检测结果(n=120)Table 2 Determination of four nitrofurans metabolites residues in commercial aquatic products in Shaanxi (n=120)

表3 陕西省16种水产品中硝基呋喃代谢物残留的检出率 Table 3 Determination of four nitrofurans metabolites residues in 16 kinds of aquatic products in Shaanxi %

表4显示，从不同鱼种看，16种鱼品种中草鱼、鲤鱼、鲶鱼、鲫鱼、武昌鱼、罗非鱼6种鱼检出代谢物，其中草鱼检出4种代谢物，SEM、AOZ、AHD、AMOZ的平均残留水平分别为159.00，132.54，94.89，63.47μg/kg，远高于其他鱼种；鲤鱼也检出4种代谢物，AHD、SEM、AOZ、AMOZ残留的平均水平分别为19.71，10.43，8.21，6.63μg/kg；鲶鱼检出AOZ、AHD残留，其平均残留水平分别为0.28，21.6μg/kg；武昌鱼检出AHD、SEM，其平均残留水平分别为8.15，9.58μg/kg；鲫鱼检出AMOZ残留，平均残留水平为2.72μg/kg；罗非鱼检出SEM残留，平均残留水平为3.68μg/kg。

表4 陕西省水产品中4种硝基呋喃代谢物残留的平均水平 Table 4 Mean levels of four nitrofurans metabolites residues in commercial aquatic products in Shaanxi μg/kg

2.4 10个地市水产品中4种硝基呋喃代谢物的检测结果

在10个采样地市中，安康、汉中、榆林、铜川4个地市未检出硝基呋喃代谢物；咸阳、商洛、延安、渭南、宝鸡和西安等6个地市的水产品中检出了硝基呋喃代谢物，其检出率分别为22.9%，20.8%，8.3%，8.3%，2.1%和2.1%，其中咸阳、商洛检出率较高，且均检出了4种代谢物，延安只检出1种代谢物AOZ，渭南检出2种代谢物AOZ和AMOZ，宝鸡和西安只检出1种代谢物SEM(表5)。

表5 陕西省10个地市水产品中4种硝基呋喃代谢物的检出率Table 5 Determination of four nitrofurans metabolites residues in aquatic products in 10 cities of Shaanxi %

2.5 水产品中4种硝基呋喃类药物的混用情况分析

检测结果表明，咸阳的2份鱼样(草鱼)和商洛的1份鱼样(鲤鱼)中同时检出AOZ、AMOZ、SEM、AHD4种代谢物；商洛的1份鱼样(鲤鱼)中同时检出了AOZ、AMOZ、SEM3种代谢物；渭南的2份鱼样(草鱼和鲤鱼)同时检出了AOZ和AMOZ2种代谢物。该结果说明，咸阳的草鱼、商洛的鲤鱼、渭南的草鱼和鲤鱼在养殖或运输过程中使用过多种硝基呋喃类药物。

3 讨 论

3.1 硝基呋喃代谢物的检测方法

目前，国际和国内都针对4种硝基呋喃代谢物制定了高灵敏度、高特异性的液相色谱-串联质谱检测方法及评价标准[23-24]，本研究参照GB/T21311-2007《动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法-高效液相色谱/串联质谱法》[25]，根据现有仪器、试剂和实际情况对检测方法进行了优化，采用UPLC-MS/MS方法检测，内标法定量，优化后的方法样品前处理过程简单，缩短了检测时间，样品用量较少，灵敏度和回收率高，保证了检测结果的准确性。

3.2 陕西省市售水产品中4种硝基呋喃代谢物的残留状况

陕西省地处内陆，本地水产品较少，草鱼、鲤鱼、鲶鱼和鲫鱼等鱼种多由本地生产，日常消费的其他部分鱼种由东南沿海运输购进。东南沿海地区水产资源丰富，水产品进出口贸易发达，水产品中兽药残留检测频率较高，欧安等[26]的研究结果显示，2007-2012年湛江出口水产品硝基呋喃代谢物的总检出率为1.9%，在2007-2011年呈递减趋势，2012年有所上升。本试验结果显示，陕西省市售水产品中4种硝基呋喃代谢物的总检出率为6.5%，高于湛江地区的检出率，说明陕西销售的水产品在养殖运输过程中存在违规使用硝基呋喃类药物的现象，应该追根溯源，减少食品安全隐患。

本试验结果显示，陕西省市售水产品中AOZ、AMOZ、AHD、SEM的检出率分别为8.3%，7.5%，5.0%和5.0%，以AOZ的检出率最高。岑小青等[27]研究显示，2003-2005年湛江口岸出口水产品中4种硝基呋喃代谢物的检出率为AOZ>SEM>AMOZ>AHD，可见4种硝基呋喃类药物中呋喃唑酮的使用频率最高。而同期施东华等[28]的研究显示，2004年启东地区出口小龙虾产品中，SEM检出率高达52%(26/50)，AOZ未检出，呋喃西林违规使用呈上升趋势，呋喃它酮和呋喃妥因在水产养殖中几乎不用。可见不同地区、不同水产品中硝基呋喃类药物的使用存在差异。

本试验发现，从陕西省10个地市采集的16种120份鱼样中4种硝基呋喃代谢物的样品检出率为15.0%(18/120)，武昌鱼、罗非鱼、草鱼、鲶鱼、鲤鱼和鲫鱼的检出率分别为100.0%，100.0%，20.6%，15.4%，15.2%和6.3%，其余10种鱼中未检出。2份武昌鱼样品中有1份检出AHD，另1份检出SEM，1份罗非鱼样品检出SEM，2种鱼的检出率均为100.0%，这可能与采样份数过少有关，因此不能简单地认为武昌鱼和罗非鱼的检出率较高；但是34份草鱼样品和33份鲤鱼样品均检出了4种代谢物，13份鲶鱼样品检出AOZ和AHD，16份鲫鱼样品检出AMOZ，因此认为陕西市售的草鱼、鲤鱼、鲶鱼和鲫鱼安全性较低，而这几种鱼正是群众日常消费量较大且多为本地养殖的鱼类，应该引起重视。

草鱼和鲤鱼中均检出4种硝基呋喃代谢物，鲶鱼检出AOZ、AHD，武昌鱼检出AHD、SEM，鲫鱼检出AMOZ，罗非鱼检出SEM，且草鱼中4种代谢物的平均含量均远高于其他鱼类，这可能是由于草鱼更易生病，在其养殖、运输过程中使用硝基呋喃类药物的情况更为普遍，也可能是由于草鱼基质与代谢物结合更为紧密，药物分解速度慢。

本次检测抽样涵盖陕西省陕南、关中、陕北共10个地市的大型水产品流通场所，各地抽样量相同，地区代表性较好。从咸阳、商洛、延安、渭南、宝鸡和西安6个地区水产品中检出了硝基呋喃代谢物，其中咸阳、商洛检出率较高，4种代谢物AOZ、AMOZ、AHD、SEM均有检出，渭南检出2种代谢物AOZ、AMOZ，延安只检出1种代谢物AOZ，宝鸡和西安只检出1种代谢物SEM；安康、汉中、榆林、铜川未检出。说明咸阳、商洛销售的水产品中使用硝基呋喃类药物的情况较为普遍。

值得注意的是，来自咸阳的2份草鱼和来自商洛的1份鲤鱼中同时检出4种代谢物AOZ、AMOZ、AHD、SEM，来自商洛的另1份鲤鱼中同时检出了AOZ、AMOZ、SEM，来自渭南的1份草鱼和1份鲤鱼同时检出了AOZ和AMOZ。说明咸阳的草鱼、商洛的鲤鱼、渭南的草鱼和鲤鱼，在养殖或运输过程中使用过多种硝基呋喃类药物。

4 结 论

陕西省10地市的120份市售水产品样品中，4种硝基呋喃代谢物均有检出，其中以AOZ的检出率最高；16种鱼种中，武昌鱼、罗非鱼、草鱼、鲶鱼、鲤鱼和鲫鱼有硝基呋喃代谢物检出，而鲢鱼、金昌鱼、鲈鱼等10种鱼未检出硝基呋喃代谢物；草鱼和鲤鱼均检出4种代谢物，且草鱼中4种代谢物残留的平均水平均远高于其他鱼类；10个地市中有6个地市市售水产品检出了硝基呋喃代谢物，其中咸阳、商洛检出率较高。咸阳、商洛、渭南市售水产品在养殖或运输过程中有使用多种硝基呋喃类药物的情况。陕西省部分地区、部分鱼种硝基呋喃类药物残留水平超标，草鱼、鲤鱼、鲶鱼和鲫鱼等当地养殖的鱼类安全性较低，应该引起有关食药监部门的足够重视。

[1] 王习达,陈 辉,左健忠,等.水产品中硝基呋喃类药物残留的检测与控制 [J].现代农业科技,2007(18):152-153,155.

WangXD,ChenH,ZuoJZ,etal.Determinationandcontrolofnitrofuransresiduesinaquaticproducts[J].ModernAgricultureScienceandTechnology,2007(18):152-153,155.(inChinese)

[2]XuWH,ZhuXB,WangXT,etal.Residuesofenrofloxacin,furazolidoneandtheirmetabolitesinNiletilapia(Oreochromis niloticus) [J].Aquaculture,2006,254:1-8.

[3] 赵 艳,张凤枰,刘耀敏.超高效液相色谱-串联质谱法测定凡纳滨对虾中的硝基呋喃代谢物残留 [J].南方水产科学,2011,7(4):55-60.

ZhaoY,ZhangFP,LiuYM.DeterminationofresiduesofnitrofuranmetabolitesinLitopenaeus vannameibyUPLC-MS/MS[J].SouthChinaFisheriesScience,2011,7(4):55-60.(inChinese)

[4] 沈美芳,宋红波,丁 涛,等.酶联免疫法与LC-MS/MS法测定水产品中呋喃唑酮代谢物 [J].食品科学,2008,29(5):363-366.

ShenMF,SongHB,DingT,etal.Enzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)andLC-MS/MSfordeterminationoffurazolidoneresiduesinaquaticproducts[J].FoodScience,2008,29(5):363-366.(inChinese)

[5]CooperM,MulderJ,VanRhijnA,etal.Depletionoffournitrofuranantibioticsandtheirtissue-boundmetabolitesinporcinetissuesanddeterminationusingLC-MS/MSandHPLC-UV[J].FoodAdditivesandContaminants,2005,22:406-414.

[6] 葛宝坤,王云凤,常春艳,等.测定鸡肉、水产品中四种硝基呋喃类药物残留量的固相萃取-液相色谱法 [J].分析测试学报,2003,22(5):91-93.

GeBK,WangYF,ChangCY,etal.Determinationofthepesticideresiduesoffuraltadon,furacilin,titrofurantoineandfurazolidonuminchicken,fish,shrimpbySPE-HPLC[J].JournalofInstrumentalAnalysis,2003,22(5):91-93.(inChinese)

[7]HoogenboomLAP,vanBruchemGD,SonneK,etal.Absorptionofamutagenicmetabolitereleasedfromprotein-boundresiduesoffurazolidone[J].EnvironmentalToxicologyandPharmacology,2002,11(3):273-287.

[8] 王 媛,蔡友琼,贾东芬,等.高效液相色谱法检测水产品中硝基呋喃类代谢物残留量 [J].分析试验室,2009,28(12):86-90.

WangY,CaiYQ,JiaDF,etal.Determinationofnitrofuranmetaboliteresiduesinaquaticproductsbyhighperformanceliquidchromatography[J].ChineseJournalofAnalysisLaboratory,2009,28(12):86-90.(inChinese)

[9]EuropeanCommunities.CommissionRegulation(EC)No.1442/95:AmendingannexesⅠ,Ⅱ,ⅢandⅣforCouncilRegulation(EEC)No.2377/90layingdownacommunityprocedurefortheestablishmentofmaximumresiduelimitsofveterinarymedicinalproductsinfoodstuffsofanimalorgin[J].OfficialJournalofEuropeanCommunities, 1995(L143):26-30.

[10] 祝伟霞,刘亚风,梁 炜.动物性食品中硝基呋喃类药物残留检测研究进展 [J].动物医学进展,2010,31(2):99-102.

ZhuWX,LiuYF,LiangW.Progressonnitrofurandrugresiduesinanimal-bornefood[J].ProgressinVeterinaryMedicine,2010,31(2):99-102.(inChinese)

[11] 中华人民共和国农业部.农业部783号公告-1-2006:水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法 [S].北京:中国标准出版社,2006.

TheMinistryofAgricultureofthePeople’sRepublicofChina.No.783-1-2006bulletinofministryofagriculture:ThedeterminationofnitrofuranmetabolicresiduesinaquaticproductsbyLC-MS/MSmethod[S].Beijing:ChinaStandardPress,2006.(inChinese)

[12]ConneelyA,NugentA,KeeffeMO.Useofsolidphaseextractionfortheisolationandclean-upofaderivatisedfurazolidonemetabolitefromanimaltissues[J].Analyst,2002,127(6):705-709.

[13] 蒋宏伟.酶联免疫技术在动物产品中硝基呋哺类药物残留检测的应用 [J].陕西农业科学,2006(5):53-55.

JiangHW.ELISAdetectionofresiduesofthenitro-furanchemicalsintheanimalproducts[J].ShaanxiJournalofAgriculturalSciences,2006(5):53-55.(inChinese)

[14]MccrachenBJ,KennedyDG.DeterminationoffurazolidoneinanimalfeedsusingHPLCwithUVandthermosprayMSdetection[J].JofChromatographyA,1997,771(1/2):349-354.

[15] 林黎明,林回春,刘心同,等.固相萃取高效液相色谱-质谱法测定动物组织中硝基呋喃代谢产物 [J].分析化学,2005,33(5):707-710.

LinLM,LinHC,LiuXT,etal.Determinationofnitrofuranmetablolitesinanimaltissuesbyhighperformanceliquidchromatography-massspectrometryandstudyoftheirresidualdiscipline[J].ChineseJournalofAnalyticalChemistry,2005,33(5):707-710.(inChinese)

[16] 郭德华,汪国权,王东辉,等.高效液相色谱串联质谱法测定动物源性食品中硝基呋喃类代谢物残留量 [J].化学分析计量,2005,14(4):16-18.

GuoDH,WangGQ,WangDH,etal.DeterminationofthenitrofuranmetaboliteresiduesinanimaloriginfoodbyHPLC-tandemmassspectrometry[J].ChemicalAnalysisandMeterage,2005,14(4):16-18.(inChinese)

[17] 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局,中华人民共和国出入境检验检疫局.SN/T1627-2005 进出口动物源食品中硝基呋喃类代谢物残留量测定方法：高效液相色谱串联质谱法 [S].北京:中国标准出版社,2005.

GeneralAdministrationofQualitySupervision,InspectionandQuarantineofthePeople’sRepublicofChina,ChinaEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau.SN/T1627-2005Determinationofmerabolitesofnitrofuransresiduesinanimaloriginfoodforimportandexport:HPLC-MS/MS[S].Beijing:ChinaStandardPress,2005.(inChinese)

[18]ChuPS,LopezMI.Liquidchromatography-tandemmasssp-ectrometryforthedeterminationofprotein-boundresiduesinshrimpdosedwithnitrofurans[J].JournalofAgriculturalandFoodChemistry,2005,53(23):8934-8939.

[19]FerretiG,CilitarealeC,PalleschiL,etal.Multi-residuemethodforthedeterminationofnitufuransmetabolitesineggusingliquidchromatographycoupledtotandemmassspectrometry[J].JVetPharmacolTherap,2006,29(Suppl1):129-180.

[20]LestonS,NunesM,FreitasA,etal.ALC-MS/MSmethodologytodeterminefuraltadoneresiduesinthemacroalgaeUlvalactuca[J].JournalofChromatographyB,2011,879(32):3832-3836.

[21]RadovnikovicA,MoloneyM,ByrneP,etal.Detectionofban-nednitrofuranmetabolitesinanimalplasmasamplesusingUHPLC-MS/MS[J].JournalofChromatographyB,2011,879(2):159-166.

[22]AnH,HenryM,CainT,etal.Determinationoftotalnitrofuranmetabolitesinshrimpmuscleusingliquidchromatography/tandemmassspectrometryintheatmosphericpressurechemicalionizationmode[J].JournalofAOACInternational,2012,95(4):1222-1233.

[23]LeitnerA,ZöllnerP,LindnerW.Determinationofthemetabolitesofnitrofuranantibioticsinanimaltissuebyhigh-performanceliquidchromatography-tandemmassspectrometry[J].JournalofChromatographyA,2001,939(1):49-58.

[24] 徐维海,林黎明,朱校斌,等.HPLC/MS法对呋喃唑酮及其代谢物AOZ在罗非鱼体内残留研究 [J].上海水产大学学报,2005,14(1):35-39.

XuWH,LinLM,ZhuXB,etal.TheresearchofresiduesoffurazolidoneanditsmetaboliteintilapaiasbyHPLC/MS[J].JournalofShanghaiUniversity,2005,14(1):35-39.(inChinese)

[25] 中国国家标准化管理委员会.GB/T21311-2007动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法高效液相色谱/串联质谱法 [S].北京:中国标准出版社,2007.

StandardizationAdministrationofthePeople’sRepublicofChina.GB/T21311-2007Determinantionofresiduesofnitrofuranmetabolitesinfoodstuffsofanimalorigin-HPLC-MS/MSmethod[S].Beijing:ChinaStandardPress,2007.(inChinese)

[26] 欧 安,李红权,蒋方军,等.湛江出口水产品质量安全现状及监管对策研究 [J].食品安全质量检测学报,2013(5):1596-1600.

OuA,LiHQ,JiangFJ,etal.ResearchonqualityanalysisandregulatorycountermeasuresofexportedaquaticproductsinZhanjiang[J].JournalofFoodSafety&Quality,2013(5):1596-1600.(inChinese)

[27] 岑小青,蔡 泓.湛江口岸出口水产品药物残留检测结果分析 [J].中国国境卫生检疫杂志,2006,29(1):49-51.

CenXQ,CaiH.AnalysisofdrugresidueinmarineproductatZhanjiangport[J].ChineseJournalofFrontierHealthandQuarantine,2006,29(1):49-51.(inChinese)

[28] 施东华,卜仕金,李 建,等.2004年启东地区小龙虾中氯霉素、硝基呋喃类代谢物的残留调查 [C]//中国畜牧兽医学会动物药品学分会.2006年学术年会论文集.北京：中国农业出版社,2006:68-72.

ShiDH,BuSJ,LiJ,etal.InvestigationofchloramphenicolandnitrofuranmetabolitesresiduesincrawfishproduetsofQidong[C]//ChineseAssociationofAnimalandVeterinaryScience,AssociationofAnimalPharmaceuticalScience.Proceedingsofthe2006SymposiumofVeterinaryDrugBranch.Beijing:ChinaAgriculturePress,2006:68-72.(inChinese)

Determination of four nitrofurans metabolites residues in aquatic products in Shaanxi Province

ZHANG Yi-bei1,YUE Tian-li1,QIAO Hai-ou2,JIANG Xu-peng1,JIA Ru1, LI Lu1

(1CollegeofFoodScienceandEngineering,NorthwestA&FUniversity,Yangling,Shaanxi712100,China; 2ShaanxiProvinceCenterforDiseaseControlandPrevention,Xi’an,Shaanxi710054,China)

【Objective】 The purpose of the study was to determine levels of four nitrofurans metabolites residues in commercial aquatic products in Shaanxi Province,and provide reference for food security.【Method】 A total of 16 kinds of 120 fish samples were collected randomly from major supermarkets and farmers markets in Xi’an,Baoji,Ankang,Yan’an,Xianyang,Weinan,Shangluo,Tongchuan,Hanzhong and Yulin,in Shaanxi Province.After being homogenated,16 h derivation was conducted with 2-nitrobenzaldenhyde under acidic condition.Extraction and purification were conducted by Oasis HLB solid phase extraction column,and concentrations of four nitrofurans metabolites residues in samples were quantified by ultra-performance liquid,chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS),and isotope internal standard method.The detection results of furazolidone metabolites 3-amino-2-oxalidone (AOZ),furaltadone metabolites 5-morpholinomethyl-3-amino-2-oxalidinone (AMOZ),nitrofurantoin metabolites 1-amino-hydantoin (AHD),and nitrofurazone metabolites semicarbazide (SEM) in aquatic products were counted,and illegal use of nitrofurans drugs in aquaculture was analyzed.【Result】 The total detection rate of four nitrofurans metabolites was 6.5%,and that of furazolidone metabolites 3-amino-2-oxalidone (AOZ) was the highest of 8.3%.The detection rate of samples in 16 kinds of aquatic products was 15.0%.The detection rate of fish species was 37.5% with the rates in bluntnose block bream,tilapia,grass carp,catfish,carp,and crucian carp of 100.0%,100.0%,20.6%,15.4%,15.2% and 6.3%,respectively,while they were not detectable in other fish samples.The mean levels of four nitrofurans metabolites in grass carp were higher than other fish species.The detection rates of four nitrofurans metabolites in Xianyang,Shangluo,Yan’an,Weinan,Baoji,and Xi’an were 22.9%,20.8%,8.3%,8.3%,2.1% and 2.1%,respectively.Mixed use of nitrofurans drugs was found in grass carp from Xianyang,carp from Shangluo,and in grass carp and carp from Weinan.【Conclusion】 Levels of nitrofurans drugs residues in some aquatic products of some areas were higher than the standards in Shaanxi Province.The security levels of grass carp,carp,catfish and crucian carp were low and attention should be paid by food and drug supervision and administration department.

aquatic products;nitrofurans metabolites;residue determination;Shaanxi province;food safety

时间:2015-09-09 15:41

10.13207/j.cnki.jnwafu.2015.10.027

2014-02-28

2013年度西北农林科技大学“大学生创新创业训练计划”校级重点项目(1201310712174)

张艺蓓(1993-)，女，陕西西安人，在读本科，主要从事食品安全研究。E-mail：zhangyibei0666@163.com

岳田利(1965-)，男，陕西宝鸡人，教授，博士，博士生导师，主要从事食品与发酵工程及食品安全控制技术研究。 E-mail：yuetl@nwsuaf.edu.cn

TS207.3

A

1671-9387(2015)10-0195-09

网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/61.1390.S.20150909.1541.054.html