云南省禄丰部分猪场猪圆环病毒病2型血清学调查
2014-11-23王微娜严玉霖谢丽君李枝文
王微娜,高 洪,严玉霖,赵 汝,牛 鑫,汪 霞,谢丽君,李枝文
(1.云南农业大学动物科学技术学院,云南 昆明 650201;2.云南省禄丰县畜牧兽医局动物疫病预防控制中心,云南 禄丰 651200)
猪圆环病毒(PCV)属于圆环病毒科圆环病毒属,属DNA病毒,分为l型(PCV1)和2型(PCV2)。Allan将从细胞中分离到的圆环病毒命名为1型(PCV1),而将病料中分离到的圆环病毒命名为2型(PCV2)。PCV1是细胞污染物,无致病性。而PCV2有致病性,PCV2的感染可以造成免疫抑制,引起猪相关疾病的继发和并发感染,与猪皮炎和肾炎综合征(PDNS)、怀孕母猪繁殖障碍(SAMS)、断奶猪和育肥猪的呼吸道疾病(PRDS)、间质性肺炎(IP)、增生性坏死性肺炎(PNP)等许多疾病有密切关系。目前,PCV2已经成为全球公认的危害生猪养殖业的最重要的病原之一,也是困扰我国养猪业的3大疫病之一。故有必要对猪群进行有效的疫苗免疫并适时检测疫苗的免疫效果,并结合其他综合防制措施对猪圆环病毒病进行有效的预防和控制。
目前常用的该病诊断方法有间接免疫荧光法(IIF),免疫过氧化物单层培养法,ELISA法,聚合酶链式反应(PCR)方法和核酸探针杂交及原位杂交试验(ISH)等。其中ELISA法为检测血清中的病毒抗体,其特异性强,敏感度高,操作快速简便,适用于PCV2抗体的大规模检测。应用该法来检测病毒抗体,不但可以更好的了解宿主对PCV2的免疫反应,而且有利于更好的预防和控制PCV2在猪群中的流行。本文就采用ELISA法对采自云南省禄丰8个猪场的300份血清进行了猪圆环病毒2型IgG的抗体水平检测。
1 材料与方法
1.1 检测试剂 由深圳市康百得生物科技有限公司生产的猪圆环病毒病抗体ELISA检测试剂盒,包括96孔包被好抗原的包被板,样本稀释液,阴、阳性对照品,酶结合物,浓缩洗涤液,底物,显色剂,终止液等。
1.2 被检样品 采自云南省禄丰8个接种过猪圆环病毒病疫苗的规模化猪场的血清样品,共300份。
1.3 方法及结果判定 猪圆环病毒病抗体检测的具体操作步骤按检测试剂盒说明书操作方法和结果判定标准进行。
2 结果
2.1 各猪场PCV2抗体检测结果见表1。由表1可以看出本次所检测的采自禄丰8个规模化猪场的300份血清样品中,均存在一定比例的PCV2抗体阳性率,但是抗体阳性率参差不齐,在16.67%~81.82%之间,分别为16.67%,26.67%,62.96%,81.80%,55.17%,40.00%,25.00%,47.06%。其中,最高的是4号猪场,达81.82%,最低的为1号猪场,只有16.67%。而各猪场的抗体离散度分别为11.85%,7.20%,6.98%,21.70%,9.99%,7.11%,6.64%,9.90%。
表1 各规模化猪场PCV2抗体检测
2.2 各猪场不同类型猪群PCV2抗体检测结果见表2。由表2可知,对不同类型的猪群,PCV2抗体阳性率也存在差异,且整体抗体阳性率都不高。后备母猪、育肥猪和仔猪的抗体阳性率呈依次升高趋势,分别为40.00%,46.99%,51.06%。抗体离散度分别为9.54%,12.41%,6.79%。
表2 规模化猪场不同类型猪群PCV2抗体检测
3 讨论
接种过猪圆环病毒病疫苗的8个规模化猪场,PCV2抗体阳性率检测结果都不高,最高只有81.80%,而最低的仅16.67%,说明圆环病毒病疫苗的免疫效果不理想,该病在这些猪场感染传播存在潜在威胁。各猪场PCV2抗体阳性率高低不等,差别较大的情况,一方面说明虽然同处于禄丰地区,但是各猪场的饲养管理水平及环境卫生条件不一样,从而使疫苗的免疫效果不一致;另一方面是即使接种了猪圆环病毒病疫苗,由于环境和猪的品种,或者是免疫失败等其他很多因素的作用,可能使猪群不产生或产生低水平的抗体,这就不难解释抗体阳性率参差不齐的现象了。而从抗体阳性率和离散度之间的关系来看,除个别猪场外,抗体阳性率与抗体离散度呈负相关。但对于4号猪场,虽然抗体阳性率达到了81.80%,但抗体离散度偏高(21.70%),说明该猪场猪群中个体之间的PCV2抗体存在较大的差异,应及时对免疫不合格的猪只进行补免。
对于不同类型猪群PCV2抗体阳性率水平相当,但是阳性率都不高,后备母猪、育肥猪和仔猪PCV2抗体阳性率分别为40.00%,46.99%,51.06%。而仔猪的抗体阳性率要稍高一些,可能是由于仔猪本来就从母体获得了一定量的母源抗体[1],疫苗接种再次刺激了其免疫系统,使其产生更高的免疫应答。观察不同类型猪群的抗体阳性率和抗体离散度之间的关系,可看出相对于后备母猪和育肥猪而言,仔猪的抗体阳性率高,离散度低,说明仔猪的抗体均匀度和整齐度比后备母猪和育肥猪好。
虽然接受过疫苗接种,但由于其他因素的作用,不排除猪感染了猪圆环病毒,只是缺乏其他致病因子或应激因素的作用而没有发病[2]。因为我们所使用的ELISA诊断试剂盒检测的是血清中的PCV2的抗体IgG,而PCV2的IgG水平不仅可以用来评价猪圆环病毒疫苗的免疫效果,而且也可以作为猪圆环病毒感染的血清学诊断指标。因此,虽然接种过疫苗,也不能排除野毒感染的可能。这也提示我们,在评价疫苗的免疫效果时,不能仅以血清抗体含量作为惟一指标[3],检测血清抗体的同时,可以结合PCR技术来检测感染的情况。
由于PCV2可引起猪的免疫抑制,使被感染的猪不能对其他疫苗或病原体产生有效的免疫应答[4]。因此,仅靠猪圆环病毒病疫苗并不能完全控制该病,它只能作为控制该病的一个手段,并且该病的免疫抑制也可使猪群对其他疾病的易感性增强,诱发混合感染,导致更为复杂的症状[5]。所以,各规模化猪场应该科学地对猪群进行免疫接种,并制定合理的免疫接种计划,不断地对猪群的免疫抗体进行监测,掌握免疫后猪群的抗体消长规律,以便不断完善免疫程序,在保证较高免疫密度的同时,确保达到良好的免疫效果。同时,要加强饲养管理,提高动物福利,严格消毒及控制好与猪圆环病毒病相关的主要疫病的综合措施,才能从一定程度上控制该病,将此病造成的经济损失降至最低。
[1]金大春,肖剑,董信田,等.规模猪场猪圆环病毒2型感染的血清学调查与分析[J].中国畜牧兽医,2008,35(11):126-127.
[2]刘琨,马超锋,贾明杰,等.信阳地区猪圆环病毒2型血清学调查与分析[J].黑龙江畜牧兽医,2013,3:88-89.
[3]王艳丰,曹志高,刘长春,等.猪圆环病毒疫苗应用问题的若干思考[J].猪业科学,2011,11:50-51.
[4]陆江宁,许贵新.猪圆环病毒的危害及防控措施[J].养殖技术顾问,2011,12:106.