SYSMEX XN-3000血液分析仪检测外周血有核红细胞的应用评估

赵 媛，胡恩亮，郑 恬，王 妍，郑善銮

(第四军医大学西京医院检验科，陕西西安710032)

有核红细胞(nucleated red blood cell，NRBC)一般仅存在于骨髓中，在出生1周内的新生儿外周血中可见到少量的NRBC，如成人外周血涂片中出现NRBC均属病理现象[1]，常见于晚幼红细胞或中幼红细胞多见的增生性贫血，如各种溶血性贫血等，以及原红细胞、早幼红细胞多见的红血病、红白血病，亦可见于髓外造血、骨髓纤维化、骨髓转移癌、严重缺氧等疾病。因此，准确计数血液中NRBC对鉴别各种血液疾病具有重要的临床意义。计数NRBC最经典的方法是用显微镜油镜分类计数瑞氏染色血涂片中100个白细胞(white blood cell，WBC)时所见到的NRBC数量，即NRBC在血液中的百分率(NRBC%)[2]。SYSMEX XN-3000 血液分析仪(简称XN-3000)可对外周血中NRBC进行准确计数，计数原理是利用荧光染色对细胞核进行染色，流式法测定侧向荧光强度(反映细胞核酸含量多少)和前向散射光强度(反映细胞体积大小)，将其与 WBC、红细胞以及血小板区别。为了解XN-3000对外周血NRBC计数的准确性及异常提示信息的可靠性，本研究将XN-3000检测NRBC结果与人工显微镜镜检法进行了比较和评价。

材料和方法

一、研究对象

第四军医大学西京医院住院患者96例，男61例，女35例，其中确诊血液病患者72例，非血液病患者24 例，年龄为(41.34 ±6.23)岁。

二、仪器与试剂

XN-3000和SYSMEX-SP10推片机配套试剂和质控品，BASO染液。OLYMPUS显微镜、Cellavison自动阅片机和乙二胺四乙酸二钾血液抗凝管。

三、NRBC计数

1.XN-3000仪器法 严格按标准操作规程执行，在室内质控在控后，检测乙二胺四乙酸二钾抗凝血标本，并在4 h内检测完毕。

2.显微镜镜检法 取乙二胺四乙酸二钾抗凝血标本，在SYSMEX-SP10推片机(BASO染液)制备血片，2 h内完成。形态学检查由经细胞形态学专业培训的主管技师按全国临床检验操作规程进行显微镜镜检，分类200个WBC，计数NRBC数量，以NRBC/100WBC表示。

四、统计学方法

结 果

一、重复性试验

取NRBC计数百分数为高值、中值、低值的标本，由专业人员在30 min内进行重复计数各5次，结果显示XN-3000检测重复性好。见表1。

表1 NRBC%重复性试验结果

二、敏感性和特异性

以显微镜镜检法为参照标准，32份标本XN-3000检测NRBC阴性，血片手工复检出现1例NRBC阳性;64例标本 XN-3000检测 NRBC阳性，血片手工复检出现62例阳性;XN-3000检测NRBC的敏感性 98.41%(62/63)，特异性为93.94%(31/33)，假阳性率为3.13%(2/64)，假阴性率为3.13%(1/32)。见表2。

表2 XN-3000和显微镜镜检法检测NRBC的结果比较

三、XN-3000与显微镜计数NRBC的相关性

XN-3000提示NRBC阳性的标本64例，以分类100个WBC所算得的NRBC计数百分数和显微镜计数的NRBC计数百分数显示出良好的线性相关(r2=0.867)。见图1。

图1 2种方法计数外周血NRBC的相关性

NRBC计数的细胞数在(0～50)×1012/L时，r2=0.931;NRBC计数的细胞数在(0～200)×1012/L时，r2=0.957。2种方法 64例标本的NRBC计数百分数进行配对t检验，差异无统计学意义(P=0.019)。

讨 论

外周血中NRBC出现和数量与诸多血液病诊断和预后有关[3-8]，因而临床上很关注。作为实验室是否能提供快速、准确的检测结果显得尤为重要。传统的显微镜手工法在时间和人员上有一定局限性，因此XN-3000检测外周血NRBC在保证结果准确性的同时，大大缩短了检测时间，提高了工作效率，第一时间为临床提供了诊断支持。

XN-3000通过计算NRBC与100个白细胞的比值(NRBC/100WBC)对白细胞计数结果自动校准。与手工显微镜镜检法相比，XN-3000测定NRBC结果客观，并可通过散点图清楚显示NRBC的分布，有助于及时发现有NRBC的异常标本。在本研究中64例XN-3000提示阳性的标本与显微镜镜检法检测结果比较，相关性良好，(r2＞0.867)，配对 t检验显示 P=0.019，表明 XN-3000基本可替代显微镜镜检法检测外周血NRBC。

XN-3000检测NRBC的敏感性为98.41%，特异性为93.94%，假阳性率为3.13%。由于仪器计数细胞多，无人为主观误差和血涂片上细胞分布的误差，其敏感性更高，在NRBC数值较低时，人工计数未见NRBC是可预见偏差，也是造成少量假阳性结果的主要原因。至于假阴性率3.13%，可能由于个人对细胞形态识别差异、NRBC在涂片上分布差异以及检验人员在选择计数视野的差异所致。

综上所述，使用XN-3000进行外周血NRBC计数，其检测结果重复性好，方法可靠，操作简便快速，正确性高，有一定的临床应用价值。

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