内蒙古产胎生蜥蜴染色体研究*

刘 恒，赵文阁，刘 鹏

(哈尔滨师范大学)

0 引言

胎生蜥蜴(Lacerta vivipara)是蜥蜴科卵胎生动物的典型代表，在我国分布于黑龙江、内蒙古和新疆等地［1］．在国外分布较广泛，从欧洲乌拉山远端的英格兰和爱尔兰，往东通过西伯利亚到远离东海岸的库页岛等广大地区［2］．作为一个广泛分布的物种，胎生蜥蜴在染色体组型、性别决定机制上存在一定的地理变异［3］．通过对内蒙古地区胎生蜥蜴种群染色体组型的研究，可以与大、小兴安岭地区胎生蜥蜴种群的染色体组型进行比较［1，2］，为胎生蜥蜴的起源和物种演化提供参考．

1 材料与方法

2013年5月，在内蒙古的呼伦贝尔地区采集胎生蜥蜴雌雄各5只，采用骨髓细胞蒸汽固定法制备染色体标本［1，2］．具体操作方法为:将胎生蜥蜴断指放血，2 h后腹腔处注射0．05%秋水仙素0．12 mL，12 h后处死，取出肱骨和股骨，剔除上面的肌肉，横断两端骨骺．用0．46%KCl溶液将骨髓细胞冲到载玻片上，将载玻片放到玻璃皿中的玻璃棒上低渗处理30 min．吸出低渗液后加入固定液(无水乙醇:冰醋酸:双蒸水 =1∶2∶3)固定2 h，换无水乙醇进行二次固定30 min，再用无水乙醇:冰醋酸=1∶2冲洗．待自然干燥后，用吉姆萨染液进行染色30 min，自来水冲洗干净后，风干装片［4］．

使用Leica DC 500显微镜油镜进行观察、统计染色体数目，选取其中20个较好的中期分裂相进行照相．观察雌雄各120个分散良好、边缘清晰且较平整的中期细胞分裂相，确定二倍体染色体数目．用Leica QwinV3软件对染色体进行测量，计算出相对长度和臂比值．

2 结果

如图1、如图2所示，雄性胎生蜥蜴二倍体染色体个数是36，性染色体为ZZ型，2n=34+ZZ．雌性染色体中存在异型的性染色体，二倍体染色体个数为35，性染色体为W型，2n=34+W．除雌性W性染色体为亚端部着丝点(ST)外，全部染色体均为顶端着丝点(T)，所以很难根据着丝点位置区分染色体．

根据胎生蜥蜴染色体形态与大小，17对常染色体可分成2组，第1组包括第1～4对染色体(9% ＞相对长度＞7%)，其中第1对染色体相对长度明显大于第2对染色体(F=18．80，P＜0．05)，容易区分，第2～4对染色体相对长度差也较大，大于0．4%，较易于辨别;第2组包括第5～17对染色体(相对长度＜7%)，第5～9对染色体相对长度在5% ～7%，第10～13对染色体的相对长度在4% ～5%之间，第14～17对染色体的相对长度在3% ～4%之间．Z染色体的相对长度为5．47±0．08%，在第8对与第9对常染色体相对长度之间，W染色体相对长度为5．40±0．26%，臂比值为5．47，为亚端部着丝，在第8对与第9对常染色体相对长度之间(见表1)．

图1 雄性胎生蜥蜴染色体中期分裂相及组型

图2 雌性胎生蜥蜴染色体中期分裂相及组型

3 讨论

胎生蜥蜴分布比较广泛，具有卵生与卵胎生两种生殖模式，对其染色体组型的研究比较早［2］，且不同地理种群中具有一定的染色体变异［3］．内蒙古地区胎生蜥蜴种群染色体数目为雄性2n=36，雌性2n=35，W染色体为亚端着丝染色体，与乌克兰跨喀尔巴阡山脉种群［5］、匈牙利东部种群［6］、俄罗斯部分地区种群、爱沙尼亚种群、芬兰东部种群、瑞典北部种群相似［7］，但W染色体类型不同，例如保加利亚种群的W染色体为亚中着丝点［8］、阿尔卑斯山种群W染色体为中部着丝点［5］，此外，染色体的数目也存在一定的变化，例如斯洛维尼亚的种群发现染色体个数为雄性2n=36，雌性2n=36，性别决定机制为ZZ/ZW［9］，这种同一物种不同种群的染色体数目的地理变异是物种进化的结果，与新物种的形成有关．

表1 胎生蜥蜴染色体相对长度

研究结果表明，内蒙古地区地处大兴安岭的西坡，胎生蜥蜴种群的W染色体类型为亚端部着丝点［1］，不同于大兴安岭东坡的呼玛种群W性染色体的中部着丝［2］，而与小兴安岭地区的种群一致，这三个种群W染色体类型的变化对讨论胎生蜥蜴的起源和进化具有重要意义．

［1］ 朱丹，赵文阁，刘鹏，等．大兴安岭产胎生蜥蜴的染色体组型研究［J］．中国农学通报，2011，27(22):75-77．

［2］ 赵文阁，夏玉国，刘琳琳，等．黑龙江省产胎生蜥蜴的染色体组型研究［J］．四川动物，2006，25(2):234-237．

［3］ ЛА Куп риянова， ЕР Руди． Сравнигельно Карио логическийАна лиз попу ляций жив ордящей ящерицы(L．vivipara)［J］．Зоо логиче ский журнал，1990，69(6):93-101．

［4］ 吴政安．两栖类骨髓细胞的染色体标本制作法［J］．遗传，1982，4(1):38-39．

［5］ Odierna G，Aprea G，Capriglione T，et al．Progressive differentiation of the W sex chromosome between oviparous and viviparous populations of Zootoca vivipara［J］．Italiana Journal of Zoology，1998，65:295-302．

［6］ Puky M，Adam H，Surget-Groba Y，et al．Fajvedelmi programok letjogosultsaga es feladatai Magyarorszagon:az elevenszulo gyik(Zootoca vivipara Mayer＆ Bischoff，1996)vizsgalatanakeredmenyei es tanulsagai［J］．Termeszetvedelmi Kozlemenyek，2004，11:411-418．

［7］ Kupriyanova L A，Kuksin A，Odierna G．Karyotype，chromosome structure，reproductive modalities of three Southern Eurasian populations of the common lacertid lizard，Zootoca vivipara［J］．Acta Herpetologica，2008，3(2):99-106．

［8］ Belcheva R，Biserkov V，Ivlieva H，et al．Karyological studies on Lacerta vivipara collected in Bulgaria［J］．Cytologia，1986，3:567-570．

［9］ Odierna G，Heulin B，Guillaume C P，et al．Evolutionary and biogeographical implications of the karyological variations in the oviparous and viviparous forms of Lacerta(Zootoca)vivipara［J］．Ecography，2001，24:332-340．