液相色谱分析卡那霉素与庆大霉素C组分

赛默飞

卡那霉素分析

氨基糖苷类抗生素（Aminoglycosides）是由氨基糖与氨基环醇通过氧桥连接而成的苷类抗生素，它是抗生素中很重要的一类。研究表明：此类药物可影响细菌蛋白质合成的全过程，妨碍初始复合物的合成，诱导细菌合成错误蛋白以及阻抑已合成蛋白的释放，从而导致细菌死亡。由于氨基糖苷类抗生素无紫外吸收，在普通C18色谱柱上保留较弱，所以对于此类抗生素的分析一直是个难点，本文使用UPLC结合CAD检测器分析卡那霉素，方法灵敏度和准确性高，稳定性好。

色谱柱：Waters BEH C18，1.7μm，2.1×100 mm，P/N：186002352；

流动相：100 mM TFA/H2O-MeOH（97：3）；

检测方式：Corona Ultra电雾式检测器，雾化器温度：25℃；气体（N2）压力：35.0 psi；数据采集频率：10Hz；

流速：0.2 mL/min；

柱温：30℃；

进样量：3μL。

按照供试品溶液制备项下制得以下3种卡那霉素注射液供试品溶液，注入液相色谱仪进行测定，计算含量结果见表1，测定图谱见图1、图2.

本实验采用UPLC-CAD对卡那霉素含量进行测定，实验精密度、重复性、稳定性都较好，方法准确度良好，灵敏度高。供试品溶液中卡那霉素与卡那霉素B分离度大于2.0，该方法完全可以用于其有关物质卡那霉素B的测定。CAD动态范围较宽，本方法不进行对数转换直接计算标准曲线方程y=52782x+19538，R值0.998（0.3μg～3μg）。电雾式检测器设置参数少，稳定性较好，受环境影响小。该检测器在测定氨基糖苷类物质上具有较高推广应用的价值。

庆大霉素C组分分析

庆大霉素是为数不多的热稳定性的抗生素，在人用药和兽药领域均大范围应用。这是一种常见氨基糖苷类抗生素，主要用于治疗细菌感染，尤其是革兰氏阴性菌引起的感染。庆大霉素能与细菌核糖体30s亚基结合，阻断细菌蛋白质合成。庆大霉素的主要成分包括四个组分，统称庆大霉素C组分，2010版中国药典使用ELSD测定，本文使用CAD检测器分析庆大霉素C组分，分离度较高，稳定性和重现性较ELSD有较大提高。图3、图4为测定谱图。表2、表3为分析结果。

色谱柱：Acclaim 120 C18，5μm，4.6×150mm，P/N：059149；

流动相：100mmol/L TFA/H2OMeOH（92：8）；

检测方式：Corona Ultra电雾式检测器，雾化器温度：25℃；气体（N2）压力：35.0 psi；数据采集频率：5 Hz；

流速：0.6 mL/min；

柱温：30℃；

进样量：10μL。

该样品C组分合格，符合C 1 25%～50%，C1a 15%～40%，（c2+c2a）% 20%～50%药典规定。

本实验采用HPLC-CAD检测器对庆大霉素C组分进行测定，实验精密度、重复性、线性都较好。与蒸发光散射测定方法比较，不取对数线性相关系数就可以达0.999，从而计算结果不用进行对数转换，较ELSD检测大大简化了含量计算过程。对照品和供试品溶液色谱图中C2和C2a之间的峰为小诺霉素峰，它们三个之间的分离度大于2.0，由于该化合物为庆大霉素C组分中的次要成分，所以未对其进行分析。CAD检测器操作简单，设置参数少，稳定性较好，受环境影响因素少。该检测器在测定氨基糖苷类物质上具有较高推广应用的价值。endprint