电针曲池、神门、足三里穴对压力负荷性心肌肥厚模型家兔干预作用

王 红 王威龙 赵伟丽 赵 楠 孙世晓

（黑龙江中医药大学·哈尔滨 150040）

研究表明，左室肥厚是独立于高血压之外的心血管病危险因子[1]，是主要的高血压靶器官损害，高血压患者约有1/3伴有左室肥厚[2]。目前临床研究和基础实验已证实针刺疗法有一定心血管保护作用[3]，但对心肌肥厚的相关研究较少报道。故本实验以腹主动脉缩窄法复制压力负荷性心肌肥厚家兔模型，观察同步电针曲池、神门、足三里穴对模型家兔心电图、心肌肥厚参数及心肌形态学变化的影响，为临床合理使用电针治疗积累实验数据。

1 材料和方法

1.1 材料

实验动物：从黑龙江中医药大学实验动物中心购入健康成年家兔60只，体重1.5～2.5kg，雌雄各半，动物合格证号：SCXK黑2008-004。实验仪器：PL202-S电子天平、狗兔两用解剖台、G6805-Ⅱ电针仪、BL-420F生物机能实验系统。

1.2 方法

将家兔随机分为正常组、假手术组、模型组、电针高频组（频率100Hz，电压3V，连续波）、电针中频组（频率50Hz，电压3V，连续波）、电针低频组（频率2Hz，电压3V，连续波），每组10只。参照Anversea方法[4]，20%的氨基甲酸乙酯5ml/kg经耳缘静脉注射麻醉，仰卧固定并行腹部无菌手术，分离腹主动脉鞘，剥离并缩窄腹主动脉，然后关腹。术后三天每天皮下注射青霉素5万u/只预防感染。假手术组手术过程如上，但不缩窄腹主动脉。参照《实验针灸学》动物标准穴位图谱，家兔曲池穴位于肘横纹外侧端，屈肘，当尺泽穴与肱骨外上髁连线中点。神门穴位于腕部，腕掌横纹尺侧端，尺侧腕屈肌腱的桡侧凹陷处。足三里穴位于外膝眼下四横指、胫骨边缘。术后即开始电针治疗，治疗组用G6805-Ⅱ电针仪分别给予高、中、低频率电针刺激，每次持续45min，每日一次，连续电针12周。假手术组和模型组仅给予相同时间的捆绑。

1.3 心电图、心重指数（HW/BW）、左心室重量指数（LVMI=LVW/BW）检测

末次电针后，家兔称重（BW），用20%的氨基甲酸乙酯5ml/kg经耳缘静脉注射麻醉，通过BL-420F生物机能实验系统记录II导联心电图，然后处死家兔并开胸取心，用预冷生理盐水充分灌洗心脏，剔除心脏周围血管、脂肪等组织，用滤纸吸干心脏表面及室腔液体，称全心重量（HW），计算HW/BW，再沿房室交界剪去心房和右心室游离壁，保留左心室及室间隔，滤纸吸干后称取左心室重量（LVW），计算LVMI。心电图主要分析HR、P-R间期和ST段电位值。

1.4 HE染色

在心尖部横向截取约0.5cm×0.5cm×0.2cm大小组织块，放入4%多聚甲醛固定行HE染色以观察心肌组织形态学变化。

1.5 统计分析

实验数据以均数±标准差表示，统计分析采用SPSS11.5软件做t检验。

2 结果

各组家兔II导联心电图的HR、P-R间期和ST段电位值统计结果见表1；HW/BW和LVMI统计结果见表2。

表1 各组HR、P-R间期和ST段变化的统计结果（，n=10）

表1 各组HR、P-R间期和ST段变化的统计结果（，n=10）

注：与正常组比较：*P＜0.01；与模型组比较△P＜0.05。

组别 HR（次/min） ST段振幅（mV） P-R间期（mS）正常组 322±12.12 0.06±0.008 59±1.32假手术组 346±18.09 0.04±0.007 60±3.09模型组 203±14.31* 0.12±0.021* 101±9.43*低频组 208±23.45 0.11±0.027 100±10.04中频组 251±10.91△ 0.10±0.012 86±8.62△高频组 290±14.37△ 0.07±0.022△ 73±9.11△

表2 各组HW/BW和LVMI变化的统计结果（，n=10）

表2 各组HW/BW和LVMI变化的统计结果（，n=10）

注：与正常组比较：*P＜0.01；与模型组比较△P＜0.05。

组别 HW/BW（mg/g） LVMI（mg/g）正常组 2.36±0.28 1.52±0.11假手术组 2.41±0.32 1.47±0.18模型组 3.33±0.21* 2.53±0.14*低频组 3.23±0.35 2.38±0.22中频组 3.05±0.12△ 2.26±0.41△高频组 2.87±0.22△ 1.82±0.28△

3 讨论

本实验观察了压力负荷性心肌肥厚模型家兔心电图、心肌肥厚参数及心肌组织学变化。心电图HR、P-R间期和ST段统计结果表明，模型组家兔HR减慢，ST段抬高，P-R间期延长，与正常组比较经统计学处理存在显著性差异，高频电针组HR、P-R间期和ST段均有明显改善，与模型组比较存在显著性差异；中频电针组HR、P-R间期与模型组比较有显著性差异。HW/BW和LVMI的统计结果表明，模型组家兔HW/BW、LVMI升高，与正常组比较经统计学处理存在显著性差异，高频电针组、中频电针组家兔HW/BW、LVMI与模型组比较经统计学处理存在显著性差异。HE染色结果表明，正常组心肌细胞排列整齐，横纹清楚，观察细胞核大小均一，细胞中的胞浆染色均匀，总体心肌纤维排列整齐，间质中无明显胶原纤维增生；模型组家兔可见心肌细胞变肥大，细胞核形态不规则，胞浆染色加深，心肌纤维增粗增大、紊乱、断裂，血管周围有胶原纤维增生，间质中有不同程度胶原纤维增生并伴有炎症细胞浸润等改变等病理改变；低频电针组可见心肌纤维增粗增大，核仁浓染，间质中伴有炎症细胞浸润等改变；中频电针组心肌细胞肥大、细胞核增大、形态不规则、核仁浓染、胞浆染色加深、心肌胶原纤维增生有不同程度改善，间质伴随炎症浸润现象消失；高频电针组心肌细胞排列紊乱、血管周围胶原纤维增生、炎症细胞浸润等病理改变有明显改善。以上结果表明高频、中频电针神门、曲池、足三里穴对腹主动脉缩窄造成的负荷性家兔心肌肥厚有一定的干预作用。

[1] Hunter JJ,Chien KR.Signaling pathways for cardiac hypertrophy and failure[J].N Engl J Med,1999,314（17）：1276-1283.

[2] 葛志明，季晓平，郝恩魁，等.氯沙坦逆转高血压患者左室肥厚的临床研究[J].山东医科大学学报，2007，38（2）：172.

[3] 易春涛，程晓曙，俞建华，等.辛伐他汀对一氧化氮缺乏性高血压大鼠心肌纤维化的作用[J].中国临床药理学与治疗学，2006，7（4）：306-310.

[4] Anversea P,Hagopian M,Alder V.Quantitative radioautographic local-izstiorl of protein synthesis in experimental cardiac hypertrophy[J].LabInvest,1973,29（3）：282.