表面电性可控的磁性微球的制备、表征及其在基因组DNA萃取中的应用
2014-11-19黄华斌庄峙厦杨朝勇王小如
黄华斌 庄峙厦 杨朝勇 王小如
1引言
核酸提取的传统方法,如酚氯仿抽提法,存在溶剂毒性大、重复性操作多、难以实现微型化、自动化操作等缺点。近年发展起来的固相萃取法不仅可以避免使用毒性强的有机溶剂, 而且能大幅度提高提取效率。磁性微粒作为一种新型核酸固相萃取剂,借助于适当的磁分离装置\[1,2\],可以进一步简化和加速核酸的分离与纯化过程。利用外层表面改性的途径,可赋予磁性微球表面多种反应性官能团(如羟基、羧基、氨基、醛基等) \[3\],通过吸附或共价键合的方式可以与酶、细胞、药物等生物活性物质\[4,5\]结合;在DNA分离过程中,羟基、羧基与醛基一般以共价键的方式与DNA结合,结合时往往需使用盐酸胍等试剂\[6\],由于强结合力,脱附时间比较长。与其它官能团相比,氨基与DNA结合后较易脱附。
1引言
核酸提取的传统方法,如酚氯仿抽提法,存在溶剂毒性大、重复性操作多、难以实现微型化、自动化操作等缺点。近年发展起来的固相萃取法不仅可以避免使用毒性强的有机溶剂, 而且能大幅度提高提取效率。磁性微粒作为一种新型核酸固相萃取剂,借助于适当的磁分离装置\[1,2\],可以进一步简化和加速核酸的分离与纯化过程。利用外层表面改性的途径,可赋予磁性微球表面多种反应性官能团(如羟基、羧基、氨基、醛基等) \[3\],通过吸附或共价键合的方式可以与酶、细胞、药物等生物活性物质\[4,5\]结合;在DNA分离过程中,羟基、羧基与醛基一般以共价键的方式与DNA结合,结合时往往需使用盐酸胍等试剂\[6\],由于强结合力,脱附时间比较长。与其它官能团相比,氨基与DNA结合后较易脱附。
1引言
核酸提取的传统方法,如酚氯仿抽提法,存在溶剂毒性大、重复性操作多、难以实现微型化、自动化操作等缺点。近年发展起来的固相萃取法不仅可以避免使用毒性强的有机溶剂, 而且能大幅度提高提取效率。磁性微粒作为一种新型核酸固相萃取剂,借助于适当的磁分离装置\[1,2\],可以进一步简化和加速核酸的分离与纯化过程。利用外层表面改性的途径,可赋予磁性微球表面多种反应性官能团(如羟基、羧基、氨基、醛基等) \[3\],通过吸附或共价键合的方式可以与酶、细胞、药物等生物活性物质\[4,5\]结合;在DNA分离过程中,羟基、羧基与醛基一般以共价键的方式与DNA结合,结合时往往需使用盐酸胍等试剂\[6\],由于强结合力,脱附时间比较长。与其它官能团相比,氨基与DNA结合后较易脱附。