槲白合剂对小鼠白色念珠菌阴道炎的疗效及体外杀菌效果

姜妍　金玲　王妍　韩淑英

摘 要：目的 观察槲白合剂体内对小鼠念珠菌性阴道炎的疗效及体外杀菌效果。方法 体外测定槲白合剂对白色念珠菌的最小杀菌浓度（MBC）；体内观察小鼠阴道分泌物念珠菌转阴率、阴道灌洗液载菌量。结果 槲白合剂对白色念珠菌的MBC为1.30 mg/ml，槲白合剂与氟康唑效价比MBC为1∶1；槲白合剂及氟康唑可使白色念珠菌转阴率增加及载菌量减少，具有剂量依赖性，其高剂量与氟康唑相近。结论 槲白合剂对小鼠白色念珠菌性阴道炎有较好的疗效，体外具有明显的杀菌作用。

关键词：槲白合剂 白色念珠菌 阴道炎

中图分类号：R285.6 文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2014）08（a）-0201-01

1 材料

雌性SPF级昆明小鼠（北京华阜康生物科技股份有限公司）；槲皮素、白藜芦醇单体粉末（98%，Sigma公司）；唐山市开滦医院检验科提供白色念珠菌临床新分离菌株。

2 方法

2.1 体外MBC测定

每一药液挑选10支无菌试管，采用二倍连续稀释法，不加菌作阴性对照，第10管只加菌液。各管取10ul接种到沙堡氏琼脂上，48 h。无菌生长，且含药浓度最低的管，即为MBC。

2.2 分组与给药

（1）正常对照组；白色念珠菌性阴道炎小鼠随机分5组；（2）模型对照组；（3）氟康唑治疗组，（4）～（6）为槲白合剂低、中、高（L-槲白合剂、M-槲白合剂、H-槲白合剂）剂量组，分别按0.1 ml/10 g经阴道灌注给药，给药量依次为40、80、160 mg/kg；n=12，各组均给药7 d，1/日。

2.3 体内阴道灌洗液检测

各组小鼠均于给药第0、5、8 d用100 ul PBS灌洗阴道5～6次，取10 μl，镜检，未检出芽生孢子及菌丝者标为“-”阴性，转阴小鼠数/该组小鼠总数为转阴率；取200倍比稀释灌洗液20μl分别接种于2沙堡氏培养基上，37 ℃，48 h，计菌落数，求出同一标本平均菌落数X，计算菌落形成单位（CFU） CFU/ml标本=X×1/0.020×稀释度×1/标本体积[1]。

2.4 统计方法

采用SPSS16.0软件，计量资料数据采用方差分析，计数资料采用c2检验。

3 结果

3.1 体外抗白色念珠菌的MBC

槲白合剂MBC为1.30 mg/ml；氟康唑MBC为1.31 mg/ml，槲白合剂与氟康唑的效价比为1∶1。

3.2 体内结果

3.2.1 各组白色念珠菌转阴数及转阴率

给药后第5、8天，槲白合剂随着剂量的增加，真菌孢子转阴数及转阴率也增加，其中高剂量组与氟康唑组相近。（表1）

3.2.2 各组白色念珠菌载菌量（CFU）

用药5和8 d后，各给药组CFU值有不同程度的降低，以氟康唑组降低最明显，治疗8 d后效果更好；槲白合剂各剂量组均能降低阴道灌洗液菌落计数均值，随着槲白合剂剂量的增高，阴道灌洗液菌落计数逐渐下降，且高剂量组作用更显著（P<0.01）。（表2）

4 讨论

白念珠菌是人类常见的真菌病原体之一。由于临床上抗真菌药物的大量使用，使真菌产生耐药性的情况日益严重，因此亟需研发高效低毒的抗真菌药物。我国医药学研究者开始关注中药的抗真菌作用，并取得可喜成果[2]。本研究槲皮素与白藜芦醇均为黄酮类成分，具有抗细菌、抗病毒、抗氧化等多种药理作用。但有关槲皮素与白藜芦醇联合应用抗真菌作用未见报道。

本研究体外抗菌实验结果：槲白合剂对白色念珠菌的MBC是1.30 mg/ml，槲白合剂与对照药氟康唑的效价比MBC是1∶1，表明槲白合剂有较强的杀灭真菌作用，与氟康唑相近；体内实验通过对小鼠阴道冲洗液念珠菌镜检转阴率和载菌量等综合指标，分析了槲白合剂对小鼠白色念珠菌阴道炎的治疗作用。结果表明，与模型组和给药前比较，随着给药时间的延长，症状逐渐好转，念珠菌转阴率增高，载菌量下降，有明显的量效关系，高剂量与氟康唑似。

参考文献

[1] [Fidel Jr，Paul L，Cutright J，Steele C.Effects of Reproductive Hormones on Experimental Vaginal Candidiasis[J].Infect Immun，2000，68（2）：651-657.

[2] 万江帆，唐春萍，沈志滨，等.中药单体联用抗真菌药物抗耐药白色念珠菌的研究[J].中国中药杂志，2014，19（1）：35-37.