玉溪市山羊弓形虫病的血清学调查

2014-11-14欧阳仙杨耀兰宋红莲孙绍萍

云南畜牧兽医 2014年3期

欧阳仙，徐聪，薛涛，杨耀兰，吕嵘，宋红莲，孙绍萍

(1.玉溪市动物疫病预防控制中心，云南玉溪 653100;2.易门县动物卫生监督所，云南易门 651100;3.易门县龙泉街道农业综合服务中心，云南易门 651100)

弓形虫病(Toxoplasmosis)是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的严重危害宿主健康的人畜共患寄生虫病[1]。弓形虫是专性细胞内寄生的原虫，免疫功能正常的宿主感染后都呈无症状带虫状态，但免疫功能受损及先天感染者常导致严重的后果，孕妇感染可引起早产、流产甚至死胎[2－3]。弓形虫分布广泛，寄生宿主范围大，可感染人和猪、马、牛、羊、狗、猫等多种动物，其临床表现多样，从无症状隐性到亚临床到显性、重症以至死亡，主要侵害幼畜和新生仔畜，羔羊发病后表现为免疫力低下、生长缓慢、消瘦、贫血，严重时可引起死亡，以及呼吸和神经系统症状，怀孕母羊感染后因病变而导致流产、不孕、死胎，造成繁殖障碍。

近年来，玉溪市山羊不明原因流产病例增加，在排除布鲁氏菌病感染的前提下，怀疑可能与弓形虫感染有关。为了摸清玉溪市农村散养山羊弓形虫病的感染情况，2013年3—4月，应用间接血凝试验(IHA)对玉溪市8县(区)42个乡(镇)95户农户的427份山羊血清样品进行了弓形虫病的血清学调查，现将调查情况报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清

427份被检血清均采自玉溪市辖区乡(镇)自然放牧的山羊群。空腹静脉采血，摆成斜面，置4℃冰箱3 h后，放在室温下，待血清析出后收集血清，冷冻保存待检。

1.1.2 诊断液

弓形体病(IHA)抗原、阴性标准血清、阳性标准血清、稀释液购自中国农科院兰州兽医研究所，批号分别为:弓形体病(IHA)抗原130305、阴阳性标准血清121008、稀释液 130105。

1.1.3 器械

96孔“V”型有机玻璃微量反应板、微量加样器、微量振荡器。

1.2 方法

1.2.1 操作步骤

按照中华人民共和国农业行业标准NY/T 573—2002的规定，在96(12×8)孔V形有机玻璃板上进行检测，弓形虫IHA诊断制剂按瓶上标示毫升数，加入灭菌蒸馏水稀释摇匀，1 500～2 000 r/min离心 5～10min，弃上清液，加等量稀释液后摇匀，置4℃下静置24 h后使用。①加稀释液:用微量加样器在96孔有机玻璃反应板的每孔中加0.075mL稀释液。②加待检血清、阳性对照血清、阴性对照血清:第1孔加入相应被检血清0.025 mL。③稀释:稀释至第3孔，第4孔为稀释液对照。④加诊断液:将诊断液摇匀，每孔加0.025mL诊断液，加完后将反应板置微型振荡器上振荡1～2min，取下反应板，盖上一块与反应板大小相近的玻璃，置22～37℃作用2～3 h后观察结果。

1.2.2 结果判定

在阳性对照血清效价不低于1∶1 024，阴性对照血清除第1孔允许有前滞现象“+”外，其余各孔均为“－”，稀释液对照为“－”的前提下，对待检血清进行判定，否则应重做。待检血清效价达到或超过1∶64为阳性。“++”为阳性终点。

2 结果

通过上述方法对427份羊血清样本进行弓形虫病隐性感染抗体检测，阳性27份，阳性率6.32%(表1)。

3 讨论

(1)本次调查结果表明:玉溪市农村散养的山羊均存在不同程度山羊弓形虫隐性感染情况，平均感染率达6.32%，最高县达13.33%，最低县也达1.56%，表明了山羊弓形虫病感染的普遍性，也表明该病在农村散养山羊发生的风险依旧存在，对该病防控应高度重视。今后应加强对该病的检疫和病畜淘汰，加强中间宿主的管理，搞好环境卫生，净化弓形虫病，力争将该病的危害降到最低。