贯黄感冒颗粒含量测定方法研究

徐冰钰

摘要：目的建立贯黄感冒颗粒中5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮甙含量测定方法。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为Agilent Zorbax SB C18（4.6×250mm，5μm），流动相为水-乙腈（65∶35），检测波长为330nm，流速1 mL·min-1。结果5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷进样量在81.6ng～1020ng范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999954），平均回收率为99.16%，RSD为1.39%（n=9）。结论本法准确可靠，对提高贯黄感冒颗粒质量标准提供了依据。

关键词：贯黄感冒颗粒；含量测定；方法

中图分类号：R284.2文献标志码：A文章编号：1007-2349（2014）03-0054-02

贯黄感冒颗粒是由贯众、黄皮叶、路边青、三叉苦、生姜、马来酸氯苯那敏加工制成的中药复方制剂，具有清热解表，宣肺止咳的功效。临床上常用于治疗风热感冒所致的发热恶风，头痛鼻塞，咳嗽痰多。贯黄感冒颗粒质量标准过去为海南省地方标准[1]，曾有关于对其处方中中药材路边青进行薄层色谱鉴别和对其处方中马来酸氯苯那敏进行含量测定的报道[2]。现行的标准中也将这两者列入了贯黄感冒颗粒质量标准中，但未见对其处方中其他中药材成分进行含量测定的研究报道。5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷为本公司从其处方中药材路边青中提取分离纯化所得的单一成分，采用HPLC法对贯黄感冒颗粒中的该成分进行含量测定研究，为提高贯黄感冒颗粒质量标准提供了参考依据。

1仪器、试验材料、对照品、样品

仪器：美国Waters高效液相色谱仪（600泵；2487双波长紫外检测器；7725i手动进样器）；TU-1901普析双光束紫外可见分光光度计；赛多利斯BP221S万分之一电子天平；赛多利斯MC210S十万分之一电子天平。

试验材料：乙腈、甲醇为色谱纯（美国Fisher公司）；其余均为分析纯试剂；水为超纯水。

对照品：5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷（归一化法测得含量为98.64%，批号：20070101），由昆明圣火药业（集团）有限公司技术开发中心提供。

样品：贯黄感冒颗粒，由昆明圣火药业（集团）有限公司提供。

2色谱条件

色谱柱：Agilent Zorbax SB C18（4.6×250 mm，5 μm）；流动相：水-乙腈（65∶35）；检测波长：330 nm；流速：1 mL/min；进样量：10 μL；柱温：25℃。

3溶液的配制

3.1对照品配制精密称取5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷适量，加甲醇使溶解，制成每1 mL含40 μg的溶液，即得。

3.2供试品溶液制备取装量差异项下的本品内容物，研细，取约10 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

4方法与结果

4.1线性关系考察取5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷对照品溶液，分别进样2、5、10、15、20、25 μL。记录色谱图，以峰面积为纵坐标（Y），以进样量（ng）为横坐标（X），进行线性回归，得回归方程：Y=2.78×106X+8.21×103，r=0.999954。表明5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷在81.6 ng～1020 ng范围内呈良好的线性关系。

4.2精密度试验制备1份供试品溶液，精密吸取10 μL，连续进样6次，记录色谱图，峰面积平均值为2211543，RSD为0.78%。表明5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷含量精密度好。

4.3重现性试验制备6份供试品（批号：20070301）溶液，精密吸取10 μL，分别进样测定，记录色谱图，计算含量，平均值为4.30 mg/袋，RSD为0.86%，表明5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷含量重现性好。

4.4稳定性试验制备一份供试品溶液，于0、0.5、1、2、4、6、24 h不同时间按样品测定的方法进行测定，结果表明供试品溶液在24 h内峰面积无明显变化，表明供试品溶液在24 h稳定性良好。

4.5回收率试验采用加样回收法，取贯黄感冒颗粒样品适量，精密加入高浓度（2.5 mg/mL）、中浓度（2.2 mg/mL）、低浓度（1.7 mg/mL）3个浓度的对照品溶液，按供试品溶液的方法制备高、中、低三个浓度供试品溶液，每个浓度分别制备3份，分别测定，结果回收率为99.16%，RSD为1.39%（n=9）。

4.6专属性试验取处方中除路边青外的其他药材按处方工艺和供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液；取5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷、贯黄感冒颗粒适量，用甲醇制备对照品溶液和供试品溶液；取上述3种溶液各10μl注入液相色谱仪，发现阴性溶液无干扰。见图1

4.7含量测定取对照品溶液、供试品溶液各10 μL，分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以外标法计算含量即得，结果见表1：

参考文献：

[1]海南省标准[S].琼Q/WS-166-94.

[2]张艳秋.贯黄感冒颗粒（无糖型）质量标准研究[J].中国现代应用药学杂志，2004，21（6）：502.endprint

摘要：目的建立贯黄感冒颗粒中5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮甙含量测定方法。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为Agilent Zorbax SB C18（4.6×250mm，5μm），流动相为水-乙腈（65∶35），检测波长为330nm，流速1 mL·min-1。结果5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷进样量在81.6ng～1020ng范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999954），平均回收率为99.16%，RSD为1.39%（n=9）。结论本法准确可靠，对提高贯黄感冒颗粒质量标准提供了依据。

关键词：贯黄感冒颗粒；含量测定；方法

中图分类号：R284.2文献标志码：A文章编号：1007-2349（2014）03-0054-02

贯黄感冒颗粒是由贯众、黄皮叶、路边青、三叉苦、生姜、马来酸氯苯那敏加工制成的中药复方制剂，具有清热解表，宣肺止咳的功效。临床上常用于治疗风热感冒所致的发热恶风，头痛鼻塞，咳嗽痰多。贯黄感冒颗粒质量标准过去为海南省地方标准[1]，曾有关于对其处方中中药材路边青进行薄层色谱鉴别和对其处方中马来酸氯苯那敏进行含量测定的报道[2]。现行的标准中也将这两者列入了贯黄感冒颗粒质量标准中，但未见对其处方中其他中药材成分进行含量测定的研究报道。5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷为本公司从其处方中药材路边青中提取分离纯化所得的单一成分，采用HPLC法对贯黄感冒颗粒中的该成分进行含量测定研究，为提高贯黄感冒颗粒质量标准提供了参考依据。

1仪器、试验材料、对照品、样品

仪器：美国Waters高效液相色谱仪（600泵；2487双波长紫外检测器；7725i手动进样器）；TU-1901普析双光束紫外可见分光光度计；赛多利斯BP221S万分之一电子天平；赛多利斯MC210S十万分之一电子天平。

试验材料：乙腈、甲醇为色谱纯（美国Fisher公司）；其余均为分析纯试剂；水为超纯水。

对照品：5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷（归一化法测得含量为98.64%，批号：20070101），由昆明圣火药业（集团）有限公司技术开发中心提供。

样品：贯黄感冒颗粒，由昆明圣火药业（集团）有限公司提供。

2色谱条件

色谱柱：Agilent Zorbax SB C18（4.6×250 mm，5 μm）；流动相：水-乙腈（65∶35）；检测波长：330 nm；流速：1 mL/min；进样量：10 μL；柱温：25℃。

3溶液的配制

3.1对照品配制精密称取5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷适量，加甲醇使溶解，制成每1 mL含40 μg的溶液，即得。

3.2供试品溶液制备取装量差异项下的本品内容物，研细，取约10 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

4方法与结果

4.1线性关系考察取5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷对照品溶液，分别进样2、5、10、15、20、25 μL。记录色谱图，以峰面积为纵坐标（Y），以进样量（ng）为横坐标（X），进行线性回归，得回归方程：Y=2.78×106X+8.21×103，r=0.999954。表明5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷在81.6 ng～1020 ng范围内呈良好的线性关系。

4.2精密度试验制备1份供试品溶液，精密吸取10 μL，连续进样6次，记录色谱图，峰面积平均值为2211543，RSD为0.78%。表明5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷含量精密度好。

4.3重现性试验制备6份供试品（批号：20070301）溶液，精密吸取10 μL，分别进样测定，记录色谱图，计算含量，平均值为4.30 mg/袋，RSD为0.86%，表明5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷含量重现性好。

4.4稳定性试验制备一份供试品溶液，于0、0.5、1、2、4、6、24 h不同时间按样品测定的方法进行测定，结果表明供试品溶液在24 h内峰面积无明显变化，表明供试品溶液在24 h稳定性良好。

4.5回收率试验采用加样回收法，取贯黄感冒颗粒样品适量，精密加入高浓度（2.5 mg/mL）、中浓度（2.2 mg/mL）、低浓度（1.7 mg/mL）3个浓度的对照品溶液，按供试品溶液的方法制备高、中、低三个浓度供试品溶液，每个浓度分别制备3份，分别测定，结果回收率为99.16%，RSD为1.39%（n=9）。

4.6专属性试验取处方中除路边青外的其他药材按处方工艺和供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液；取5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷、贯黄感冒颗粒适量，用甲醇制备对照品溶液和供试品溶液；取上述3种溶液各10μl注入液相色谱仪，发现阴性溶液无干扰。见图1

4.7含量测定取对照品溶液、供试品溶液各10 μL，分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以外标法计算含量即得，结果见表1：

参考文献：

[1]海南省标准[S].琼Q/WS-166-94.

[2]张艳秋.贯黄感冒颗粒（无糖型）质量标准研究[J].中国现代应用药学杂志，2004，21（6）：502.endprint

摘要：目的建立贯黄感冒颗粒中5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮甙含量测定方法。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为Agilent Zorbax SB C18（4.6×250mm，5μm），流动相为水-乙腈（65∶35），检测波长为330nm，流速1 mL·min-1。结果5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷进样量在81.6ng～1020ng范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999954），平均回收率为99.16%，RSD为1.39%（n=9）。结论本法准确可靠，对提高贯黄感冒颗粒质量标准提供了依据。

关键词：贯黄感冒颗粒；含量测定；方法

中图分类号：R284.2文献标志码：A文章编号：1007-2349（2014）03-0054-02

贯黄感冒颗粒是由贯众、黄皮叶、路边青、三叉苦、生姜、马来酸氯苯那敏加工制成的中药复方制剂，具有清热解表，宣肺止咳的功效。临床上常用于治疗风热感冒所致的发热恶风，头痛鼻塞，咳嗽痰多。贯黄感冒颗粒质量标准过去为海南省地方标准[1]，曾有关于对其处方中中药材路边青进行薄层色谱鉴别和对其处方中马来酸氯苯那敏进行含量测定的报道[2]。现行的标准中也将这两者列入了贯黄感冒颗粒质量标准中，但未见对其处方中其他中药材成分进行含量测定的研究报道。5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷为本公司从其处方中药材路边青中提取分离纯化所得的单一成分，采用HPLC法对贯黄感冒颗粒中的该成分进行含量测定研究，为提高贯黄感冒颗粒质量标准提供了参考依据。

1仪器、试验材料、对照品、样品

仪器：美国Waters高效液相色谱仪（600泵；2487双波长紫外检测器；7725i手动进样器）；TU-1901普析双光束紫外可见分光光度计；赛多利斯BP221S万分之一电子天平；赛多利斯MC210S十万分之一电子天平。

试验材料：乙腈、甲醇为色谱纯（美国Fisher公司）；其余均为分析纯试剂；水为超纯水。

对照品：5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷（归一化法测得含量为98.64%，批号：20070101），由昆明圣火药业（集团）有限公司技术开发中心提供。

样品：贯黄感冒颗粒，由昆明圣火药业（集团）有限公司提供。

2色谱条件

色谱柱：Agilent Zorbax SB C18（4.6×250 mm，5 μm）；流动相：水-乙腈（65∶35）；检测波长：330 nm；流速：1 mL/min；进样量：10 μL；柱温：25℃。

3溶液的配制

3.1对照品配制精密称取5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷适量，加甲醇使溶解，制成每1 mL含40 μg的溶液，即得。

3.2供试品溶液制备取装量差异项下的本品内容物，研细，取约10 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

4方法与结果

4.1线性关系考察取5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷对照品溶液，分别进样2、5、10、15、20、25 μL。记录色谱图，以峰面积为纵坐标（Y），以进样量（ng）为横坐标（X），进行线性回归，得回归方程：Y=2.78×106X+8.21×103，r=0.999954。表明5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷在81.6 ng～1020 ng范围内呈良好的线性关系。

4.2精密度试验制备1份供试品溶液，精密吸取10 μL，连续进样6次，记录色谱图，峰面积平均值为2211543，RSD为0.78%。表明5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷含量精密度好。

4.3重现性试验制备6份供试品（批号：20070301）溶液，精密吸取10 μL，分别进样测定，记录色谱图，计算含量，平均值为4.30 mg/袋，RSD为0.86%，表明5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷含量重现性好。

4.4稳定性试验制备一份供试品溶液，于0、0.5、1、2、4、6、24 h不同时间按样品测定的方法进行测定，结果表明供试品溶液在24 h内峰面积无明显变化，表明供试品溶液在24 h稳定性良好。

4.5回收率试验采用加样回收法，取贯黄感冒颗粒样品适量，精密加入高浓度（2.5 mg/mL）、中浓度（2.2 mg/mL）、低浓度（1.7 mg/mL）3个浓度的对照品溶液，按供试品溶液的方法制备高、中、低三个浓度供试品溶液，每个浓度分别制备3份，分别测定，结果回收率为99.16%，RSD为1.39%（n=9）。

4.6专属性试验取处方中除路边青外的其他药材按处方工艺和供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液；取5-羟基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黄酮苷、贯黄感冒颗粒适量，用甲醇制备对照品溶液和供试品溶液；取上述3种溶液各10μl注入液相色谱仪，发现阴性溶液无干扰。见图1

4.7含量测定取对照品溶液、供试品溶液各10 μL，分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以外标法计算含量即得，结果见表1：

参考文献：

[1]海南省标准[S].琼Q/WS-166-94.

[2]张艳秋.贯黄感冒颗粒（无糖型）质量标准研究[J].中国现代应用药学杂志，2004，21（6）：502.endprint