超高压液相色谱飞行时间质谱法对比分析沙丁胺醇在猪尿液和血浆中的代谢产物

谷旭 刘义明 姚婷 石华乐 李俊 赵祯 秦玉昌

1引言

生物样品中有大量干扰组分存在，LCMS技术由于其选择性强、灵敏度高，目前被广泛应用于分析药物及其在各种复杂生物基质（全血、血浆、尿、胆汁及生物组织）中的代谢研究。不仅可以避免复杂、烦琐、耗时的样品前处理工作，而且能分离鉴定难于辨识的痕量药物代谢产物，QTOF属于高分辨质谱，可以提供较为可靠的母体药物或代谢产物分子和碎片离子的精确分子质量，能够获得其元素组成等多种结构相关信息，结合软件能较可靠地快速推测复杂生物机制中的代谢产物＼[1，2＼]。

β2受体激动剂可放松支气管、血管、肠和子宫平滑肌，增加纤毛运动频率，调节粘膜纤毛的清除率＼[3＼]。β2受体激动剂同时具有增加脂类分解和脂肪细胞中脂类生成，增加肝糖分解和蛋白质的合成，减少横纹肌纤维蛋白质的水解作用。沙丁胺醇（Salbutamol，SAL）又名咳喘宁，化学名称1（4羟基3羟甲基苯基）2（叔丁氨基）乙醇，是短效选择性的β2受体激动剂，有较强的支气管扩张作用，临床用于平喘＼[4＼]。动物饲养过程中添加微量的沙丁胺醇能促进牲畜的生长、增加瘦肉率＼[5＼]，然而残留在动物产品中的沙丁胺醇和其毒性更高的代谢产物可以通过食物链进入人体，严重影响身体健康＼[6＼]，我国农业部于1997年做出规定，严禁所有β肾上腺素受体类激素在饲料和畜牧生产中使用[7]。

沙丁胺醇在人体内主要发生N羟基与硫酸的结合，生成的结合物可致癌＼[8～10＼]， DomínguezRomero等研究了小鼠腹腔注射沙丁胺醇后尿液中的代谢产物，确定了4种可能的代谢物，但结果并未检测到硫酸结合物＼[11＼]。药物在不同种属动物之间的代谢路径有一定差别，同种动物不同给药方式对药物的代谢也不尽相同＼[10＼]。目前， 对沙丁胺醇家畜体内的代谢研究较少，对其在家畜体内的可能代谢产物和代谢路径的报道不多，仅Montrade等利用高分辨质谱在口服沙丁胺醇的牛尿液中发现了沙丁胺醇的氧化产物＼[12＼]。为探讨猪口服给药沙丁胺醇后的代谢物和可能代谢途径，本研究采用UPLCQTOF MS联用技术，结合Agilent MassHunter Metabolite ID软件，对灌胃沙丁胺醇后猪尿液和血浆中的代谢物进行分析鉴定，推断可能代谢路径。

1引言

生物样品中有大量干扰组分存在，LCMS技术由于其选择性强、灵敏度高，目前被广泛应用于分析药物及其在各种复杂生物基质（全血、血浆、尿、胆汁及生物组织）中的代谢研究。不仅可以避免复杂、烦琐、耗时的样品前处理工作，而且能分离鉴定难于辨识的痕量药物代谢产物，QTOF属于高分辨质谱，可以提供较为可靠的母体药物或代谢产物分子和碎片离子的精确分子质量，能够获得其元素组成等多种结构相关信息，结合软件能较可靠地快速推测复杂生物机制中的代谢产物＼[1，2＼]。

β2受体激动剂可放松支气管、血管、肠和子宫平滑肌，增加纤毛运动频率，调节粘膜纤毛的清除率＼[3＼]。β2受体激动剂同时具有增加脂类分解和脂肪细胞中脂类生成，增加肝糖分解和蛋白质的合成，减少横纹肌纤维蛋白质的水解作用。沙丁胺醇（Salbutamol，SAL）又名咳喘宁，化学名称1（4羟基3羟甲基苯基）2（叔丁氨基）乙醇，是短效选择性的β2受体激动剂，有较强的支气管扩张作用，临床用于平喘＼[4＼]。动物饲养过程中添加微量的沙丁胺醇能促进牲畜的生长、增加瘦肉率＼[5＼]，然而残留在动物产品中的沙丁胺醇和其毒性更高的代谢产物可以通过食物链进入人体，严重影响身体健康＼[6＼]，我国农业部于1997年做出规定，严禁所有β肾上腺素受体类激素在饲料和畜牧生产中使用[7]。

沙丁胺醇在人体内主要发生N羟基与硫酸的结合，生成的结合物可致癌＼[8～10＼]， DomínguezRomero等研究了小鼠腹腔注射沙丁胺醇后尿液中的代谢产物，确定了4种可能的代谢物，但结果并未检测到硫酸结合物＼[11＼]。药物在不同种属动物之间的代谢路径有一定差别，同种动物不同给药方式对药物的代谢也不尽相同＼[10＼]。目前， 对沙丁胺醇家畜体内的代谢研究较少，对其在家畜体内的可能代谢产物和代谢路径的报道不多，仅Montrade等利用高分辨质谱在口服沙丁胺醇的牛尿液中发现了沙丁胺醇的氧化产物＼[12＼]。为探讨猪口服给药沙丁胺醇后的代谢物和可能代谢途径，本研究采用UPLCQTOF MS联用技术，结合Agilent MassHunter Metabolite ID软件，对灌胃沙丁胺醇后猪尿液和血浆中的代谢物进行分析鉴定，推断可能代谢路径。

1引言

生物样品中有大量干扰组分存在，LCMS技术由于其选择性强、灵敏度高，目前被广泛应用于分析药物及其在各种复杂生物基质（全血、血浆、尿、胆汁及生物组织）中的代谢研究。不仅可以避免复杂、烦琐、耗时的样品前处理工作，而且能分离鉴定难于辨识的痕量药物代谢产物，QTOF属于高分辨质谱，可以提供较为可靠的母体药物或代谢产物分子和碎片离子的精确分子质量，能够获得其元素组成等多种结构相关信息，结合软件能较可靠地快速推测复杂生物机制中的代谢产物＼[1，2＼]。

β2受体激动剂可放松支气管、血管、肠和子宫平滑肌，增加纤毛运动频率，调节粘膜纤毛的清除率＼[3＼]。β2受体激动剂同时具有增加脂类分解和脂肪细胞中脂类生成，增加肝糖分解和蛋白质的合成，减少横纹肌纤维蛋白质的水解作用。沙丁胺醇（Salbutamol，SAL）又名咳喘宁，化学名称1（4羟基3羟甲基苯基）2（叔丁氨基）乙醇，是短效选择性的β2受体激动剂，有较强的支气管扩张作用，临床用于平喘＼[4＼]。动物饲养过程中添加微量的沙丁胺醇能促进牲畜的生长、增加瘦肉率＼[5＼]，然而残留在动物产品中的沙丁胺醇和其毒性更高的代谢产物可以通过食物链进入人体，严重影响身体健康＼[6＼]，我国农业部于1997年做出规定，严禁所有β肾上腺素受体类激素在饲料和畜牧生产中使用[7]。

沙丁胺醇在人体内主要发生N羟基与硫酸的结合，生成的结合物可致癌＼[8～10＼]， DomínguezRomero等研究了小鼠腹腔注射沙丁胺醇后尿液中的代谢产物，确定了4种可能的代谢物，但结果并未检测到硫酸结合物＼[11＼]。药物在不同种属动物之间的代谢路径有一定差别，同种动物不同给药方式对药物的代谢也不尽相同＼[10＼]。目前， 对沙丁胺醇家畜体内的代谢研究较少，对其在家畜体内的可能代谢产物和代谢路径的报道不多，仅Montrade等利用高分辨质谱在口服沙丁胺醇的牛尿液中发现了沙丁胺醇的氧化产物＼[12＼]。为探讨猪口服给药沙丁胺醇后的代谢物和可能代谢途径，本研究采用UPLCQTOF MS联用技术，结合Agilent MassHunter Metabolite ID软件，对灌胃沙丁胺醇后猪尿液和血浆中的代谢物进行分析鉴定，推断可能代谢路径。