2型糖尿病下肢大血管病变患者血清β淀粉样肽40与晨尿微量白蛋白关系的探讨

苏 春，程 江，廖新华，张亚婷，肖 莉，肖体梅

(1.新疆生产建设兵团第七师医院检验科，新疆奎屯833200;2.新疆石河子大学第一附属医院检验科，新疆石河子832008)

目前，糖尿病的发病率在全球呈明显上升趋势，糖尿病下肢血管病变的发生率也明显增加，已成为糖尿病慢性并发症之一[1]。大血管病变是糖尿病患者致残、致死的主要原因。其中下肢血管病变会导致糖尿病足，甚至引起整个下肢溃疡和坏疽，严重者可导致截肢，严重影响糖尿病患者的生活质量。β淀粉样肽 (amyloid-beta，Aβ)是一种含有39～42个氨基酸的多肽，是β淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein，APP)跨膜分泌的产物。正常生理状态下，体内APP多经过α分泌酶和γ分泌酶作用，各产生Aβ片段的分泌型APP和C端片段。在病理状态下，APP可通过β分泌酶和γ分泌酶作用，产生不同的氨基酸片段(Aβ40和Aβ42等)，其中约90%为 Aβ40。有研究显示，糖尿病大血管病变患者血清Aβ40水平升高，可能参与了内皮细胞的损伤作用[2-4]。尿微量白蛋白(microalbumin，mAlb)已被广泛用于评价早期肾功能损害的程度，而且越来越多的证据表明mAlb尿是动脉粥样硬化疾病的一项独立危险因子[5]。我们对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)患者血清Aβ40及晨尿mAlb水平进行检测，旨在探讨它们在糖尿病下肢血管并发症中的作用。

材料和方法

一、研究对象

选取2013年1至10月石河子大学第一附属医院和新疆生产建设兵团第七师医院内分泌科住院及门诊T2DM患者80例，按有无下肢大血管病变分为T2DM下肢大血管病变组(37例，男18例，女19例，年龄34～72岁;去除其它原因所致的下肢大血管病变)和T2DM无下肢大血管病变组(43例，男19例，女24例，年龄31～71岁)。所有患者均符合1999年世界卫生组织(World Health Organization，WHO)T2DM诊断标准。下肢血管病变诊断根据彩色多普勒超声检查证实或下肢血管造影存在下肢动脉硬化、斑块形成或血管闭塞。选取同期健康志愿者40名作为正常对照组，男23例，女17例，年龄31～69岁。

二、方法

1.标本留取 所有对象取早晨8～10时尿液5 mL(留尿期间避免剧烈活动及高蛋白饮食)，1 500×g离心5 min，取上层尿液待测。用BD促凝分离胶真空采血管采集研究对象清晨空腹静脉血3 mL，室温静置30 min，1 500×g离心10 min，分离血清待测。

2.各项指标的检测 血清Aβ40测定采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assaye，ELISA)，试剂盒购自宁波美康生物科技有限公司，仪器为FAME全自动酶标仪(瑞士HAMILTONCS公司);晨尿mAlb测定采用免疫比浊法，试剂由英国朗道试剂公司提供，仪器为OLYMPUS AU7500全自动生化分析仪;均严格按照试剂盒说明书操作。下肢大血管病变采用GE Systeam Five彩色多普勒超声仪检查。体重指数(body mass index，BMI)计算:BMI=体重(kg)/身高(m)2。晨尿mAlb阳性标准参照《诊断学》(第5版)的判断标准(晨尿mAlb＞20 mg/L)。

三、统计学方法

采用SPSS 17.0软件进行统计分析。计量资料呈正态分布，采用±s表示，组间比较采用独立样本t检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、各组血清Aβ40及晨尿mAlb水平比较

T2DM下肢大血管病变组血清Aβ40及晨尿mAlb水平明显高于T2DM无下肢大血管病变组和正常对照组(P＜0.01);T2DM无下肢大血管病变组血清Aβ40及晨尿mAlb水平亦高于正常对照组(P＜0.01)。3组之间年龄和BMI差异均无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 3组之间血清Aβ40和晨尿mAlb水平的比较 (±s)

表1 3组之间血清Aβ40和晨尿mAlb水平的比较 (±s)

注:与正常对照组比较，*P＜0.01;与T2DM无下肢大血管病变组比较，#P＜0.01

组别 例数 年龄(岁) BMI(kg/m2) Aβ40(pmol/L) mAlb(mg/L)T2DM 下肢大血管病变组 37 53 ±7 25.6 ±2.6 23.21 ±8.15*# 89.43 ±7.25*#T2DM 无下肢大血管病变组 43 52 ±5 26.2 ±2.7 12.35 ±9.50* 34.17 ±10.21*正常对照组40 49 ±6 24.3 ±2.5 4.38 ±2.50 8.12 ±7.25

二、晨尿mAlb阳性组及晨尿mAlb阴性组血清Aβ40水平比较

晨尿mAlb阳性组血清Aβ40水平明显高于晨尿mAlb阴性组(P＜0.01)。见表2。

表2 晨尿mAlb阳性组和阴性组血清Aβ40水平及下肢大血管病变发生率的比较

讨 论

T2DM患者大多数存在胰岛素抵抗，它可以使组织中糖原合酶激酶-3活性增强，从而引起Aβ40表达增强[6]。此外，胰岛素也可加强 Aβ40的表达，因此在胰岛素抵抗和高胰岛素血症的状态下，Aβ40表达明显增多[7]。Aβ40 可以和内皮细胞发生作用，产生较多的超氧化物，使内皮细胞的功能发生改变。此外，超氧化物自由基还可以和一氧化氮反应，生成过氧化亚硝酸盐，它对过氧化膜、平滑肌细胞有一定的损伤，引起血管壁淀粉样蛋白纤维堆积[2]。

本研究结果显示，正常对照组、T2DM无下肢大血管病变组、T2DM下肢大血管病变组血清Aβ40水平依次升高，差异均有统计学意义(P＜0.01)。说明了Aβ40可能与血糖、血脂及体重等这些糖尿病大血管病变的危险因素一样在糖尿病下肢血管病变的发生、发展中起重要的作用。因此，早期检测Aβ40水平可以为T2DM合并下肢血管病提供预测，为早期干预治疗提供依据。

本研究结果显示，晨尿mAlb阳性的T2DM患者下肢大血管病变的发生率明显增加，表明晨尿mAlb水平与Aβ40水平有一定的关系，mAlb也可能是糖尿病患者大血管病变的危险因素[8]。因此应加强对晨尿mAlb及血清Aβ40的筛查，早期发现大血管病变并给予积极的治疗，从而减少或延缓糖尿病下肢大血管病变的发生和发展，提高糖尿病患者的生活质量。

[1]李唐瑛，李伟，张旭日，等.2型糖尿病下肢血管病变的发生率及相关危险因素分析[J].中国热带医学，2008，8(2):254-256.

[2]许静宜.糖尿病血管内皮细胞损伤与β淀粉样肽的相关性研究[D].大连:大连医科大学，2012.

[3]许娜.β淀粉样肽40与糖尿病大血管病变的关系[D].大连:大连医科大学，2008.

[4]廖新华，冯罡.血清β淀粉样肽40与糖尿病下肢大血管病变[J].中国社区医师(医学专业)，2011，13(31):207.

[5]苏冬月，张韩，李丹丹.2型糖尿病下肢血管病变患者C反应蛋白与晨尿微量白蛋白的关系[J].河南大学学报:医学版，2010，29(3):213-215.

[6]RING DB，JOHNSON KW，HENRIKSEN EJ，et al.Seletive glycogen synthase kinase 3 inhibitors potentiate insulin activtion of glucose transport and utilization in vitro and in vivo[J].Diabetes，2003，52(3):588-595.

[7]SU Y，Ryder J，LIU B，et al.Lithium，a common drug for bipolar disorder treatment，regulates amyloid-beta precursor protein processing[J].Biochemistry，2004，43(22):6899-6908.

[8]张晓旸.2型糖尿病脂联素及尿微量白蛋白与大血管病变的关系[D].太原:山西医科大学，2011.