ZEB2、E—cad在鳞状宫颈癌细胞的表达与疾病分期的关系

汪泉

摘 要 目的：探讨宫颈癌细胞中E盒结合锌指蛋白2（ZEB2）、E-钙黏附蛋白（E-cad）表达和疾病分期的关系。方法：选取2007年6月至2011年11月期间我院病理科确诊的鳞状宫颈癌组织62例，采用免疫组织化学法（IHC）检测ZEB2、E-cad蛋白的表达情况，回顾性分析患者临床报告资料，采用单因素和多因素（logistic回归分析法）对ZEB2、E-cad蛋白表达与疾病分期的关系进行分析。且另选癌旁正常组织10例作为对照。结果：鳞状宫颈癌组织中ZEB2蛋白表达阳性率高于癌旁癌黏膜组织，E-cad蛋白表达阳性率低于后者（P<0.05）；单因素结果分析显示，ZEB2、E-cad蛋白表达与宫颈癌FIGO分期、分化程度及淋巴结转移均有关（P均<0.05）；logistic回归分析结果显示，FIGO分期、淋巴结转移、E-cad表达及 ZEB2 表达均可作为宫颈癌疾病分期的因素。结论：ZEB2 、E-cad蛋白表达有助于判断宫颈癌发展、浸润和转移情况，利于患者预后方案制定，有望成为宫颈癌疾病分期的指标。

关键词 ZEB2 E-cad 表达 宫颈癌 疾病分期

中图分类号：R737.33； R730.3 文献标识码：B 文章编号：1006-1533（2014）21-0049-04

The expressions of ZEB2 and E-cadand in cervical cancer cells

and their relationship with the stage of disease*

WANG Quan**

（Department of Pathology， The Maternal and Child Care Service Centre of Jiujiang City， Jiujiang 332000， China）

ABSTRACT Objective： To investigate the relationship between the expressions of zinc finger E-box-binding protein 2 （ZEB2） and E-cadherin （E-cad） in cervical cancer cells and the stages of disease. Methods： Sixty-two cases of squamous cervical cancer tissue diagnosed in the department of pathology of our hospital from June 2007 to November 2012 were selected. The expressions of ZEB2 and E-cad were detected by immunohistochemical method. Clinical data were retrospectively analyzed. The relationship between the expressions and the stages of disease was analyzed by single factor and multiple factors （logistic regression analysis）. Ten cases of normal tissue adjacent to carcinoma were selected as a control. Results： The positive rate of ZEB2 expression in the tissues of squamous cervical carcinoma was higher than that in the cancer mucosa tissue adjacent to carcinoma while the positive rate of E-cad expression was lower （P<0.05）. The results of single factor analysis showed that ZEB2 and E-cad expressions were related to cervical cancer FIGO staging， differentiation degree and lymph node metastasis （P<0.05）. The results of logistic regression analysis showed that ZEB2 and E-cad expressions， FIGO staging and lymph node metastasis can be used as the factors for the stages of cervical cancer. Conclusion： ZEB2 and E-cad expressions are of benefit to the determination of the situation of the development， invasion and metastasis of cervical cancer and the development of prognosis program， which can be expected to become the index of staging cervical cancer.

KEY WORDS ZEB2； E-cad； expressions； cervical cancer； disease stage

宫颈癌是我国最常见的妇科恶心肿瘤之一，普遍分为鳞状癌、腺癌和腺鳞癌，发病呈年轻化趋势，早期阶段无明显症状和体征，易被误诊或漏诊，在发展阶段会直接浸润周围组织和发生淋巴结转移[1]。近年来宫颈细胞学检测被广泛使用，有助于有效预防和治疗宫颈癌，E-钙黏附蛋白（E-cad）普遍存在于体内各种上皮细胞，能有效抑制肿瘤细胞的转移和浸润行为，降低肿瘤细胞的危害性[2]。E盒结合锌指蛋白2（zinc finger E-box-binding protein，ZEB2）与E-cad蛋白启动子E2盒具有良好的结合性，阻碍E-cad蛋白的合成，加强了肿瘤细胞的转移和浸润能力[3]。本实验采用免疫组织化学法测定ZEB2、E-cad蛋白在宫颈黏膜组织中表达情况，探讨ZEB2、E-cad蛋白表达与宫颈癌及其疾病分期的关系，现将结果报道如下。

资料与方法

临床资料

选取2007年6月至2011年11月期间我院病理科确诊并手术切除的宫颈癌组织62例，均经临床病理确诊，且另选癌旁正常组织10例作为对照。患者年龄24～69岁，平均年龄（54.63±6.37）岁，对宫颈癌组织按照国际妇产科联盟（FIGO）分期标准分为：早期34例、晚期28例；分化程度分为：已分化15例、分化中28例、未分化19例；淋巴结转移：发生41例、未发生21例。所有患者术前均未有放疗史、化疗史，术后切除的癌变组织和癌旁组织均采用常规处理并使用石蜡包埋。术后对所有患者进行为期2年的随访，统计并记录患者各项临床资料。

方法

对所有组织采用免疫组织化学法（IHC）检测ZEB2、E-cad蛋白的表达，实验步骤严格按照IHC说明书实行，阳性检测一抗均按1∶100制成稀释液，阳性对照检测均使用已知阳性切片，阴性对照检测均使用磷酸盐缓冲液代替一抗。结果评定同时由两名专业病理医师鉴定，标准为颜色深浅程度：无色（0分）、淡黄（1分）、棕黄（2分）、棕褐（3分）；阳性细胞百分比：0%（0分）、1%～25%（1分）、25%～50%（2分）、50%～75%（3分），>75%（4分），两项评分相乘结果大于3分为阳性[4]。

统计学数据处理

采用SPSS 16.0统计软件处理数据，对计数资料比较采用χ2检验或确切概率法分析，对宫颈癌患者各项病理特征与预后情况关系采用logistic回归法分析。

结果

宫颈癌和癌旁黏膜组织中 ZEB2、E-cad蛋白表达情况对比

宫颈癌组织中ZEB2蛋白表达阳性率高于癌旁黏膜组织，E-cad蛋白表达阳性率低于后者，差异有统计学意义（P<0.05）。ZEB2 蛋白主要定位于细胞质，呈淡黄色至棕褐色颗粒；E-cad蛋白主要定位于细胞膜和细胞质，呈棕褐色颗粒（表1，图1）。

宫颈癌组织临床特征中ZEB2、E-cad蛋白阳性表达单因素分析

宫颈癌组织中ZEB2、E-cad蛋白表达与年龄、饮酒无关（P均>0.05），与宫颈癌FIGO分期、分化程度及淋巴结转移均有关（P均<0.05，表2）。

宫颈癌患者疾病分期影响因素logistic回归分析

logistic回归分析结果显示，FIGO 分期、淋巴结转移、E-cad、ZEB2 表达水平均可作为宫颈癌疾病分期独立预测因素（表3）。

讨论

E-cad蛋白属于钙依赖性跨膜糖蛋白，具有调节和保护上皮功能完整性、黏附性的作用[5]，通过维持上皮细胞的极性和调节间质细胞之间的黏附能力，可降低肿瘤细胞在正常上皮细胞的依附能力，使肿瘤细胞从原发病灶脱落[6]。当E-cad蛋白合成受阻或功能出现异常时，上皮细胞会出现功能障碍，上皮表层极性混乱和黏附能力下降[7]。ZEB2蛋白过度表达会与E-cad蛋白中启动子E2盒相结合，降低E-cad蛋白对上皮细胞的调节作用和对肿瘤细胞的抑制作用，使肿瘤细胞易形成侵入性繁殖且会发生散发性浸润和转移行为，加重患者的病情和增加患者痛楚[8]。

本实验结果显示，ZEB2蛋白在鳞状宫颈癌组织中高表达，在癌旁组织中低表达，癌细胞分化程度越低，ZEB2蛋白表达程度越高，宫颈癌组织中发生淋巴结转移ZEB2蛋白表达程度高于淋巴结未转移，晚期宫颈癌组织中ZEB2蛋白表达程度高于早期宫颈癌组织。logistic回归分析结果显示，ZEB2蛋白表达可作为宫颈癌远期疗效的独立危险因素。E-cad蛋白在宫颈癌组织中低表达，在癌旁组织中高表达，E-cad蛋白表达与宫颈癌组织的FIGO分期、分化程度、淋巴结转移情况有关联，表达情况与ZEB2蛋白表达情况相反，说明ZEB2蛋白具有抑制E-cad蛋白的作用，logistic回归分析结果显示，E-cad蛋白表达可作为宫颈癌疾病分期的独立因素。ZEB2蛋白在宫颈癌组织中过度表达，通过与E-cad蛋白启动子结合，减少了患者体内E-cad基因的转录，降低了患者体内上皮细胞的功能调节作用，使患者体内细胞与细胞之间、细胞与基质之间的黏附能力下降，促使了肿瘤细胞发展和转移。因此，医护人员应当对此有足够的重视，为患者远期治疗尽早确立合适的治疗方案。

综上所述，ZEB2蛋白在鳞状宫颈癌组织中过度表达，阻碍具有抑制肿瘤细胞浸润、转移的E-cad蛋白合成，增加了癌细胞扩散转移的几率，因此，ZEB2、E-cad蛋白表达有望成为宫颈癌恶性程度及疾病分期的重要指标。

参考文献

王銮虹， 李俊东， 云径平， 等. B23和Ki67在宫颈癌中的表达及临床意义[J]. 中国妇幼保健， 2014， 29（17）： 2791-2793.

张梦岚， 贺菊香， 李菊英. 宫颈鳞癌组织中Snai2和E-cadherin的表达及意义[J]. 山东医药， 2011， 51（15）： 51-52.

周文娟， 孟跃进， 郭晓峰， 等. 宫颈癌组织中ZEB2和E-cad蛋白的表达[J]. 郑州大学学报（医学版）， 2014， 49（2）： 219-222.

朱明玥， 陈帆， 高冬梅， 等. c-IAP1在宫颈癌中的表达及临床意义[J]. 中国妇幼保健， 2014， 29（14）： 2253-2257.

张荣荣， 王红， 张萍. 宫颈癌组织中Twist与E-cadherin蛋白的表达及其意义[J]. 海南医学， 2013， 24（8）： 1105-1107.

熊中堂， 江庆萍， 彭娟， 等. E-cadherin和P120ctn在子宫颈癌发生发展中的意义思义[J]. 中国现代医生， 2012， 50（1）： 92-93， 98.

谷化平. 宫颈癌组织SLeX、CD44v6和E-Cad表达及其临床意义[J]. 青岛大学医学院学报， 2010， 46（1）： 10-12.

吴艳， 傅芬， 周艳芳. Dysadherin、E-cadherin在宫颈癌中的表达及意义[J]. 实用医学杂志， 2013， 29（20）： 3317-3319.

（收稿日期：2014-08-13）

资料与方法

临床资料

选取2007年6月至2011年11月期间我院病理科确诊并手术切除的宫颈癌组织62例，均经临床病理确诊，且另选癌旁正常组织10例作为对照。患者年龄24～69岁，平均年龄（54.63±6.37）岁，对宫颈癌组织按照国际妇产科联盟（FIGO）分期标准分为：早期34例、晚期28例；分化程度分为：已分化15例、分化中28例、未分化19例；淋巴结转移：发生41例、未发生21例。所有患者术前均未有放疗史、化疗史，术后切除的癌变组织和癌旁组织均采用常规处理并使用石蜡包埋。术后对所有患者进行为期2年的随访，统计并记录患者各项临床资料。

方法

对所有组织采用免疫组织化学法（IHC）检测ZEB2、E-cad蛋白的表达，实验步骤严格按照IHC说明书实行，阳性检测一抗均按1∶100制成稀释液，阳性对照检测均使用已知阳性切片，阴性对照检测均使用磷酸盐缓冲液代替一抗。结果评定同时由两名专业病理医师鉴定，标准为颜色深浅程度：无色（0分）、淡黄（1分）、棕黄（2分）、棕褐（3分）；阳性细胞百分比：0%（0分）、1%～25%（1分）、25%～50%（2分）、50%～75%（3分），>75%（4分），两项评分相乘结果大于3分为阳性[4]。

统计学数据处理

采用SPSS 16.0统计软件处理数据，对计数资料比较采用χ2检验或确切概率法分析，对宫颈癌患者各项病理特征与预后情况关系采用logistic回归法分析。

结果

宫颈癌和癌旁黏膜组织中 ZEB2、E-cad蛋白表达情况对比

宫颈癌组织中ZEB2蛋白表达阳性率高于癌旁黏膜组织，E-cad蛋白表达阳性率低于后者，差异有统计学意义（P<0.05）。ZEB2 蛋白主要定位于细胞质，呈淡黄色至棕褐色颗粒；E-cad蛋白主要定位于细胞膜和细胞质，呈棕褐色颗粒（表1，图1）。

宫颈癌组织临床特征中ZEB2、E-cad蛋白阳性表达单因素分析

宫颈癌组织中ZEB2、E-cad蛋白表达与年龄、饮酒无关（P均>0.05），与宫颈癌FIGO分期、分化程度及淋巴结转移均有关（P均<0.05，表2）。

宫颈癌患者疾病分期影响因素logistic回归分析

logistic回归分析结果显示，FIGO 分期、淋巴结转移、E-cad、ZEB2 表达水平均可作为宫颈癌疾病分期独立预测因素（表3）。

讨论

E-cad蛋白属于钙依赖性跨膜糖蛋白，具有调节和保护上皮功能完整性、黏附性的作用[5]，通过维持上皮细胞的极性和调节间质细胞之间的黏附能力，可降低肿瘤细胞在正常上皮细胞的依附能力，使肿瘤细胞从原发病灶脱落[6]。当E-cad蛋白合成受阻或功能出现异常时，上皮细胞会出现功能障碍，上皮表层极性混乱和黏附能力下降[7]。ZEB2蛋白过度表达会与E-cad蛋白中启动子E2盒相结合，降低E-cad蛋白对上皮细胞的调节作用和对肿瘤细胞的抑制作用，使肿瘤细胞易形成侵入性繁殖且会发生散发性浸润和转移行为，加重患者的病情和增加患者痛楚[8]。

本实验结果显示，ZEB2蛋白在鳞状宫颈癌组织中高表达，在癌旁组织中低表达，癌细胞分化程度越低，ZEB2蛋白表达程度越高，宫颈癌组织中发生淋巴结转移ZEB2蛋白表达程度高于淋巴结未转移，晚期宫颈癌组织中ZEB2蛋白表达程度高于早期宫颈癌组织。logistic回归分析结果显示，ZEB2蛋白表达可作为宫颈癌远期疗效的独立危险因素。E-cad蛋白在宫颈癌组织中低表达，在癌旁组织中高表达，E-cad蛋白表达与宫颈癌组织的FIGO分期、分化程度、淋巴结转移情况有关联，表达情况与ZEB2蛋白表达情况相反，说明ZEB2蛋白具有抑制E-cad蛋白的作用，logistic回归分析结果显示，E-cad蛋白表达可作为宫颈癌疾病分期的独立因素。ZEB2蛋白在宫颈癌组织中过度表达，通过与E-cad蛋白启动子结合，减少了患者体内E-cad基因的转录，降低了患者体内上皮细胞的功能调节作用，使患者体内细胞与细胞之间、细胞与基质之间的黏附能力下降，促使了肿瘤细胞发展和转移。因此，医护人员应当对此有足够的重视，为患者远期治疗尽早确立合适的治疗方案。

综上所述，ZEB2蛋白在鳞状宫颈癌组织中过度表达，阻碍具有抑制肿瘤细胞浸润、转移的E-cad蛋白合成，增加了癌细胞扩散转移的几率，因此，ZEB2、E-cad蛋白表达有望成为宫颈癌恶性程度及疾病分期的重要指标。

参考文献

王銮虹， 李俊东， 云径平， 等. B23和Ki67在宫颈癌中的表达及临床意义[J]. 中国妇幼保健， 2014， 29（17）： 2791-2793.

张梦岚， 贺菊香， 李菊英. 宫颈鳞癌组织中Snai2和E-cadherin的表达及意义[J]. 山东医药， 2011， 51（15）： 51-52.

周文娟， 孟跃进， 郭晓峰， 等. 宫颈癌组织中ZEB2和E-cad蛋白的表达[J]. 郑州大学学报（医学版）， 2014， 49（2）： 219-222.

朱明玥， 陈帆， 高冬梅， 等. c-IAP1在宫颈癌中的表达及临床意义[J]. 中国妇幼保健， 2014， 29（14）： 2253-2257.

张荣荣， 王红， 张萍. 宫颈癌组织中Twist与E-cadherin蛋白的表达及其意义[J]. 海南医学， 2013， 24（8）： 1105-1107.

熊中堂， 江庆萍， 彭娟， 等. E-cadherin和P120ctn在子宫颈癌发生发展中的意义思义[J]. 中国现代医生， 2012， 50（1）： 92-93， 98.

谷化平. 宫颈癌组织SLeX、CD44v6和E-Cad表达及其临床意义[J]. 青岛大学医学院学报， 2010， 46（1）： 10-12.

吴艳， 傅芬， 周艳芳. Dysadherin、E-cadherin在宫颈癌中的表达及意义[J]. 实用医学杂志， 2013， 29（20）： 3317-3319.

（收稿日期：2014-08-13）

资料与方法

临床资料

选取2007年6月至2011年11月期间我院病理科确诊并手术切除的宫颈癌组织62例，均经临床病理确诊，且另选癌旁正常组织10例作为对照。患者年龄24～69岁，平均年龄（54.63±6.37）岁，对宫颈癌组织按照国际妇产科联盟（FIGO）分期标准分为：早期34例、晚期28例；分化程度分为：已分化15例、分化中28例、未分化19例；淋巴结转移：发生41例、未发生21例。所有患者术前均未有放疗史、化疗史，术后切除的癌变组织和癌旁组织均采用常规处理并使用石蜡包埋。术后对所有患者进行为期2年的随访，统计并记录患者各项临床资料。

方法

对所有组织采用免疫组织化学法（IHC）检测ZEB2、E-cad蛋白的表达，实验步骤严格按照IHC说明书实行，阳性检测一抗均按1∶100制成稀释液，阳性对照检测均使用已知阳性切片，阴性对照检测均使用磷酸盐缓冲液代替一抗。结果评定同时由两名专业病理医师鉴定，标准为颜色深浅程度：无色（0分）、淡黄（1分）、棕黄（2分）、棕褐（3分）；阳性细胞百分比：0%（0分）、1%～25%（1分）、25%～50%（2分）、50%～75%（3分），>75%（4分），两项评分相乘结果大于3分为阳性[4]。

统计学数据处理

采用SPSS 16.0统计软件处理数据，对计数资料比较采用χ2检验或确切概率法分析，对宫颈癌患者各项病理特征与预后情况关系采用logistic回归法分析。

结果

宫颈癌和癌旁黏膜组织中 ZEB2、E-cad蛋白表达情况对比

宫颈癌组织中ZEB2蛋白表达阳性率高于癌旁黏膜组织，E-cad蛋白表达阳性率低于后者，差异有统计学意义（P<0.05）。ZEB2 蛋白主要定位于细胞质，呈淡黄色至棕褐色颗粒；E-cad蛋白主要定位于细胞膜和细胞质，呈棕褐色颗粒（表1，图1）。

宫颈癌组织临床特征中ZEB2、E-cad蛋白阳性表达单因素分析

宫颈癌组织中ZEB2、E-cad蛋白表达与年龄、饮酒无关（P均>0.05），与宫颈癌FIGO分期、分化程度及淋巴结转移均有关（P均<0.05，表2）。

宫颈癌患者疾病分期影响因素logistic回归分析

logistic回归分析结果显示，FIGO 分期、淋巴结转移、E-cad、ZEB2 表达水平均可作为宫颈癌疾病分期独立预测因素（表3）。

讨论

E-cad蛋白属于钙依赖性跨膜糖蛋白，具有调节和保护上皮功能完整性、黏附性的作用[5]，通过维持上皮细胞的极性和调节间质细胞之间的黏附能力，可降低肿瘤细胞在正常上皮细胞的依附能力，使肿瘤细胞从原发病灶脱落[6]。当E-cad蛋白合成受阻或功能出现异常时，上皮细胞会出现功能障碍，上皮表层极性混乱和黏附能力下降[7]。ZEB2蛋白过度表达会与E-cad蛋白中启动子E2盒相结合，降低E-cad蛋白对上皮细胞的调节作用和对肿瘤细胞的抑制作用，使肿瘤细胞易形成侵入性繁殖且会发生散发性浸润和转移行为，加重患者的病情和增加患者痛楚[8]。

本实验结果显示，ZEB2蛋白在鳞状宫颈癌组织中高表达，在癌旁组织中低表达，癌细胞分化程度越低，ZEB2蛋白表达程度越高，宫颈癌组织中发生淋巴结转移ZEB2蛋白表达程度高于淋巴结未转移，晚期宫颈癌组织中ZEB2蛋白表达程度高于早期宫颈癌组织。logistic回归分析结果显示，ZEB2蛋白表达可作为宫颈癌远期疗效的独立危险因素。E-cad蛋白在宫颈癌组织中低表达，在癌旁组织中高表达，E-cad蛋白表达与宫颈癌组织的FIGO分期、分化程度、淋巴结转移情况有关联，表达情况与ZEB2蛋白表达情况相反，说明ZEB2蛋白具有抑制E-cad蛋白的作用，logistic回归分析结果显示，E-cad蛋白表达可作为宫颈癌疾病分期的独立因素。ZEB2蛋白在宫颈癌组织中过度表达，通过与E-cad蛋白启动子结合，减少了患者体内E-cad基因的转录，降低了患者体内上皮细胞的功能调节作用，使患者体内细胞与细胞之间、细胞与基质之间的黏附能力下降，促使了肿瘤细胞发展和转移。因此，医护人员应当对此有足够的重视，为患者远期治疗尽早确立合适的治疗方案。

综上所述，ZEB2蛋白在鳞状宫颈癌组织中过度表达，阻碍具有抑制肿瘤细胞浸润、转移的E-cad蛋白合成，增加了癌细胞扩散转移的几率，因此，ZEB2、E-cad蛋白表达有望成为宫颈癌恶性程度及疾病分期的重要指标。

参考文献

王銮虹， 李俊东， 云径平， 等. B23和Ki67在宫颈癌中的表达及临床意义[J]. 中国妇幼保健， 2014， 29（17）： 2791-2793.

张梦岚， 贺菊香， 李菊英. 宫颈鳞癌组织中Snai2和E-cadherin的表达及意义[J]. 山东医药， 2011， 51（15）： 51-52.

周文娟， 孟跃进， 郭晓峰， 等. 宫颈癌组织中ZEB2和E-cad蛋白的表达[J]. 郑州大学学报（医学版）， 2014， 49（2）： 219-222.

朱明玥， 陈帆， 高冬梅， 等. c-IAP1在宫颈癌中的表达及临床意义[J]. 中国妇幼保健， 2014， 29（14）： 2253-2257.

张荣荣， 王红， 张萍. 宫颈癌组织中Twist与E-cadherin蛋白的表达及其意义[J]. 海南医学， 2013， 24（8）： 1105-1107.

熊中堂， 江庆萍， 彭娟， 等. E-cadherin和P120ctn在子宫颈癌发生发展中的意义思义[J]. 中国现代医生， 2012， 50（1）： 92-93， 98.

谷化平. 宫颈癌组织SLeX、CD44v6和E-Cad表达及其临床意义[J]. 青岛大学医学院学报， 2010， 46（1）： 10-12.

吴艳， 傅芬， 周艳芳. Dysadherin、E-cadherin在宫颈癌中的表达及意义[J]. 实用医学杂志， 2013， 29（20）： 3317-3319.

（收稿日期：2014-08-13）