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四物汤类方对大鼠子宫血流作用的研究

2014-11-30黄培艳盛国楼

现代中西医结合杂志 2014年5期
关键词:水提液提液香附

黄培艳,盛国楼

(1.江苏省南京市胸科医院,江苏南京210029;2.江苏省南京市中医院,江苏南京210001)

四物汤由当归、川芎、白芍、熟地黄4味中药组成,是以补血调血为主要功用的方剂,被誉为“一切血病的总方”、“肝经调血之专剂”。四物汤类方功能活血调经,主治血瘀所致月经不调、痛经、经前腹痛、经行不畅等妇科疾病[1]。四物汤对子宫动脉血流具有明显地抑制作用,从而可以降低血液黏度[2]。张晓红等[3]报道,口服四物汤2 d后,动脉血管内红细胞聚集率明显减小,子宫血流量增加,子宫动脉阻力下降。朱敏等[4]报道,四物汤及其组方对缩宫素诱导的小鼠离体子宫平滑肌收缩幅度、收缩频率和平均肌张力有不同程度的抑制作用。本试验应用激光多普勒[5]来监测四物汤及类方的水提液对大鼠子宫内膜血流变化,探讨各方之间的药用强度和药用趋势,以为临床合理用药提供借鉴。

1 实验资料

1.1 试剂 戊巴比妥钠粉剂(中国医药(集团)上海化学试剂公司,批号:F20021216)。当归,甘肃岷县当归GAP种植基地;川芎,四川彭州川芎GAP种植基地;白芍,安徽亳州;熟地,河南怀庆;延胡索,浙江松阳;香附,广西玉林;木香,云南丽江;其他药材均购于南京市药材公司。各药材符合《中国药典》﹙2005年版﹚标准。

1.2 动物 清洁级雄性SD大鼠,体质量180~220 g,购于上海斯莱克动物有限公司,动物许可证号:SCXK(沪)2007-005。

1.3 器械 1 mL注射器若干,手术剪刀1把,手术镊子2把,powerlab 8s ADinstruments公司。

1.4 方法

1.4.1 实验分组 清洁级SD大鼠,雌性,体质量180~220 g,水提液和醇沉上清液分别随机分为正常对照组、四物汤组、桃红四物汤组、香附四物汤组、少腹四物汤组、芩连四物汤组,每组10只。

1.4.2 试验样品制备

1.4.2.1 水提浸膏的制备 药材按各复方临床用量配比,见表1,经粉碎至粒径为40目,水提取2次,第1次加入10倍量水煎煮2 h,第2次加入8倍量水煎煮1.5 h合并2次水煎液,减压回收溶剂至一定体积,并烘干成水提浸膏备用。给药量按生药量折算,使用时用重蒸水稀释至所需浓度。

表1 四物汤及其加减方药物组成

1.4.2.2 水提醇沉浸膏的制备 将“1.4.2.1”中水煎液减压回收溶剂至一定体积后,加入95%乙醇调至醇浓度为80%,静置过夜,过滤沉淀,得醇沉上清液,烘干成浸膏备用。给药量按生药量折算,使用使用时用重蒸水稀释至所需浓度。正常对照组予生理盐水0.8 mL。各复方给药量及得率情况见表2。

表2 各处方给药量及得率基本情况

1.4.3 子宫血流检测 用0.3%戊巴比妥钠1 mL/100 g麻醉大鼠并固定在鼠板上,分离大鼠子宫和十二指肠。打开Powerlab主机chart4.2软件调整各参数并校正多普勒激光探头,将探头插入子宫内固定探头保持子宫自然位置。记录子宫血流波形图、背景值以及血流平均值。等系统稳定后记录给药前子宫血流值,然后十二指肠给药并记录150 min。

1.5 统计学处理 实验结果采用Microsoft Excel软件处理,采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 四物汤及其加减方水提液 各组大鼠子宫血流速度比较 正常对照组在十二指肠给生理盐水0.8 mL以后与之前相比,大鼠子宫血流没有显著变化,在给生理盐水150 min内保持稳定。四物汤水提液组十二指肠给四物汤水提液3倍临床量后,子宫血流随后升高,在70~80 min达到峰值,与给药前相比有显著性差异,随后又下降。芩连四物汤水提液组十二指肠给芩连四物汤水提液3倍临床量后,大鼠子宫血流升高,20~30 min稍微降低后又升高,在50~70 min达到峰值与给药前相比有显著性差异,随后逐渐下降120 min时段有所回升但无显著性差异。香附四物汤水提液组十二指肠给香附四物汤水提液3倍临床量后子宫血流有微弱升高,与给药前相比无显著性差异。少腹四物汤水提液组十二指肠给少腹四物汤水提液3倍临床量后,大鼠子宫血流升高,除在20~40 min有小幅下降,在100~110 min达到峰值随后又下降,但数据无显著性差异。桃红四物汤水提液组0 min后十二指肠给桃红四物汤3倍临床量后,子宫血流先下降后升高在70~80 min达到峰值随后一直下降,但数据无显著性差异。各方水提液对大鼠子宫血流的影响结果表明:各方水提液均有促进子宫血流作用,作用强度及维持时间为芩连四物汤组>四物汤组>桃红四物汤组>香附四物汤组>少腹四物汤组,P<0.05为有显著性差异。见表3。

2.2 四物汤及其加减方醇沉上清液结果如下 各组大鼠子宫血流速度比较:四物汤醇提液组0 min后十二指肠给四物汤醇提液3倍临床量后子宫血流快速上升,在10~20 min达到峰值,随后迅速下降逐渐趋于平缓,数据无显著性差异。芩连四物汤醇提液组0 min后十二指肠给芩连四物汤醇提液3倍临床量后子宫血流逐渐上升,90~100 min达到峰值,随后逐渐下降,数据无显著性差异。香附四物汤醇提液组0 min后十二指肠给香附四物汤醇提液3倍临床量后子宫血流逐渐上升,在60~70 min达到峰值,随后逐渐回落,数据无显著性差异。少腹四物汤醇提液组0 min后十二指肠给少腹四物汤醇提液3倍临床量后子宫血流有所下降,40~50 min下降到最低值,随后又上升,60~70 min达到峰值,随后逐渐平缓,数据无显著性差异。桃红四物汤醇提液组0 min后十二指肠给桃红四物汤醇提液3倍临床量后子宫血流逐渐上升,在20~30 min达到峰值有显著性差异,随后子宫血流又回落。各方醇溶液均有促进子宫血流作用,桃红四物汤组显著促进给药后的子宫血流速度。见表4。

2.3 四物汤及其加减方水提液与醇提液之间的比较 分别将水提液、醇提液子宫血流的峰值减去给药前大鼠正常子宫血流值再比上大鼠子宫血流峰值进行比较。子宫血流变化率(%)=(子宫血流峰值-给药前子宫血流值)/给药前子宫血流值×%。各方水提液组和醇沉上清液组子宫血流变化率较正常对照组显著提高,而各方水提液子宫血流变化率与各方醇沉上清液组相比虽然提高,但无显著性差异。见图1。

3 讨 论

中医认为“不通则痛”可以引发多种妇科疾病,现采用活血化瘀方剂促进子宫血流速度可以治疗多种妇科血瘀证。四物汤及类方以补血调血为主要功用,已广泛用于临床。

本研究发现,与给药前相比,给予四物汤和芩连四物汤水提液后,显著促进子宫血流速度:给予桃红四物汤醇沉上清后,显著促进子宫血流速度。与正常对照组相比,水提液与醇提液各组均对大鼠子宫血流变化率有增强作用。除桃红四物汤增加子宫血流变化率与水提液作用强度相似外,其余各组醇提液子宫血流变化率均小于其水提液。从结果可以看出,由水提液到醇沉上清中可能丢失了某些促进子宫血流速度的活性物质。因此,四物汤类方可能通过促进子宫血流速度,改善子宫缺氧缺血状态,发挥治疗痛经的作用。

表3 四物汤及其加减方水提液各组各时段大鼠子宫血流速度比较(±s,mL/s)

表3 四物汤及其加减方水提液各组各时段大鼠子宫血流速度比较(±s,mL/s)

给药后时间 正常对照组 四物汤组 芩连四物汤组 香附四物汤组 少腹四物汤组 桃红四物汤组0 min 0.428 2 ±0.057 0.398 4 ±0.069 9 0.419 3 ±0.056 0 0.431 1 ±0.048 6 0.431 2 ±0.071 1 0.429 7 ±0.067 2 10 min 0.485 7 ±0.069 0.472 8 ±0.075 7 0.476 0 ±0.073 7 0.447 5 ±0.059 9 0.462 9 ±0.075 2 0.372 0 ±0.066 1 20 min 0.553 4 ±0.072 0.518 3 ±0.085 8 0.538 8 ±0.081 1 0.485 2 ±0.070 7 0.492 3 ±0.076 5 0.436 1 ±0.067 7 30 min 0.490 0 ±0.059 0.580 0 ±0.109 3 0.443 1 ±0.073 5 0.448 8 ±0.057 5 0.429 2 ±0.039 4 0.524 8 ±0.088 1 40 min 0.513 3 ±0.035 0.583 5 ±0.121 2 0.514 5 ±0.072 0 0.505 6 ±0.080 5 0.429 8 ±0.054 8 0.494 8 ±0.112 9 50 min 0.545 1 ±0.037 0.588 6 ±0.1032 0.529 8 ±0.066 0 0.502 4 ±0.070 1 0.563 2 ±0.094 8 0.559 3 ±0.098 8 60 min 0.522 5 ±0.042 0.550 1 ±0.083 5 0.645 9 ±0.100 0① 0.557 6 ±0.099 0 0.604 8 ±0.123 6 0.579 6 ±0.095 8 70 min 0.536 9 ±0.039 0.545 6 ±0.094 2 0.650 0 ±0.085 2① 0.475 8 ±0.062 2 0.565 8 ±0.079 1 0.643 0 ±0.115 3 80 min 0.608 8 ±0.068 0.616 4 ±0.070 9① 0.568 8 ±0.076 1 0.439 1 ±0.039 2 0.602 2 ±0.114 8 0.556 6 ±0.089 1 90 min 0.503 8 ±0.017 0.470 7 ±0.080 4 0.566 3 ±0.100 2 0.452 7 ±0.079 2 0.607 4 ±0.072 7 0.560 2 ±0.095 0 100 min 0.476 5 ±0.032 0.485 9 ±0.092 2 0.511 6 ±0.040 5 0.410 4 ±0.034 4 0.617 8 ±0.086 3 0.488 3 ±0.078 0 110 min 0.460 4 ±0.034 0.452 9 ±0.069 6 0.512 5 ±0.050 3 0.416 2 ±0.031 9 0.642 6 ±0.092 1 0.499 6 ±0.065 4 120 min 0.489 5 ±0.026 0.556 9 ±0.081 6 0.577 1 ±0.058 7 0.574 8 ±0.070 3 0.526 4 ±0.080 2 0.536 5 ±0.074 0 130 min 0.504 7 ±0.042 0.484 7 ±0.079 7 0.482 2 ±0.049 0 0.595 7 ±0.072 8 0.638 6 ±0.090 6 0.565 4 ±0.052 6 140 min 0.529 0 ±0.030 0.458 5 ±0.071 3 0.542 2 ±0.079 2 0.538 1 ±0.037 0 0.530 0 ±0.084 0 0.499 6 ±0.050 0 150 min 0.529 5 ±0.079 0.523 4 ±0.077 7 0.571 7 ±0.082 3 0.595 8 ±0.067 9 0.503 4 ±0.064 4 0.492 7 ±0.043 8

表4 四物汤及其加减方醇沉上清液各组各时段大鼠子宫血流速度比较(±s,mL/s)

表4 四物汤及其加减方醇沉上清液各组各时段大鼠子宫血流速度比较(±s,mL/s)

给药后时间 正常对照组 四物汤组 芩连四物汤组 香附四物汤组 少腹四物汤组 桃红四物汤组0 min 0.428 2 ±0.057 0.280 7 ±0.043 5 0.275 2 ±0.021 0.322 7 ±0.060 0.419 4 ±0.055 0.235 4 ±0.030 10 min 0.485 7 ±0.069 0.327 2 ±0.063 5 0.297 6 ±0.051 0.347 7 ±0.049 0.471 9 ±0.046 0.301 8 ±0.017 20 min 0.553 4 ±0.072 0.411 3 ±0.119 7 0.329 8 ±0.098 0.360 2 ±0.057 0.433 9 ±0.074 0.333 9 ±0.041 30 min 0.490 0 ±0.059 0.340 9 ±0.052 7 0.280 5 ±0.061 0.380 1 ±0.033 0.432 1 ±0.052 0.415 4 ±0.053①40 min 0.513 3 ±0.035 0.375 8 ±0.077 1 0.318 4 ±0.027 0.401 1 ±0.056 0.357 3 ±0.081 0.376 2 ±0.054 50 min 0.545 1 ±0.037 0.352 5 ±0.075 4 0.388 7 ±0.080 0.415 9 ±0.059 0.291 7 ±0.050 0.342 4 ±0.056 60 min 0.522 5 ±0.042 0.383 8 ±0.071 5 0.371 5 ±0.094 0.460 4 ±0.064 0.385 8 ±0.084 0.340 3 ±0.063 70 min 0.536 9 ±0.039 0.371 4 ±0.087 7 0.380 4 ±0.093 0.512 8 ±0.030 0.462 7 ±0.088 0.392 1 ±0.080 80 min 0.608 8 ±0.068① 0.303 8 ±0.082 2 0.300 5 ±0.051 0.448 2 ±0.068 0.432 5 ±0.056 0.412 9 ±0.104 90 min 0.503 8 ±0.017 0.316 5 ±0.088 5 0.294 8 ±0.066 0.475 9 ±0.080 0.488 3 ±0.041 0.371 9 ±0.101 100 min 0.476 5 ±0.032 0.472 6 ±0.070 2 0.398 1 ±0.126 0.486 0 ±0.091 0.461 0 ±0.051 0.351 6 ±0.075 110 min 0.460 4 ±0.034 0.377 7 ±0.037 0 0.300 6 ±0.076 0.437 0 ±0.051 0.469 6 ±0.083 0.311 3 ±0.058 120 min 0.489 5 ±0.026 0.368 4 ±0.051 6 0.291 3 ±0.060 0.489 9 ±0.066 0.393 6 ±0.038 0.311 9 ±0.048 130 min 0.504 7 ±0.042① 0.435 6 ±0.072 4 0.212 8 ±0.032 0.483 8 ±0.067 0.502 7 ±0.083 0.305 2 ±0.041 140 min 0.529 0 ±0.030 0.423 1 ±0.080 6 0.230 3 ±0.03 1 150 min 0.529 5 ±0.079 0.341 7 ±0.055 6 0.316 9 ±0.02 7

图1 水提液与醇提液间大鼠子宫血流变化率比较

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