IL—6、IL—12、 IL—33在丙型肝炎患者中的表达及其临床意义

何敬远

[摘要] 目的 探讨丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33含量的变化及其临床意义。 方法 ELISA法检测30例丙型肝炎患者、30例丙型肝炎病毒携带者及30例健康对照者血清中IL-6、IL-12及IL-33的表达水平。 结果 相比丙型肝炎病毒携带者及健康对照者，丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的表达水平显著升高（P<0.01），且丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量显著高于丙型肝炎病毒携带者（P<0.01）；经治疗后丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量显著降低（P<0.01）。 结论 IL-6、IL-12及IL-33介导的免疫应答参与了丙型肝炎的发病，在丙型肝炎病毒感染的致病机制中有一定的临床价值。

[关键词] 白细胞介素-6；白细胞介素-12；白细胞介素-33；丙型肝炎

[中图分类号] R512.63 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2014）12-123-03

丙型病毒性肝炎是一种由丙型肝炎病毒（HCV）感染引起的病毒性肝炎，其传播途径和特征与乙型肝炎病毒相似[1]。据世界卫生组织统计，全球HCV的感染率约为3%，每年新发丙型肝炎病例约3.5万例[2]。细胞因子在病毒性肝炎的免疫病理过程中的作用，已受到国内外学者的关注[3]。然而，关于IL-6、IL-12及IL-33这三种细胞因子在丙型肝炎发病中的作用研究还很少，据此，我们对30例慢性丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量进行了检测，期望从细胞因子角度探讨HCV导致丙型肝炎发生及肝脏损害的机制，结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2013年2～12月深圳市南山医院门诊及住院的30例慢性丙型肝炎患者，年龄26～45岁，平均（35.5±7.8）岁，30例丙型肝炎病毒携带者，年龄25～47岁，平均（36.7±8.1岁），同时收集体检中心检验合格的30例健康人，年龄25～45岁，平均（35.4±7.5岁）作为对照。

1.2 标本收集

清晨抽取各组研究人员的空腹静脉血2mL，3000rpm离心15min，留取外周血上清。

1.3 方法

1.3.1 血清样本采集 所有对象均在治疗前及治疗6个月后采用肝素抗凝管空腹采血5mL，静止30min后，3000rpm离心10min，取上层血清冻存于-80℃冰箱中备用。

1.3.2 ELISA法测定IL-6、IL-12及IL-33含量 试剂盒购自R&D;公司，严格按照说明书要求操作如下：将血清样品和标准品100μL加入孔中，另留出空白对照孔，用封板膜封住反应孔，37℃孵育90min；每孔加入250μL洗涤液，震荡1min/次洗板，共4次；加入配制好的生物素化抗体工作液100μL孔，37℃孵育60min；洗板4次；加入酶结合物工作液100μL孔，37℃孵育30min；洗板4次；加入显色剂100μL/well，避光，37℃孵育10～20min；加入终止液100μL/well，短暂震荡混匀后立即测量OD450值。

1.3.3 治疗方法 常规肝治疗基础上加用重组干扰素治疗。具体治疗方法为300万U重组干扰素肌肉注射，1次/d，治疗2周后改为隔日1次，疗程为6个月。治疗过程中密切监视患者肝功能和血、尿常规等。

1.4 统计学分析

采用SPSS16.0 软件，以方差分析和t检验的方法对数据进行统计分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清IL-6、IL-12及IL-33含量比较

与丙型肝炎病毒携带者及健康对照者相比，丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的表达水平显著升高（P<0.01），且丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量显著高于丙型肝炎病毒携带者（P<0.01）。2.2 治疗前后丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12及IL-33含量比较

经治疗后丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量显著降低（P<0.01）。见表2。

3 讨论

丙型肝炎呈全球性流行，丙型肝炎病毒（HCV）侵入机体后可造成干细胞变形坏死[4-6]，导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞癌（HCC）[7]。HCV是如何导致丙型肝

炎发生及其是通过何种方式导致肝脏损害的目前尚不完全清楚[8]。IL-6、IL-12及IL-33均为体内细胞免疫的重要参与分子[9-11]。IL-6是一种Th2型的细胞因子，可抑制Th1细胞分泌IL-2和IFN-γ等参与细胞免疫的重要细胞因子，从而降低机体清除病毒的能力[12]。IL-12作用与IL-6相反，IL-12可促进Th1型细胞免疫应答，增强机体抗感染免疫的能力。我们的研究发现，丙型肝炎患者血清中IL-6和IL-12的含量显著高于丙型肝炎病毒携带者及健康对照者（P<0.01）；据此我们猜测虽然升高的IL-12水平可增强机体抗感染免疫的能力，但由于同时受到升高的IL-6的抑制作用，因此最终导致了丙肝的发生。同时我们还发现，治疗后，IL-12含量下降水平显著低于IL-2含量的下降水平，提示IL-12在此时可发挥机体保护作用，增强机体对HCV的清除能力。IL-33作为白介素家族中的一员，在免疫应答和炎症反应中具有重要的作用。研究发现，肝细胞损伤后可分泌大量的IL-33。本文通过研究发现丙型肝炎患者血清中IL-33的含量显著高于丙型肝炎病毒携带者及健康对照者（P<0.01）。同时，经治疗后丙型肝炎患者血清中上述3种细胞因子的含量显著降低（P<0.01）。据此，我们的结果提示 IL-6、IL-12及IL-33介导的免疫应答参与了丙型肝炎的发病，在丙型肝炎病毒感染的致病机制中有一定的临床价值。

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（收稿日期：2014-04-16）