不同处理方法对鱼金注射液含量影响

肖志强，任 哲，杨建刚，郭 晨

(陕西新药技术开发中心，陕西西安 710075)

鱼金注射液属于国家中药二类新药，具有清热解毒的作用，临床上主要用于治疗急性上呼吸道感染、急性支气管炎等［1］。该注射液以鱼腥草、金银花为主药，采用水蒸气蒸馏法提取挥发性成分，经配制而成的纯中药静脉用注射剂。

为了研究注射液中甲基正壬酮含量在不同前处理方法的含量变化情况，我们以乙酸乙酯为溶剂，分别采用萃取法、回流法对鱼金注射液进行前处理，采用气相色谱法［2］，用键合交联聚乙二醇为固定液的毛细管柱分离，氢火焰离子化检测器检测，对两种方法提取出的甲基正壬酮进行定量分析［3-4］。以期为鱼金注射液含量测定方法选择提供可靠的依据。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

甲基正壬酮(中国药品生物制品检定所，批号:120420);鱼金注射液(陕西医药控股集团山海丹药业有限责任公司，批号:13070060，13080067，13080068);乙酸乙酯、氯化钠均为分析纯。

GC7890A气相色谱(包括Chemstation工作站，AgilentG4567A系列自动进样器，FID检测器);AG-135型电子分析天平;HH-S4型电热恒温水浴锅;PB3002-S型电子分析天平;挥发油提取器及冷凝装置。

1.2 色谱条件

色谱柱为键合交联聚乙二醇为固定液的毛细管柱(60 m×250μm×0.25μm)，载气为高纯度氦气，FID检测器，载气流速1.2 mL/min，进样口温度230℃，检测器温度280℃，分流比为5∶1，程序升温初始80℃，保持5 min，以5℃/min升温速率升至220℃，保持3 min，进样量为1μL。

1.3 供试品溶液的制备

1.3.1 鱼金注射液萃取法处理 精密量取鱼金注射液25 mL，置具塞试管中，加入乙酸乙酯5 mL，氯化钠5 g，振摇3 min。分取乙酸乙酯层，再加入乙酸乙酯5 mL，振摇3 min，分取乙酸乙酯层。合并乙酸乙酯提取液转至10 mL量瓶中，用乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀。

1.3.2 鱼金注射液回流法处理 精密量取鱼金注射液25 mL，置圆底烧瓶中，加水25 mL，连接挥发油测定器。自测定器上端加水使充满刻度部分，再加醋酸乙酯约3 mL，连接回流冷凝管。加热回流2 h，停止加热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，测定器用醋酸乙酯洗涤3次，每次2 mL，合并洗涤液，置蒸发器中60℃水浴，通氮气蒸至近干，定量转移至2 mL量瓶中，并加醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀。

1.4 标准品溶液的制备

取甲基正壬酮标准品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1 mL含甲基正壬酮41.04μg的标准品溶液。

1.5 样品测定

按1.2节条件方法，分别吸取标准品溶液、供试品溶液1.0μL，进样于气相色谱仪，以外标法计算含量。

2 结果与讨论

2.1 保留时间的确定

将色谱纯甲基正壬酮用乙酸乙酯溶解后，按1.2节条件方法进行分析，保留时间见表1，典型色谱图见图1。

表1 甲基正壬酮的保留特性Table1 Retention characteristics of methylnonylketone

图1 标样(a)和样品(b)的色谱图Fig.1 Chromatogram of standard sample(a)and typical sample(b)

2.2 两种方法检测结果对比

在气相色谱进行含量测定过程中没有采用顶空进样，原因是考虑到生产厂家检测的快捷方便，和该种方法的适用性。在萃取过程中，剧烈的震摇会产生乳化现象，可采用冰箱冷藏来消除乳化现象。

表2 甲基正壬酮含量Table2 Content of methylnonylketone

由表2可知，鱼金注射液在回流提取条件下，同一批次含量很不稳定，而萃取前处理条件下有效成分甲基正壬酮的含量更均一，有利于方法的建立。

3 结论

(1)回流法提取甲基正壬酮，采用挥发油测定器收集得到的甲基正壬酮，时间在3 h以上才能提取完全，在样品处理中费时，不利于样品的快速检测。

(2)回流法提取甲基正壬酮在样品溶液浓缩过程中，为保证样品稳定不被分解，采用通氮气的方法，这样加大了样品前处理的难度。

(3)回流法提取甲基正壬酮为国家批准的生产用质量标准前处理方法，通过实验发现每一批次因受加热温度的影响，含量不均一，因此结合生产快速检测的要求，我们对萃取法进行研究，发现可以作为生产用质量标准，方法精密度高，耗时短，简便、快捷［5］。现在我们已经申请国家药监局进行质量标准升级。

［1］ 刘杰，陈海金.鱼金注射液的一般药理学研究［J］.中国药物与临床，2009，9(3):223-224.

［2］ 王永苗.气相色谱法测定洗油中甲基萘的含量［J］.应用化工，2013，42(6):1156-1158.

［3］ 韩爽，张明时，周贻兵，等.气相色谱法测定鱼腥草干品中甲基正壬酮的含量［J］.安徽农业科学，2010，38(28):15606-15607.

［4］ 宁娜，韩建军.鱼腥草活性成分提取工艺研究进展［J］.黑龙江医药，2013，26(4):617-619.

［5］ 田锋贤.对鱼金注射液质量标准的商榷［J］.陕西中医学院学报，2006，29(4):67-68.