富硒对荞麦苗抗氧化物质含量及活性的影响
2014-10-23赵辰路周文美张建敏
赵辰路+周文美+张建敏
摘要：采用亚硒酸钠溶液作为富硒原料，对甜、苦2种荞麦苗进行富硒处理。荞麦苗中的主要抗氧化物质包括黄酮类化合物及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）。单因素和正交试验结果表明，富硒后能有效提高甜荞麦、苦荞麦中黄酮类化合物含量及GSH-Px活性，其中苦荞苗富硒后的效果优于甜荞苗；正交设计优化结果显示，最佳富硒方案为生长16 d、亚硒酸钠溶液培养浓度为40 mg/L、荞麦品种为苦荞、亚硒酸钠溶液20 mg/L浸种处理。
关键词：富硒；荞麦苗；黄酮类化合物；谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）
中图分类号：S517.01 文献标志码：A
文章编号：1002-1302（2014）08-0100-03
硒是人体必需的微量元素之一，人体缺硒可引起某些重要器官功能失调，导致许多严重疾病发生[1]。通过对硒的补充，可以提高机体免疫能力，维护心脏、肝脏等重要器官的正常功能，预防老年性心脑血管疾病的发生，同时具有多种保健功能。荞麦营养成分全面，有“五谷之王”的美称。荞麦富含淀粉、蛋白质、脂肪、维生素、粗纤维、矿物元素等，同时富含类黄酮化合物。大量研究表明，芦丁是荞麦中起保健作用的主要功能成分，它能有效降低微血管脆性和渗透性，具有多种保健功能[2]。荞麦芽作为一种新兴芽菜，具有良好的风味及保健作用。相关文献报道，通过对植物进行富硒处理，能提升植物中硒含量、黄酮类化合物含量及GSH-Px活性。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
材料：市售甜荞及苦荞种子发芽后生长13～20 d并经过富硒处理的荞麦苗，干燥粉碎后，过40目筛备用。
试剂：柠檬酸三钠、叠氮钠、乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、二硫二硝基苯甲酸（DTNB）、谷胱甘肽（GSH）标准品、芸香苷标准品、无水乙醇、30% 过氧化氢；试验提取与分析用水为超纯水。
电子天平FA2004N（上海箐海仪器有限公司）、可见分光光度计722S（上海箐华科技仪器有限公司）、KQ-300DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、SF-170型高速粉碎机（上海中药机械厂）、HG-101-1电热鼓风干燥箱（南京盈鑫实验仪器有限公司）。
1.2 试验方法
1.2.1 黄酮类化合物含量的测定 采用分光光度计法[3-6]测定。吸取0.2 mg/mL芸香苷标准溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL置于6个25 mL的容量瓶中，依次编号；各加5%NaNO2溶液0.4 mL，摇匀后放置6 min，分别加入10% Al（NO3）3 溶液0.4 mL，摇匀后放置6 min；然后再各自加入 1 mol/L NaOH溶液4 mL，最后用50%乙醇定容至刻度线，摇匀，放置15 min，在波长510 nm处测定吸光度。精确称取 1.0 g 复习荞麦芽，加入10 mL 50%乙醇，超声处理（240 W）在45 ℃下提取30 min，多次离心去不容物，用相同浓度乙醇定容至25 mL，吸取1.0 mL按照标准曲线测定方法，在波长510 nm处测定吸光度。
1.2.2 GSH-Px活性测定 采用DTNB比色法[7-8]测定，用 13～20 d 生长期的甜荞苗及苦荞苗整株。取1 g 新鲜材料，加10 mL 磷酸提取液冰浴中研磨成匀浆，12 000 r/min 离心15 min，分别取200 μL 上清液置于2 支试管中，将其中1 支放在沸水浴中加热10 min。分别向以上2 支试管中加入 400 μL GSH 溶液和200 μL 37 ℃ 预热的H2O2溶液，迅速置于37 ℃水浴3 min，加入4 mL偏磷酸溶液，12 000 r/min 离心10 min，保留上清液，其余步骤与黄爱缨等方法[7-8]相同。
2 结果与分析
2.1 单因素对荞麦苗中黄酮类化合物含量的影响
2.1.1 标准曲线的绘制 按照“1.2.1”中的标准曲线的绘制方法，测得对应浓度下的吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线（图1）。
2.1.2 不同生长时期荞麦苗中黄酮类化合物的含量 在常温环境下分别使甜荞麦苗、苦荞麦苗生长14～19 d，烘干粉碎后，采用分光光度法分别测定甜荞麦苗、苦荞麦苗不同生长时期下的黄酮类化合物含量。由图2可知，苦荞麦苗中黄酮类化合物含量远远高于甜荞麦苗。当苦荞苗生长至14 d时，黄酮类化合物含量为10.117 mg/g；而甜荞麦苗生长至14 d时黄酮类化合物含量为5.748 mg/g，随着生长天数增加，荞麦苗中的黄酮类化合物含量逐渐升高。当生长至17 d时，苦荞麦苗中黄酮类化合物含量达到最大值，为12.584 mg/g；甜荞麦苗中黄酮类化合物含量则在生长 18 d 时达到最大值，为8.125 mg/g，随后荞麦苗中的黄酮类化合物含量逐渐降低。
2.1.3 富硒后不同生长时期荞麦苗中黄酮类化合物的含量 荞麦苗在20 mg/L亚硒酸钠溶液影响下，生长开始受到一定抑制，当使用亚硒酸钠溶液浓度达到40 mg/L时，生长受到较为严重的抑制，发芽率降低至70%左右，当使用浓度达到 60 mg/L 时，发芽率降低至50%以下。本试验用浓度为 20 mg/L 的亚硒酸钠溶液分别培养甜荞麦、苦荞麦，当荞麦苗生长至14～19 d时，烘干粉碎，采用分光光度法分别测定富硒后不同生长时期荞麦苗中黄酮类化合物的含量。由图3可知，经过富硒后，荞麦苗中黄酮类化合物含量有所提升，其中苦荞麦苗中的黄酮含量提高的幅度高于甜荞麦苗中的黄酮含量。当富硒苦荞苗生长至14 d时，黄酮类化合物含量为10.424 mg/g；而甜荞麦苗生长至14 d时，黄酮类化合物含量为6.878 mg/g，随着生长天数增加，荞麦苗中的黄酮类化合物含量逐渐增高。当生长至17 d时，苦荞麦苗中黄酮类化合物含量达到最大值，为12.847 mg/g；甜荞麦苗中黄酮类化合物含量则在生长18 d时达到最大值，为 8.895 mg/g，随后荞麦苗中的黄酮类化合物含量逐渐降低。
2.2 单因素对荞麦苗中GSH-Px活性的影响
2.2.1 标准曲线的绘制 按照“1.2.2”中的方法绘制GSH-Px标准曲线，GSH浓度分别为0、20、40、60、80、100 μmol/L，以GSH浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线（图4）。
2.2.2 不同生长时期荞麦苗中GSH-Px活性的变化 在常温环境下甜荞麦、苦荞麦生长14～19 d，烘干粉碎后，采用分光光度法测定甜荞麦、苦荞麦苗不同生长时期的GSH-Px活性，结果见图5。甜荞麦苗的GSH-Px活性高于苦荞麦苗，当生长至13 d时，甜荞苗GSH-Px活性为0.724 4 μmol /（g·min），而苦荞麦苗GSH-Px活性为0.306 1 μmol /（g·min），随着生长天数增加，荞麦苗中的GSH-Px活性也逐渐增高。当生长至17 d时，甜荞麦苗、苦荞麦苗中GSH-Px活性都达到最大值，分别为0.847 7、 0.597 7 μmol/（g·min）]随后荞麦苗中GSH-Px活性逐渐降低。
2.2.3 富硒后荞麦苗中GSH-Px活性的变化 在常温环境下甜荞麦、苦荞麦生长14～19 d，生长过程中以浓度为 20 mg/L 亚硒酸钠溶液水培富硒，烘干粉碎后，采用分光光度法测定甜荞麦苗、苦荞麦苗不同生长时期下的GSH-Px活性，结果见图6。
经20 mg/L亚硒酸钠溶液富硒处理的荞麦苗GSH-Px活性发生了较大变化，苦荞麦苗的GSH-Px活性普遍高于甜荞麦苗。生长至14 d时，甜荞麦苗GSH-Px活性为 0.739 8 μmol /（g·min），苦荞麦苗GSH-Px活性为 0.860 1 μmol/（g·min），随着生长天数增加，荞麦苗中的 GSH-Px 活性也逐渐增高。当苦荞苗生长至16 d时GSH-Px活性达到最大值，为1.020 5 μmol /（g·min），当甜荞苗生长至18 d时GSH-Px活性达到最大值，为0.986 4 μmol /（g·min），随后荞麦苗中的GSH-Px活性逐渐降低。
2.3 正交试验结果
通过正交试验设计方法，对不同品种荞麦、浸种处理、生长时间、硒使用浓度4个因素对荞麦苗中GSH-Px活性、黄酮类化合物含量的影响进行研究（表1、表2）。结果表明，当亚硒酸钠溶液浓度高于40 mg/L时对荞麦出芽及生长产生了较大的抑制作用。
表2结果表明，以黄酮类化合物含量为指标，荞麦品种的极差最大，表明荞麦品种的影响最大，各因素对黄酮类化合物的影响程度依次为C>B>A>D，且C因素对黄酮类化合物含量的影响达到了显著性差异，反应条件最佳组合为C2B4A3D1。以GSH-Px活性为指标，富硒处理中的亚硒酸钠溶液浓度影响最大，不同因素对GSH-Px活性的影响依次为B>A>C>D，最佳组合为B4A2C1D1，综合考虑黄酮类化合物和GSH-Px活性2个指标，荞麦品种对黄酮类化合物的影响显著，对GSH-Px活性的影响相对较小，亚硒酸钠溶液浓度及浸种处理选择一致的B4和D1。从荞麦品种考虑，苦荞黄酮类化合物含量远高于甜荞，富硒后GSH-Px活性显著提高。从生长天数考虑为16 d。综合考虑，最佳组合应为A2B4C2D1，即生长时间16 d、亚硒酸钠溶液培养浓度为 40 mg/L、荞麦品种为苦荞、20 mg/L亚硒酸钠溶液浸种处理。
3 讨论与结论
经过试验证实，苦荞麦苗中黄酮类化合物含量远远高于甜荞麦苗，甜荞麦苗的GSH-Px活性高于苦荞麦苗。随着生长时间延长，荞麦苗中的黄酮类化合物含量逐渐增高。当生长至17 d时，苦荞麦苗中黄酮类化合物含量值达到最大，为12.584 mg/g；甜荞麦苗中黄酮类化合物含量则在生长18 d时达到最大值，为8.125 mg/g；当生长至17 d时，甜荞麦苗、苦荞麦苗中GSH-Px活性都达到最大值，分别为0.847 7、0.597 7 μmol/（g·min）。随后荞麦苗中的黄酮类化合物含量及GSH-Px活性逐渐降低。
经过富硒后，荞麦苗中的黄酮类化合物含量有所提高，苦荞麦苗中的黄酮含量提高的幅度高于甜荞麦苗；荞麦苗的GSH-Px活性发生了较大变化，苦荞麦苗的GSH-Px活性普遍高于甜荞麦苗。随着生长天数增加，荞麦苗中的黄酮类化合物含量及GSH-Px活性逐渐增高。当生长至17 d时，苦荞麦苗中黄酮类化合物含量达最大值，为12.847 mg/g；甜荞麦苗中黄酮类化合物含量则在生长18 d时达到最大值，为8.895 mg/g。当苦荞苗生长至16 d时，GSH-Px活性达到最大值，为1.020 5 μmol/（g·min），当甜荞苗生长至18 d时GSH-Px活性达到最大值，为0.986 4 μmol/（g·min）。随后荞麦苗中的黄酮类化合物含量及GSH-Px活性逐渐降低。
经过正交试验得出结论，综合考虑富硒试验中最佳组合应为A2B4C2D1，即生长天数16 d、亚硒酸钠溶液培养浓度为40 mg/L、荞麦品种为苦荞、20 mg/L亚硒酸钠溶液浸种处理。
参考文献：
[1]Moskovitz J，Stadtman E R. Selenium-deficient diet enhances protein oxidation and affects methionine sulfoxide reductase （MsrB） protein level in certain mouse tissues[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2003，100（13）：7486-7490.
[2]黄凯丰，时 政，欧 腾，等. 荞麦苗的营养保健成分分析[J]. 北方园艺，2011（10）：22-24.
[3]查甫本，陈向明. 山核桃外果皮黄酮提取条件的研究[J]. 合肥学院学报：自然科学版，2009，19（3）：68-72.
[4]陆 英，吴朝比，蒋华军，等. 红薯叶黄酮分离纯化工艺及抗氧化性研究[J]. 食品科学，2009，30（14）：114-118.
[5]杨 乐，王洪新. 笋壳黄酮分离纯化工艺及其抗氧化性[J]. 食品与发酵工业，2010，36（8）：184-189.
[6]吴建中，欧仕益，汪 勇. 甘蔗叶中黄酮类物质的提取及其抗氧化性研究[J]. 现代食品科技，2009，25（2）：165-167.
[7]黄爱缨，吴珍龄. 水稻谷胱甘肽过氧化物酶的测定法[J]. 西南农业大学学报，1999，21（4）：24-27.
[8]Flohe L. Assay of glutathione peroxidase[J]. Methods in Enzymelogy，1984，104：114-117.
2.2 单因素对荞麦苗中GSH-Px活性的影响
2.2.1 标准曲线的绘制 按照“1.2.2”中的方法绘制GSH-Px标准曲线，GSH浓度分别为0、20、40、60、80、100 μmol/L，以GSH浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线（图4）。
2.2.2 不同生长时期荞麦苗中GSH-Px活性的变化 在常温环境下甜荞麦、苦荞麦生长14～19 d，烘干粉碎后，采用分光光度法测定甜荞麦、苦荞麦苗不同生长时期的GSH-Px活性，结果见图5。甜荞麦苗的GSH-Px活性高于苦荞麦苗，当生长至13 d时，甜荞苗GSH-Px活性为0.724 4 μmol /（g·min），而苦荞麦苗GSH-Px活性为0.306 1 μmol /（g·min），随着生长天数增加，荞麦苗中的GSH-Px活性也逐渐增高。当生长至17 d时，甜荞麦苗、苦荞麦苗中GSH-Px活性都达到最大值，分别为0.847 7、 0.597 7 μmol/（g·min）]随后荞麦苗中GSH-Px活性逐渐降低。
2.2.3 富硒后荞麦苗中GSH-Px活性的变化 在常温环境下甜荞麦、苦荞麦生长14～19 d，生长过程中以浓度为 20 mg/L 亚硒酸钠溶液水培富硒，烘干粉碎后，采用分光光度法测定甜荞麦苗、苦荞麦苗不同生长时期下的GSH-Px活性，结果见图6。
经20 mg/L亚硒酸钠溶液富硒处理的荞麦苗GSH-Px活性发生了较大变化，苦荞麦苗的GSH-Px活性普遍高于甜荞麦苗。生长至14 d时，甜荞麦苗GSH-Px活性为 0.739 8 μmol /（g·min），苦荞麦苗GSH-Px活性为 0.860 1 μmol/（g·min），随着生长天数增加，荞麦苗中的 GSH-Px 活性也逐渐增高。当苦荞苗生长至16 d时GSH-Px活性达到最大值，为1.020 5 μmol /（g·min），当甜荞苗生长至18 d时GSH-Px活性达到最大值，为0.986 4 μmol /（g·min），随后荞麦苗中的GSH-Px活性逐渐降低。
2.3 正交试验结果
通过正交试验设计方法，对不同品种荞麦、浸种处理、生长时间、硒使用浓度4个因素对荞麦苗中GSH-Px活性、黄酮类化合物含量的影响进行研究（表1、表2）。结果表明，当亚硒酸钠溶液浓度高于40 mg/L时对荞麦出芽及生长产生了较大的抑制作用。
表2结果表明，以黄酮类化合物含量为指标，荞麦品种的极差最大，表明荞麦品种的影响最大，各因素对黄酮类化合物的影响程度依次为C>B>A>D，且C因素对黄酮类化合物含量的影响达到了显著性差异，反应条件最佳组合为C2B4A3D1。以GSH-Px活性为指标，富硒处理中的亚硒酸钠溶液浓度影响最大，不同因素对GSH-Px活性的影响依次为B>A>C>D，最佳组合为B4A2C1D1，综合考虑黄酮类化合物和GSH-Px活性2个指标，荞麦品种对黄酮类化合物的影响显著，对GSH-Px活性的影响相对较小，亚硒酸钠溶液浓度及浸种处理选择一致的B4和D1。从荞麦品种考虑，苦荞黄酮类化合物含量远高于甜荞，富硒后GSH-Px活性显著提高。从生长天数考虑为16 d。综合考虑，最佳组合应为A2B4C2D1，即生长时间16 d、亚硒酸钠溶液培养浓度为 40 mg/L、荞麦品种为苦荞、20 mg/L亚硒酸钠溶液浸种处理。
3 讨论与结论
经过试验证实，苦荞麦苗中黄酮类化合物含量远远高于甜荞麦苗，甜荞麦苗的GSH-Px活性高于苦荞麦苗。随着生长时间延长，荞麦苗中的黄酮类化合物含量逐渐增高。当生长至17 d时，苦荞麦苗中黄酮类化合物含量值达到最大，为12.584 mg/g；甜荞麦苗中黄酮类化合物含量则在生长18 d时达到最大值，为8.125 mg/g；当生长至17 d时，甜荞麦苗、苦荞麦苗中GSH-Px活性都达到最大值，分别为0.847 7、0.597 7 μmol/（g·min）。随后荞麦苗中的黄酮类化合物含量及GSH-Px活性逐渐降低。
经过富硒后，荞麦苗中的黄酮类化合物含量有所提高，苦荞麦苗中的黄酮含量提高的幅度高于甜荞麦苗；荞麦苗的GSH-Px活性发生了较大变化，苦荞麦苗的GSH-Px活性普遍高于甜荞麦苗。随着生长天数增加，荞麦苗中的黄酮类化合物含量及GSH-Px活性逐渐增高。当生长至17 d时，苦荞麦苗中黄酮类化合物含量达最大值，为12.847 mg/g；甜荞麦苗中黄酮类化合物含量则在生长18 d时达到最大值，为8.895 mg/g。当苦荞苗生长至16 d时，GSH-Px活性达到最大值，为1.020 5 μmol/（g·min），当甜荞苗生长至18 d时GSH-Px活性达到最大值，为0.986 4 μmol/（g·min）。随后荞麦苗中的黄酮类化合物含量及GSH-Px活性逐渐降低。
经过正交试验得出结论，综合考虑富硒试验中最佳组合应为A2B4C2D1，即生长天数16 d、亚硒酸钠溶液培养浓度为40 mg/L、荞麦品种为苦荞、20 mg/L亚硒酸钠溶液浸种处理。
参考文献：
[1]Moskovitz J，Stadtman E R. Selenium-deficient diet enhances protein oxidation and affects methionine sulfoxide reductase （MsrB） protein level in certain mouse tissues[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2003，100（13）：7486-7490.
[2]黄凯丰，时 政，欧 腾，等. 荞麦苗的营养保健成分分析[J]. 北方园艺，2011（10）：22-24.
[3]查甫本，陈向明. 山核桃外果皮黄酮提取条件的研究[J]. 合肥学院学报：自然科学版，2009，19（3）：68-72.
[4]陆 英，吴朝比，蒋华军，等. 红薯叶黄酮分离纯化工艺及抗氧化性研究[J]. 食品科学，2009，30（14）：114-118.
[5]杨 乐，王洪新. 笋壳黄酮分离纯化工艺及其抗氧化性[J]. 食品与发酵工业，2010，36（8）：184-189.
[6]吴建中，欧仕益，汪 勇. 甘蔗叶中黄酮类物质的提取及其抗氧化性研究[J]. 现代食品科技，2009，25（2）：165-167.
[7]黄爱缨，吴珍龄. 水稻谷胱甘肽过氧化物酶的测定法[J]. 西南农业大学学报，1999，21（4）：24-27.
[8]Flohe L. Assay of glutathione peroxidase[J]. Methods in Enzymelogy，1984，104：114-117.
2.2 单因素对荞麦苗中GSH-Px活性的影响
2.2.1 标准曲线的绘制 按照“1.2.2”中的方法绘制GSH-Px标准曲线，GSH浓度分别为0、20、40、60、80、100 μmol/L，以GSH浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线（图4）。
2.2.2 不同生长时期荞麦苗中GSH-Px活性的变化 在常温环境下甜荞麦、苦荞麦生长14～19 d，烘干粉碎后，采用分光光度法测定甜荞麦、苦荞麦苗不同生长时期的GSH-Px活性，结果见图5。甜荞麦苗的GSH-Px活性高于苦荞麦苗，当生长至13 d时，甜荞苗GSH-Px活性为0.724 4 μmol /（g·min），而苦荞麦苗GSH-Px活性为0.306 1 μmol /（g·min），随着生长天数增加，荞麦苗中的GSH-Px活性也逐渐增高。当生长至17 d时，甜荞麦苗、苦荞麦苗中GSH-Px活性都达到最大值，分别为0.847 7、 0.597 7 μmol/（g·min）]随后荞麦苗中GSH-Px活性逐渐降低。
2.2.3 富硒后荞麦苗中GSH-Px活性的变化 在常温环境下甜荞麦、苦荞麦生长14～19 d，生长过程中以浓度为 20 mg/L 亚硒酸钠溶液水培富硒，烘干粉碎后，采用分光光度法测定甜荞麦苗、苦荞麦苗不同生长时期下的GSH-Px活性，结果见图6。
经20 mg/L亚硒酸钠溶液富硒处理的荞麦苗GSH-Px活性发生了较大变化，苦荞麦苗的GSH-Px活性普遍高于甜荞麦苗。生长至14 d时，甜荞麦苗GSH-Px活性为 0.739 8 μmol /（g·min），苦荞麦苗GSH-Px活性为 0.860 1 μmol/（g·min），随着生长天数增加，荞麦苗中的 GSH-Px 活性也逐渐增高。当苦荞苗生长至16 d时GSH-Px活性达到最大值，为1.020 5 μmol /（g·min），当甜荞苗生长至18 d时GSH-Px活性达到最大值，为0.986 4 μmol /（g·min），随后荞麦苗中的GSH-Px活性逐渐降低。
2.3 正交试验结果
通过正交试验设计方法，对不同品种荞麦、浸种处理、生长时间、硒使用浓度4个因素对荞麦苗中GSH-Px活性、黄酮类化合物含量的影响进行研究（表1、表2）。结果表明，当亚硒酸钠溶液浓度高于40 mg/L时对荞麦出芽及生长产生了较大的抑制作用。
表2结果表明，以黄酮类化合物含量为指标，荞麦品种的极差最大，表明荞麦品种的影响最大，各因素对黄酮类化合物的影响程度依次为C>B>A>D，且C因素对黄酮类化合物含量的影响达到了显著性差异，反应条件最佳组合为C2B4A3D1。以GSH-Px活性为指标，富硒处理中的亚硒酸钠溶液浓度影响最大，不同因素对GSH-Px活性的影响依次为B>A>C>D，最佳组合为B4A2C1D1，综合考虑黄酮类化合物和GSH-Px活性2个指标，荞麦品种对黄酮类化合物的影响显著，对GSH-Px活性的影响相对较小，亚硒酸钠溶液浓度及浸种处理选择一致的B4和D1。从荞麦品种考虑，苦荞黄酮类化合物含量远高于甜荞，富硒后GSH-Px活性显著提高。从生长天数考虑为16 d。综合考虑，最佳组合应为A2B4C2D1，即生长时间16 d、亚硒酸钠溶液培养浓度为 40 mg/L、荞麦品种为苦荞、20 mg/L亚硒酸钠溶液浸种处理。
3 讨论与结论
经过试验证实，苦荞麦苗中黄酮类化合物含量远远高于甜荞麦苗，甜荞麦苗的GSH-Px活性高于苦荞麦苗。随着生长时间延长，荞麦苗中的黄酮类化合物含量逐渐增高。当生长至17 d时，苦荞麦苗中黄酮类化合物含量值达到最大，为12.584 mg/g；甜荞麦苗中黄酮类化合物含量则在生长18 d时达到最大值，为8.125 mg/g；当生长至17 d时，甜荞麦苗、苦荞麦苗中GSH-Px活性都达到最大值，分别为0.847 7、0.597 7 μmol/（g·min）。随后荞麦苗中的黄酮类化合物含量及GSH-Px活性逐渐降低。
经过富硒后，荞麦苗中的黄酮类化合物含量有所提高，苦荞麦苗中的黄酮含量提高的幅度高于甜荞麦苗；荞麦苗的GSH-Px活性发生了较大变化，苦荞麦苗的GSH-Px活性普遍高于甜荞麦苗。随着生长天数增加，荞麦苗中的黄酮类化合物含量及GSH-Px活性逐渐增高。当生长至17 d时，苦荞麦苗中黄酮类化合物含量达最大值，为12.847 mg/g；甜荞麦苗中黄酮类化合物含量则在生长18 d时达到最大值，为8.895 mg/g。当苦荞苗生长至16 d时，GSH-Px活性达到最大值，为1.020 5 μmol/（g·min），当甜荞苗生长至18 d时GSH-Px活性达到最大值，为0.986 4 μmol/（g·min）。随后荞麦苗中的黄酮类化合物含量及GSH-Px活性逐渐降低。
经过正交试验得出结论，综合考虑富硒试验中最佳组合应为A2B4C2D1，即生长天数16 d、亚硒酸钠溶液培养浓度为40 mg/L、荞麦品种为苦荞、20 mg/L亚硒酸钠溶液浸种处理。
参考文献：
[1]Moskovitz J，Stadtman E R. Selenium-deficient diet enhances protein oxidation and affects methionine sulfoxide reductase （MsrB） protein level in certain mouse tissues[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2003，100（13）：7486-7490.
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[6]吴建中，欧仕益，汪 勇. 甘蔗叶中黄酮类物质的提取及其抗氧化性研究[J]. 现代食品科技，2009，25（2）：165-167.
[7]黄爱缨，吴珍龄. 水稻谷胱甘肽过氧化物酶的测定法[J]. 西南农业大学学报，1999，21（4）：24-27.
[8]Flohe L. Assay of glutathione peroxidase[J]. Methods in Enzymelogy，1984，104：114-117.
