孟鲁司特钠片降解产物的HPLC法测定研究

王益华+俞俊萍+来丽丽

[摘要] 目的 探讨孟鲁司特钠片降解产物的测定方法，以有效控制药品的质量。方法 采用用高效液相色谱法测定孟鲁司特钠片降解产物，Agilent ZORBAX XDB C8色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以磷酸盐缓冲液为流动相A，乙腈为流动相B梯度洗脱，流速1.2 mL/min，检测波长为254 nm，采用杂质对照品法测定降解产物。结果 孟鲁司特钠浓度在1.035 648～6.213 888 μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系，主药与降解产物能达到较好的基线分离。结论 该方法灵敏度高，专属性强，准确可靠，可用于药品控制。

[关键词] 高效液相色谱法；孟鲁司特钠；降解产物

[中图分类号] R9 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2014）03（b）-0023-02

[Abstract] Objective To investigate a method for the determination of montelukast sodium tablets degradation products， in order to effectively control the quality of drugs. Methods HPLC for determination of montelukast sodium tablets degradation product， Agilent ZORBAX XDB C8 column （4.6 × 250mm， 5 μ m）， phosphate buffer as mobile phase A， acetonitrile as mobile phase B gradient elution， flow rate 1.2ml/min， the detection wavelength was 254nm， the impurity determination of degradation products in the control sample method. Results Montelukast sodium concentration in the range of 1.035648-6.213888 μg/ml had a good linear relationship with peak area， the main drug and degradation products can achieve good baseline separation. Conclusion This method is of high sensitivity， strong specificity， accurate and reliable， and can be used for drug control.

[Key words] HPLC； Montelukast sodium； Degradation products

孟鲁司特钠化学名为[R-（E）]-1-[[[1-[3-[2-（7-氯-2-喹啉基）乙烯基]苯基]-3-[2-（1-羟基-1-甲基乙基）苯基]丙基]硫代]甲基]环丙基乙酸钠，为选择性白三烯D4受体拮抗剂[1]，可与气道中的白三烯选择性地结合，阻断过敏介质的作用，改善呼吸道炎症[2]，使气道畅通，是一种高效、低毒、安全性好的平喘抗炎和抗过敏药[3]。该实验于2012年9月—2013年3月完成，采用高效液相色谱法测定孟鲁司特钠片的降解产物，以期为质量控制提供可靠的实验依据，现报道如下。

1 仪器与试剂

高效液相色谱仪（型号：Waters2695-2489，厂家：美国Waters公司）、紫外检测器（型号：TU-1900，厂家：北京普析通用公司）、孟鲁司特钠对照品（批号F089F11015）、孟鲁司特钠峰鉴别用对照品（批号20120216）、杂质A对照品（批号F0891MPE333R009）、杂质C对照品（批号F0891MPB259R055）、杂质D对照品（批号F0891MPD277R099）均由企业提供，孟鲁司特钠片（批号：120312），乙腈和甲醇均为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 实验方法

2.1 色谱条件

色谱柱Agilent ZORBAX XDB C8色谱柱（4.6 mm×250 mm，

5 μm），流动相磷酸盐缓冲液为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱见表1，检测波长254 nm；流速1.2 mL/min；柱温35 ℃；进样量10 μL。

2.2 系统适用性

分离度溶液：称取孟鲁司特钠峰鉴别用对照品约10 mg，精密称定，置10 mL白色量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，混匀。

杂质A储备液：准确称取约10 mg的杂质A对照品，置100 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，混匀。

杂质D储备液：准确称取约10 mg 的杂质D对照品，置100 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，混匀。

孟鲁司特钠标准储备液：准确称取约10 mg孟鲁司特钠对照品，置100 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度。混匀。

标准溶液：精密量取2.0 mL孟鲁司特钠标准储备液、10.0mL的杂质A储备液、 5.0 mL的杂质D储备液，置100 mL量瓶中，用稀释剂稀释至刻度。

2.3 线性关系考察

线性储备溶液-1[4-6]：分别吸取10.0 mL孟鲁司特钠标准储备液、50.0 mL的杂质A 储备溶液和25.0 mL的杂质D储备溶液，至100 mL的容量瓶中， 用甲醇稀释至刻度，混匀。

线性储备溶液-2：分别吸取5.0 mL的杂质A储备溶液、5.0 mL的杂质D储备溶液 和5.0 mL的孟鲁司特钠标准储备溶液，至20 mL的量瓶中，用甲醇稀释至刻度，混匀。

按照下表用稀释剂进一步稀释线性储备溶液（1和2），得到线性测试溶液，浓度为QL至相当于标准溶液的300%，每份线性测试溶液各进样1次。见表2。

2.4 定量限

取线性项下的最低浓度作为定量限，连续进样6针，记录峰面积。

2.5 方法精密度

取不少于20片样品，称重，磨粉，准确称取相当于25 mg的孟鲁司特的粉末，置25 mL的量瓶中，加入20 mL的稀释剂，机械振摇20 min，稀释剂稀释至刻度，混匀，用0.45 μm的滤膜过滤，弃去2 mL初滤液。按照测试方法制备6份孟鲁司特钠片样品溶液。

2.6 准确度

使用线性下的线性贮备液（1和2）作为准确度测试的标准贮备液。准确称取约500 mg的孟鲁司特钠片（10 mg）的粉末（相当于25 mg孟鲁司特），至25 mL的容量瓶中，按照表3精密移取线性储备溶液，加入适量的稀释剂，机械振摇20 min，稀释剂稀释至刻度，混匀，用0.45 μm的滤膜过滤，弃去2 mL初滤液。分别对9份准确度测试样品溶液各进样1次。

2.7 稳定性试验

在室温下保存分离度溶液（SS溶液）、标准溶液（Std）、样品溶液，在所有溶液制备后的0、8、24、48 h分别对SS溶液、对照品溶液、样品溶液进行进样。

3 实验结果

3.1 系统适用性

按上述色谱条件进样，得到，分离度溶液中，杂质B与孟鲁司特的分离度≥2.5，杂质C与孟鲁司特的分离度≥1.2，符合要求。标准溶液中，理论板数按孟鲁司特钠峰计≥4 000，拖尾因子（T）≤2.0，符合要求。

3.2 线性关系考察

以峰面积（Y）对浓度（X）作线性回归。线性方程分别为：Y孟鲁司特钠=22720X-771.11（r=0.9999），Y杂质A=23468X-1993.2（r=0.9999），Y杂质D=27121X-1074.8（r=0.9999）。线性范围分别为孟鲁司特钠 1.014935-6.089610 μg/ mL，杂质A 1.028-30.84 μg/ mL，杂质D 1.027-15.405 μg/ mL。

3.3 定量限

取线性项下的最低浓度作为定量限，连续进样6针，记录峰面积，孟鲁司特钠、杂质A、杂质D的RSD分别为0.8%、0.8%、1.3%。

按照下表用稀释剂进一步稀释线性储备溶液（1和2），得到线性测试溶液，浓度为QL至相当于标准溶液的300%，每份线性测试溶液各进样1次。见表2。

2.4 定量限

取线性项下的最低浓度作为定量限，连续进样6针，记录峰面积。

2.5 方法精密度

取不少于20片样品，称重，磨粉，准确称取相当于25 mg的孟鲁司特的粉末，置25 mL的量瓶中，加入20 mL的稀释剂，机械振摇20 min，稀释剂稀释至刻度，混匀，用0.45 μm的滤膜过滤，弃去2 mL初滤液。按照测试方法制备6份孟鲁司特钠片样品溶液。

2.6 准确度

使用线性下的线性贮备液（1和2）作为准确度测试的标准贮备液。准确称取约500 mg的孟鲁司特钠片（10 mg）的粉末（相当于25 mg孟鲁司特），至25 mL的容量瓶中，按照表3精密移取线性储备溶液，加入适量的稀释剂，机械振摇20 min，稀释剂稀释至刻度，混匀，用0.45 μm的滤膜过滤，弃去2 mL初滤液。分别对9份准确度测试样品溶液各进样1次。

2.7 稳定性试验

在室温下保存分离度溶液（SS溶液）、标准溶液（Std）、样品溶液，在所有溶液制备后的0、8、24、48 h分别对SS溶液、对照品溶液、样品溶液进行进样。

3 实验结果

3.1 系统适用性

按上述色谱条件进样，得到，分离度溶液中，杂质B与孟鲁司特的分离度≥2.5，杂质C与孟鲁司特的分离度≥1.2，符合要求。标准溶液中，理论板数按孟鲁司特钠峰计≥4 000，拖尾因子（T）≤2.0，符合要求。

3.2 线性关系考察

以峰面积（Y）对浓度（X）作线性回归。线性方程分别为：Y孟鲁司特钠=22720X-771.11（r=0.9999），Y杂质A=23468X-1993.2（r=0.9999），Y杂质D=27121X-1074.8（r=0.9999）。线性范围分别为孟鲁司特钠 1.014935-6.089610 μg/ mL，杂质A 1.028-30.84 μg/ mL，杂质D 1.027-15.405 μg/ mL。

3.3 定量限

取线性项下的最低浓度作为定量限，连续进样6针，记录峰面积，孟鲁司特钠、杂质A、杂质D的RSD分别为0.8%、0.8%、1.3%。

按照下表用稀释剂进一步稀释线性储备溶液（1和2），得到线性测试溶液，浓度为QL至相当于标准溶液的300%，每份线性测试溶液各进样1次。见表2。

2.4 定量限

取线性项下的最低浓度作为定量限，连续进样6针，记录峰面积。

2.5 方法精密度

取不少于20片样品，称重，磨粉，准确称取相当于25 mg的孟鲁司特的粉末，置25 mL的量瓶中，加入20 mL的稀释剂，机械振摇20 min，稀释剂稀释至刻度，混匀，用0.45 μm的滤膜过滤，弃去2 mL初滤液。按照测试方法制备6份孟鲁司特钠片样品溶液。

2.6 准确度

使用线性下的线性贮备液（1和2）作为准确度测试的标准贮备液。准确称取约500 mg的孟鲁司特钠片（10 mg）的粉末（相当于25 mg孟鲁司特），至25 mL的容量瓶中，按照表3精密移取线性储备溶液，加入适量的稀释剂，机械振摇20 min，稀释剂稀释至刻度，混匀，用0.45 μm的滤膜过滤，弃去2 mL初滤液。分别对9份准确度测试样品溶液各进样1次。

2.7 稳定性试验

在室温下保存分离度溶液（SS溶液）、标准溶液（Std）、样品溶液，在所有溶液制备后的0、8、24、48 h分别对SS溶液、对照品溶液、样品溶液进行进样。

3 实验结果

3.1 系统适用性

按上述色谱条件进样，得到，分离度溶液中，杂质B与孟鲁司特的分离度≥2.5，杂质C与孟鲁司特的分离度≥1.2，符合要求。标准溶液中，理论板数按孟鲁司特钠峰计≥4 000，拖尾因子（T）≤2.0，符合要求。

3.2 线性关系考察

以峰面积（Y）对浓度（X）作线性回归。线性方程分别为：Y孟鲁司特钠=22720X-771.11（r=0.9999），Y杂质A=23468X-1993.2（r=0.9999），Y杂质D=27121X-1074.8（r=0.9999）。线性范围分别为孟鲁司特钠 1.014935-6.089610 μg/ mL，杂质A 1.028-30.84 μg/ mL，杂质D 1.027-15.405 μg/ mL。

3.3 定量限

取线性项下的最低浓度作为定量限，连续进样6针，记录峰面积，孟鲁司特钠、杂质A、杂质D的RSD分别为0.8%、0.8%、1.3%。