眼睑基底细胞癌患者术后组织SOX18、整合素αvβ3表达与血管生成的关系

孙红兵 樊秀婷 龚莉华 (复旦大学附属中山医院青浦分院眼科，上海 201700)

肿瘤进展中血管新生明显，对促进肿瘤细胞增殖及肿瘤分化有重要作用〔1，2〕。SOX18是编码转录因子的发育基因，可以和其他转录因子或配体形成复合体，调控靶基因的表达，SOX18可能对肿瘤细胞的脉管生成和增殖有一定价值〔3，4〕。整合素αvβ3是细胞黏附分子的重要成员，不仅对细胞黏附起重要调控作用，还对细胞分化、凋亡和血管生成有一定价值〔5〕。白细胞分化抗原34(CD34)被认为是血管的重要标志物，其特异性强〔6〕。本研究关注眼睑基底细胞癌患者术后组织SOX18、整合素αvβ3表达对CD34阳性血管生成的作用。

1 材料与方法

1.1 临床资料 我院手术治疗的眼睑基底细胞癌患者的临床资料及术后蜡块组织为研究组，样本均经病理医师再次确诊，并符合世界卫生组织(WHO)中的诊断标准，共105例，男55例，女50例，年龄56～86岁，平均71.2岁。术前均未进行放疗和化疗。55例基底细胞乳头状瘤术后组织为对照组，其中男30例，女25例，年龄57～84岁，平均65.2岁。两组一般临床特征无明显差别，具有可比性。

1.2 SOX18、整合素 αvβ3和CD34蛋白的表达 SOX18、整合素αvβ3和CD34的浓缩液，正式检测前均进行预实验，选择染色强度最理想、背景最干净的配比浓度进行正式实验。应用免疫组化SABC法，采用DAB染色。操作由病理科主管技师完成，严格质量控制，努力减少误差。

1.3 SOX18、整合素αvβ3和CD34蛋白表达的判定 CD34以血管内皮细胞质染成棕黄色进行判断，以3个以上连续的内皮细胞或分支的血管认定为肿瘤间质的血管，选择5个密度最高的区域(400倍)进行计数，取平均值计为微血管密度(MVD)。SOX18以细胞核出现棕黄的颗粒为阳性反应细胞，整合素αvβ3以细胞质出现棕黄色颗粒为阳性细胞。SOX18、整合素αvβ3均计数5个400倍视野的细胞总数，计算阳性率的平均值。SOX18和整合素αvβ3以阳性细胞≥5%为阳性，以＜5%为阴性。

1.4 统计学处理 采用SAS6.12软件进行χ2检验或线性相关性分析。

2 结果

2.1 两组 SOX18、整合素 αvβ3和 MVD的比较 研究组SOX18、整合素αvβ3阳性率，MVD值明显高于对照组(P均＜0.001)。见表1。

2.2 研究组SOX18、整合素αvβ3和MVD与临床特征的关系研究组SOX18、整合素αvβ3和MVD的表达均与肿瘤最大径、脉管累犯、TNM分期和增殖细胞核抗原(PCNA)指数密切相关(P均＜0.05)。见表2。

表1 两组SOX18、整合素αvβ3阳性表达和MVD比较〔n(%)〕

表2 研究组SOX18、整合素αvβ3阳性表达和MVD与临床特征的关系〔n(%)〕

2.3 研究组SOX18、整合素αvβ3和MVD相关性分析 研究组 SOX18和整合素 αvβ3(r=0.48，P=0.025 4)、SOX18 和MVD(r=0.58，P=0.008 3)、整合素 αvβ3 和 MVD(r=0.54，P=0.011 3)均具有正相关性。

3 讨论

基底细胞癌主要发生于老年人，眼睑是重要的好发部位。临床特征为具有珍珠样形态伴毛细血管扩张，表面为丘疹或结节，可伴有糜烂或溃疡〔7，8〕。部分类型可以表现为片状红斑，类似于皮炎〔9〕。近来人们发现基底细胞癌是基因学异常和遗传学改变相关的肿瘤〔10〕。基底细胞癌在形成和进展过程中常出现间质血管的新生。而对于实性基底细胞癌常伴有明显的血管扩张，由于血管过多的生长及肿瘤对其破坏，局部可以出现典型的出血性改变〔11，12〕。基底细胞癌的生长依赖于血管生成，此时肿瘤中癌基因和血管生成对促进肿瘤进展有重要价值〔13〕。血管内皮生长因子(VEGF)对肿瘤间质血管生成具有重要促进作用。而CD34是重要的血管内皮细胞标志物〔14〕。VEGF对CD34阳性的血管密度有明显促进作用。此时肿瘤间质中CD34阳性的血管生成多，肿瘤局部供应的营养丰富，肿瘤生成和代谢快，侵袭能力增加，转移潜能增强〔15〕。SOX18作为转录因子相关的基因，具有一个HMG基序保守区〔16〕，其功能有:①参与组织的发育、血细胞的生成，神经系统的发育等〔17〕。②SOX18是维持干细胞全能性的重要基因〔18〕。③SOX18参与血细胞的生成和心血管发育，④SOX18是T细胞和B细胞发生过程中的转录因子〔19〕。因此，SOX18的功能多样，其对肿瘤的作用也可能与血管的生成有关〔20〕。整合素αvβ3由αv亚基和β3亚基形成的跨膜异二聚体糖蛋白，其能识别配体分子中的精-甘-天冬序列，这类配体包括 FN、VN、TSP-1 和 vWF 等〔21〕。整合素αvβ3参与多种细胞的活动过程，同时对肿瘤间质血管生成、侵袭性生长、转移及伤口愈合等有重要作用〔22〕。

本实验结果提示SOX18、整合素αvβ3可以有效促进CD34阳性的肿瘤间质血管的生成。SOX18、整合素αvβ3的促癌作用类似癌基因，其常与相关配体结合后发挥作用。由于基底细胞癌的生长过程中常依赖血管的生成，因此促进肿瘤血管生成因素同样具有促进癌进展的作用。联合检测SOX18、整合素αvβ3和MVD的表达可能预示着基底细胞癌的进展。即SOX18、整合素αvβ3和MVD高表达肿瘤生长加快、侵犯脉管和增殖活性强等。SOX18和整合素αvβ3具有直接促进CD34阳性血管生成的作用。SOX18和整合素αvβ3均能引起肿瘤细胞产生多种多样的血管生成的信号或因子，此时肿瘤血管伸长，管腔扩张。SOX18、整合素αvβ3引起血管内皮细胞的增殖，并通过内皮细胞前体细胞分化后形成内皮依赖性血管，此时肿瘤体积增大的速度明显加快〔23，24〕。

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