连钱草成熟期体内N、P、K 含量与产量、品质的相关性

刘晓鹏，孙小芳，江亚东，黄 勇，丁振国，李 力，蒋晓军

(1．湖北民族学院 生物科学与技术学院，湖北 恩施445000;2．南京同仁堂洪泽中药材科技有限公司，江苏 洪泽223200;3．南京医药股份股份有限公司 博士后工作站，江苏 南京210012)

连钱草为唇形科活血丹属植物活血丹［Glechoma longituba(Nakai)Kupr．］干燥地上部分，晒干;或鲜用．连钱草性味凉辛，微苦，微寒．归肝、肾、膀胱经［1］．连钱草具有利胆、利尿、抗菌、抗炎、降血糖、抗肿瘤以及抗腹泻等药理作用，主治黄疸型肝炎、胆囊炎、胆石症、疳积、肾结石、膀胱结石、多发性脓疡、疮痈肿痛、婴儿湿疹、跌打损伤、腮腺炎、牙痛等症［2］．

连钱草喜阴湿，生于田野、林缘、路边、林间草地、溪边河畔或村旁阴湿草丛中;对土壤要求不严;适宜在温暖、湿润的气候条件下生长．除西北部地区外，中国各地均有分布，尤以江苏产量大，质量优，为江苏产地道药材，主要分布在南京、盱眙等地的丘陵山区的湿润环境中．

连钱草大田种植条件下，施肥不但与产量密切相关，而且与品质关系很大．本文以大样本随机抽样方法，对两个地区的连钱草种植田块在收获期进行田间取样，采用数学方法，来分析植株N、P、K 含量与产量和品质的数量关系．

1 材料与方法

1．1 材料与试剂

试验于2009－10、2010－06、2010－10、2012－06 在连钱草收获期进行田间取样．取样总数90 个．江苏盱眙水冲岗连钱草为多年种植田块;江苏洪泽三河镇连钱草栽种时期为2009－05．连钱草成熟的植株取样后立即杀青、烘干，粉碎、过60 目筛，干燥保存．

硼酸、硫酸、溴甲酚绿、钼酸铵、偏钒酸铵、2，6－二硝基酚、无水乙醇、芦丁、亚硝酸钠、硝酸铝等均为分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司．

1．2 测定方法

1．2．1 连钱草氮、磷、钾的含量测定 植株氮含量测定采用凯氏定氮法［3］，磷含量测定采用钒钼黄比色法［3］，钾含量测定采用火焰光度法［3］．

1．2．2 连钱草总黄酮含量 采用紫外分光光度计法对连钱草药材总黄酮进行测定［4］．

标准曲线的制备:精密称取120℃常压干燥至恒重的芦丁对照品20．56 mg，置于100 mL 的容量瓶中，加60%乙醇约60 mL，密塞，超声使其溶解，放冷，加60%乙醇至刻度，摇匀，得芦丁标准溶液(0．2056 mg/mL)．精密量取芦丁标准溶液0、1．0、2．0、3．0、4．0、5．0、6．0 mL，分别置于25 mL 的容量瓶中，分别加水6、5、4、3、2、1、0 mL，加5%亚硝酸钠溶液1 mL，摇匀，放6 min，加三氯化铝试液1 mL．摇匀，放置6 min，再加5%的氧化钠溶液10 mL，加水至刻度，摇匀，以第1 管作空白对照在510 nm 处测吸光度．绘制浓度－吸光度曲线，求出回归程为y=0．096 3A－0．000 14，r=0．999 1;式中:Y代表照品浓度(mg/mL)，A代表吸光度．对照品在0～0．049 3 mg/mL范围内呈良好的线性关系．

连钱草总黄酮含量测定:称取连钱草粉末0．5 g，置于具塞锥形瓶中，加60%乙醇60 mL，密塞，称重，超声处理50 min．冷却至室温后再称重，用60%乙醇补足损失的重量，摇匀，离心，取上清为供试溶液．量取供试溶液3．0 mL，按标准曲线的制备方法测定总黄酮的含量．

2 结果与分析

2．1 连钱草体内氮、磷、钾含量与产量的关系

图1～3 分别为不同田块90 个样本的连钱草成熟期植株体内氮、磷、钾含量与产量的相关关系．

图1 连钱草成熟期体内氮含量与产量的关系Fig．1 Relationship between maturity nitrogen content and yield of Glechoma longituba

图2 连钱草成熟期体内磷含量与产量的关系Fig．2 Relationship between maturity phosphorus content and yield of Glechoma longituba

图3 连钱草成熟期体内钾含量与产量的关系Fig．3 Relationship between maturity potassium content and yield of Glechoma longituba

从图1 可以看出，连钱草产量与成熟期植株体内氮含量呈极显著直线关系，其回归方程为:y=16．697x+26．003(R2=0．639 4，样本数90)．亦即连钱草体内氮含量高的田块，其产量也极显著地高．因此，追施氮肥仍然是目前生产上提高产量最重要的技术措施．

从图2 可以看出，连钱草产量与成熟期植株体内磷含量呈显著直线关系，其回归方程为:y=51．203x+48．528(R2=0．323 1，样本数90)．从图3 可以看出，连钱草产量与成熟期植株体内钾含量呈显著直线关系，其回归方程为:y=16．909x+24．045(R2=0．419 7，样本数90)．同样，连钱草体内磷含量和钾含量高的田块，其产量也显著地提高．因此，在追施氮肥的同时，也应追施磷钾肥．

2．2 连钱草体内氮、磷、钾含量与总黄酮含量的关系

图4～6 分别为不同田块90 个样本的连钱草成熟期植株体内氮、磷、钾含量与总黄酮含量的相关关系．

图4 连钱草成熟期体内Fig．4氮 含R量ela与tio总nsh黄ip酮 b含etw量ee的n 关con系tents of maturity nitrogen and total flavonoid of Glechoma longituba

图5 连钱草成熟期体内Fig．5磷 含Re量la与tio总nsh黄ip酮 be含tw量ee的n c关on系tents of maturity phosphorus and total flavonoid of Glechoma longituba

图6 连钱草成熟期体内Fig．6钾 含Re量lat与ion总sh黄ip 酮be含tw量een的 c关on系tents of maturity potassium and total flavonoid of Glechoma longituba

从图4 可以看出，连钱草总黄酮含量与成熟期植株体内氮含量既没有显著的直线相关关系，也不呈现有显著相关性的二次抛物线关系．这表明，在目前的生产条件下，连钱草体内氮含量高的田块，其药材总黄酮含量并不一定低．因此，生产上适当追施氮肥并不一定会降低连钱草品质．

从图5 可以看出，连钱草总黄酮含量与成熟期植株体内磷含量呈显著直线关系，回归方程为:y=1．437x+4．4026(R2=0．326 2，样本数90)．从图6 可以看出，连钱草总黄酮含量与成熟期植株体内钾含量呈极显著直线关系，回归方程为:y=0．469x+3．741(R2=0．413 7，样本数90)．亦即连钱草体内磷、钾含量高的田块，药材总黄酮含量也高．这说明在目前生产条件下，追施磷肥和钾肥有利于提高连钱草品质．

2．3 连钱草产量与总黄酮含量的关系

对连钱草不同田块90 个样本的产量和总黄酮含量进行回归分析，结果如图7，连钱草产量与总黄酮含量呈现显著水平的二次相关关系．回归方程为:y=－0．000 2x2+0．06x+2．408 4(R2=0．209 4，样本数90)．

连钱草产量和总黄酮含量的这种抛物线关系，也反映出大田生产上的实际状况．在连钱草产量较低田块，增加产量的措施也有利于提高品质，但是在产量较高田块，继续增加产量的措施对品质不利．

图7 连钱草产量与总黄酮含量的关系(样本数90)Fig．7 Relationship between total flavonoid content and yield of Glechoma longituba(n=90)

3 结论与讨论

在目前生产条件下，追施氮肥是提高连钱草产量最直接最显著的措施之一;追施磷肥和钾肥也显著有利于提高产量．同时，追施磷肥和钾肥显著有利于提高连钱草总黄酮含量;而追施氮肥并不一定会降低品质，关键是追施的时间和总氮量．因此生产上应该强调通过追施氮、磷、钾肥料来同时提高产量和品质．

连钱草产量和总黄酮含量的关系是显著水平的抛物线关系．这种关系在一般药用植物特别是全草类药材生产上都存在［5－7］．协调产量和品质，是这类中药材高效优质栽培的目标．

当然，药材的产量和品质，除了受到施肥等生产技术措施的影响［8］，还受到气候、土壤等环境生态因子的制约．另外，连钱草收割时期以及收割次数对产量和品质的影响也很大［9］．

［1］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典［M］．1 部．北京:中国医药科技出版社，2010．

［2］ 宋锐，张云，丛晓东，等．连钱草的化学成分及生物活性研究进展［J］．中华中医药学刊，2010，28(12):2511－2514．

［3］ 孙磊．植物营养学实验［M］．北京:北京大学出版社，2012．

［4］ 郑杭生，李计萍，韩炜，等．紫外－可见分光光度法测定总黄酮含量的方法学考察要点［J］．中成药，2008，30(9):1364－1365．

［5］ 周佳民，尹小红，陈超君，等．施氮水平对广金钱草产量和活性成分含量的影响［J］．中国中药杂志，2010(12):1533－1536．

［6］ 肖文中，邓展来．不同栽培方式对青蒿生长情况及产量和青蒿素含量的影响［J］．中国现代中药，2008(4):44－45．

［7］ 姜宁，刘晓鹏，丁振国，等．连钱草总黄酮的超声辅助提取研究［J］．湖北民族学院学报:自然科学版，2014，32(3):241－244．

［8］ 张雁萍，杨志刚，陈显国．不同基肥施用量对连钱草生长情况及品质的影响［J］．安徽农业科学，2011，39(10):5773－5774．

［9］ 黄齐慧，陈小英．不同采收期对连钱草中总黄酮的影响［J］．国际医药卫生导报，2004，18(10):160－161．