栀黄利胆胶囊水提取工艺优选研究

许建强 董鲜红 冯一凡 西安三佳药业有限责任公司(西安710075)

栀黄利胆胶囊处方来源于临床经验方，由栀子、黄芩、叶下珠、夏枯草等药物组成，具有清热化湿，利胆退黄之功效。为了有效地控制该制剂的制备工艺，本文参考相关文献［1～5］，采用正交试验法，以栀子苷结合干膏得率为优选指标，确定其最佳水提取工艺条件。

1 仪器与试药1.1 仪器 Waters高效液相色谱仪(LabAlliance型恒流泵;Waters966二极管阵列检测器，活德国际贸易(上海)有限公司;Millennium32色谱工作站);C18色谱柱(Diamosil4.6×250mm，5μm)、KQ3200型超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)、BP211D型电子分析天平(德国赛多利斯天平有限公司)、超纯水器(Millipore)。

1.2 试药 栀子苷对照品(批号:110749-200714)购自中国药品生物制品检定所;试验所用中药均购自同仁堂西安西大街店，经冯一凡研究员检验均符合《中国药典》2010年版一部的规定;所用化学试剂为分析纯(西安化学试剂厂)、液相用试剂为色谱纯(美国TEDIA公司)、水为超纯水。

2 方法与结果2.1 水提取工艺正交设计为了确定最佳的水提取工艺，以提取次数(A)、提取时间(B)、加水量(C)作为影响因素，分别根据单因素预试验结果选择三个水平，以L9(34)表安排试验，筛选最佳的水提取工艺条件，因素水平表见表1。

表1 因素水平表

2.2 样品溶液的制备 按处方比例量称取水提工艺部分的药材共89g，平行9份，随机编①～⑨号，按L9(34)正交表下设计的实验条件进行提取，合并提取液。将上述提取液浓缩，定容至一定体积，制得样品溶液。

2.3 干膏得率的测定 精密吸取9个样品溶液各25mL，置于已恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105℃干燥3h，取出，置干燥器中冷却30min后，迅速精密称重，计算干膏量和干膏得率。

2.4 栀子苷的含量测定 2.4.1 色谱条件:色谱柱:C18色谱柱(Diamosil4.6 ×250mm，5μm);流动相:乙腈-0.02mol/L 磷酸氢二钠(12∶88);流速 1.0mL·min－1;检测波长240nm;柱温:室温;进样量10μL。

2.4.2 对照品溶液的制备:精密称取在105℃干燥2h的栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含栀子苷0.1mg的溶液，即得。

2.4.3 供试品溶液的制备:分别精密吸取9个样品溶液各5mL，置10mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。

2.4.4 测定法:分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定并计算。

2.5 结果及分析 实验结果见表2，方差分析结果见表3。

表2 L9(34)正交试验表及结果

表3 方差分析表

试验结果表明，影响提取效果因素顺序为提取次数(A)＞加水量(C)＞提取时间(B)。从方差分析可知，提取次数对提取效果有显著影响，提取时间、加水量对提取效果的影响无显著性差异。从省时、节约、降低成本等角度综合考虑，确定方案A3B2C3为最佳提取工艺条件，即加12倍量水，提取三次，第一次1.5h，第二、三次各 1.0h。

2.6 工艺验证试验 按处方量比例量称取各药材共267g，平行三份，按正交试验优选的提取工艺条件试验，并测定栀子苷含量和干膏得率。结果见表4。

表4 验证试验结果

三次验证试验表明，栀子苷含量和干膏得率均较稳定，说明优选的提取条件基本可行。

3 讨 论3.1 栀子为该方君药 栀子苷为其主要有效成分，具有较强的保肝、利胆、促进胰腺分泌、抗菌、抗炎等与该方功能主治相对应的药理活性［6］，且其含量测定有成熟方法;而干膏得率是评价提取效率的传统手段，可简便、直观地体现工艺的提取效率，因此选择以栀子苷的含量并结合干膏得率作为水提取工艺优选的指标是合理和可行的。

3.2 正交试验所优选的工艺参数 进行工艺验证试验，栀子苷含量和干膏得率均较稳定，而且接近于正交试验的最高值，可为栀黄利胆胶囊的大量生产提供依据。

［1］国家药典委员会.中国药典［S］.一部.北京:人民卫生出版社，2010:1.

［2］胡 远，童荣生，杨 勇.正交设计法优化理气复胃口服液的提取工艺［J］.中国药业，2013，22(17):40-41.

［3］蔡 军.正交实验优选退黄口服液提取工艺［J］.中国医学创新，2013，10(26):128-130.

［4］罗海霞，王红霞.高效液相色谱法测定茵栀黄颗粒中栀子苷的含量［J］.中国现代药物应用，2013，7(14):11-12.

［5］郜凤香，梁 艳.高效液相色谱法测定芎菊上清丸中栀子苷含量［J］.中国药业，2012，21(23):14-15.

［6］王志超，杨小龙，张 珂，等.栀子苷药理作用的研究进展［J］.河南科技大学学报(医学版)，2012，30(12):159-160.