玛咖组培苗生根培养基的筛选研究
2015-01-07朱秀梅李树锋张顺仁苏碧玉彭智娥
朱秀梅,李树锋,王 军,张顺仁,苏碧玉,彭智娥
(大理州农业科学推广院药植所,云南大理671600)
玛咖组培苗生根培养基的筛选研究
朱秀梅,李树锋,王 军,张顺仁,苏碧玉,彭智娥
(大理州农业科学推广院药植所,云南大理671600)
2012年开始对玛咖进行了组培探索性试验,就影响玛咖组培苗生根培养基配方中活性炭、MS配方的无机盐浓度及蔗糖用量对生根的影响进行试验分析研究。结果表明,在玛咖组培苗生根配方系列试验中以不加活性炭为宜,MS培养基中加入蔗糖30 g/L对平均生根率诱导效果最佳。从而为玛咖优质种苗的快速繁殖提供很好的技术支撑,为玛咖产业的更好发展做好技术后盾。
玛咖;组培生根;研究
玛咖主产于南美洲秘鲁海拔3 500~4 000 m的安弟斯高原,属十字花科独行菜属一年生草本植物,现主要分布在秘鲁中部的Puno生态区和秘鲁东南部城市Puno[1]。对增强人体免疫力,调节内分泌、抗衰老、抗疲劳等方面具有一定的药用功效[2]。2002年以来,相继在丽江和迪庆试种成功,到2011年示范推广种植面积达400多hm2,但种子价格高,种性易退化,为了加快全州高寒山区种植业结构调整的步伐,扩大山区农民群众增收致富的途径,在多点试种观察优选玛咖种植适宜区域的基础上,开展玛咖组培试验研究。迄今为止,对玛咖的研究主要集中在田间栽培技术研究、成分分析和药理学作用等方面,对组织培养的系统研究少见报道。仅有王亚丽等研究了光质对玛咖愈伤组织生长、分化的影响[3],程华等以玛咖无菌苗的子叶为外植体进行愈伤组织诱导及形态发生研究[4]。本试验研究目的是筛选适宜培养基和纯化玛咖良种特性,避免种性退化,加快玛咖组培苗快繁工作,提供玛咖生产基地组培苗,为玛咖产业发展做好技术后盾。
1 材料与方法
1.1 供试材料
该试验于2013年1-4月在大理州农科院药植所组培室进行,供试材料为本室的玛咖组培瓶苗。在增殖培养基MS+6-BA1.0~3.0 mg+NAA0.1~2.0 mg+蔗糖30 g+琼脂6.8 g,pH值5.8,每天光照11~12 h,光强1 000~2 000 Lx,温度19~22℃下培养30~40 d。接种时剪净苗丛枯茎叶,然后分剪成2~3 cm壮苗作接种材料。
1.2 试验设计
本试验分两组,第1组:培养基中活性炭用量试验。试验采用单因素随机区组设计,设4个处理,3次重复,即加活性炭0 g/L、0.5 g/L、1 g/L、2 g/L 4个处理。
第2组:培养基配方中的无机盐浓度及蔗糖用量试验。试验采用2因素3水平随机区组设计,重复3次(r=3)。培养基配方的无机盐浓度(A因素):A1(MS)、A2(1/2 MS)、A3(1/4 MS);蔗糖用量(B因素):B1(20 g/L)、B2(30 g/L)、B3(40 g/L)。
1.3 试验指标及调查
生长激素选用NAA 0.2 mg/L,每个处理制作0.5 L培养基,每瓶接种5苗,每个处理共12瓶,在相同培养条件下培养40 d,随机取6瓶观察记录,调查统计组培苗平均生根率,进一步作方差分析。
2 结果与分析
2.1 培养基配方中活性炭对玛咖组培苗生根的影响
由表1可见,在MS培养基中不加活性炭玛咖组培苗平均生根率最高为74.7%,随着活性炭用量的增加玛咖组培苗平均生根率呈明显下降趋势,当活性炭用量为2 g/L时,所接种的玛咖组培苗最先枯死。
表1 培养基配方中添加活性炭对玛咖组培苗平均生根率的影响
表2 不同无机盐浓度(A)和蔗糖用量(B)组合的玛咖组培苗平均生根率
2.2 培养基的无机盐浓度及蔗糖用量对玛咖组培苗生根的影响
表2、表3分析表明,培养基的无机盐浓度对玛咖组培苗平均生根率影响差异不显著,各水平之间没有实质性差异。
由表2、表3分析表明,不同蔗糖用量的玛咖组培苗平均生根率差异显著,培养基中用30 g/L蔗糖时玛咖组培苗平均生根率最高,为64.07%,与培养基中用40 g/L蔗糖处理的平均生根率差异达显著水平、与培养基中用20 g/L蔗糖处理的平均生根率差异达极显著水平;培养基中用40 g/L蔗糖处理的平均生根率为50.79%,与培养基中用20 g/L蔗糖处理的平均生根率差异达显著水平。
表3 无机盐浓度(A)和蔗糖用量(B)不同水平下的生根率
由表4分析表明,无机盐浓度和蔗糖用量组合A1B2、A2B2、A3B2、A2B1、A3B3、A2B3、A1B3等7个组合之间无显著性差异,无机盐浓度和蔗糖用量组合A1B2的生根率(74.70%)与无机盐浓度和蔗糖用量组合A3B1的生根率(38.89%)及无机盐浓度和蔗糖用量组合A1B1的生根率(17.22%)差异达极显著水平。
3 讨论
(1)试验表明,在玛咖组培苗生根培养基配方中随着活性炭用量的增加玛咖组培苗平均生根率呈明显下降趋势,甚至会致组培苗过早枯死。说明在玛咖组培苗生根培养基配方中不宜加入活性炭。
(2)培养基配方的无机盐浓度主效无显著差异,蔗糖用量主效有显著差异,以培养基加入蔗糖30 g/L对平均生根率诱导效果最佳,与加入蔗糖40 g/L有显著差异,而与加入蔗糖20 g/L有极显著差异。说明培养基加入蔗糖30 g/L对玛咖组培苗平均生根率诱导效果最佳。
(3)影响玛咖组培苗生根的因素很多,本试验仅从活性炭、无机盐浓度、蔗糖用量对平均生根率的影响进行了探索,其它相关因素及对策还有待进一步试验完善。
[1]Quiros CF,R.Aliaga R.Maca.Andean roots and tubers:ahipa,a-acacha,maca and yacon[A].Hermann M.Heller J(Eds).Promoting conservation and use of unde rutilized and neglected crops[C].21.Rome(Italy),1997:175-195.
[2]Ya liWang,Yuc hunWang,BrianMcNeil,et a1.Maca:Andeancrop with multi-pharmacologicalfunctions[J].FoodResearchInternational,2007,40:783-792.
[3]王亚丽,王晓东,赵兵,等.光质对玛咖愈伤组织生长、分化的影响[J].过程工程学报,2007,7(4):782-785.
[4]程华,余龙江,胡琼月,等.不定芽培养建立玛咖微繁殖[J]. Agricultural science&technology,2004,5(4):18-22.
2015-01-14
朱秀梅(1974-),女,汉族,农艺师,主要从事药用植物组织培养技术研究等工作。